2 Flashcards
perchè la replicazione di dna è semiconservativa?
perchè la doppia elica si apre e ciascuno dei due filamenti funge da stampo per il filamento complementare. Dopo la prima replicazione il DNA sarà rappresentato per il 50% dall’elica parentale e per il 50% dall’elica di nuova sintesi
quali furono le ipotesi sulla duplicazione di dna?
-conservativo: doppia elica stampo per creazione di nuova doppia elica
-dispersivo: dna parentale frammentato si mescola con quello nuovo
esperimento di Meselson e Stah
Meselson e Stahl fecero crescere i batteri all’interno di
una coltura cellulare contenente l’isotopo pesante dell’azoto (15N)
Se trasferisco le cellule con il DNA contenente azoto pesante (15N) in un terreno contenente
azoto leggero (14N), i DNA di nuova sintesi conterranno azoto leggero.
Prelevando dopo la prima replicazione, notarono che il dna era caratterizzato da una densità
leggermente inferiore, rispetto a quella del DNA parentale. Andando avanti con le
replicazioni, dopo altri 30 minuti, notarono un’altra banda di DNA, tutta formata da DNA leggero, di nuova sintesi
come avviene la centrifugazione su un gradiente di concentrazione?
Quando eseguo una
centrifugazione su un gradiente di concentrazione (es. gradiente di cloruro di cesio) posso centrifugare diversi componenti, ciascuno di questi si fermerà nella regione che corrisponde alla propria densità. Molecole a diversa densità si stratificano su un gradiente diverso
dove avviene la replicazione di dna?
procarioti: origine di replicazione ORI-C, a cui si lega la proteina iniziatrice DNA-A
eucarioti: molte origini di replicazione in cui si forma la forcella replicativa, essa avviene prima nelle regioni di eucromatina
quando è completa la replicazione di dna?
quando si incontrano le forcelle replicative e si fondono i repliconi
enzimi nella replicazione del dna e nell’apertura dell’elica
dna polimerasi: aggiungono nt all’estremità 3’
elicasi: svolgono doppia elica
topoisomerasi: riducono tensione elica; tipo 1 (tagliano 1 elica) e 2: tagliano 2 eliche
DNA primasi: crea tratti di rna per innescare dna polimerasi
SSB proteins
proteine che si legano alle basi azotate per non far riunire i due filamenti di DNA
girasi
telomerasi di tipo 2 nei procarioti
in che direzione procede la replicazione?
5’-3’
qual è la differenza fra i due filamenti di dna?
-leading strand: replicazione continua (5’-3’)
-lagging strand/filamento ritardato: discontinua con frammenti di okazaki
attività esonucleasica dna-polimerasi
-se c’è un errore nella replicazione le dna polimerasi tornano indietro e la correggono
-eliminano il primer di RNA per sintesi di dna
quali sono le dna-polimerasi ad attività esonucleasica?
dna pol 3: procarioti
dna pol alfa e delta per eucarioti
dna polimerasi TLS
replicano il dna anche se ci sono danni
da cosa dipende l’inizio di replicazione del dna negli eucarioti?
legame fra complesso RFC (fattore di replicazione c) e proteina PCNA (antigene nucleare di proliferazione cellulare)