1.1.1 Métodos de estudio Flashcards
Nivel de organización formado por células y matriz extracelular
Tejidos
Rama de la medicina que estudia los tejidos del cuerpo humano y su organización
Histología
Parte de los tejidos, su función es el soporte mecánico para las células y ser medio de transporte para nutrientes, productos de secreción y productos de deshecho
Matriz extracelular
¿Quién produce la matriz extracelular?
Células
Procedimiento más utilizado para el estudio de tejidos
Microscopio
Tipo de microscopía en que un corte histológico es atravesado por un haz de luz
Microscopía óptica
Instrumento de gran precisión que secciona tejidos en cortes finos
Microtomo
Fenómenos de distorsión y pérdida de componentes en la preparación histológica
Artefactos
Digestión de tejidos por enzimas existentes en las células o en bacterias
Autólisis
Pasos de la histotécnica
Fijación
Deshidratación
Aclaramiento
Inclusión
Tratamiento con métodos físicos o sustancias químicas que evita la autólisis, preserva estructura y composición molecular
Fijación
Soluciones de agentes desnaturalizantes o agentes que estabilizan las moléculas mediante la formación de puentes con moléculas adyacentes
Fijadores
Método en que el fijador alcanza rápidamente la parte interna de tejidos a través de vasos sanguíneos
Perfusión intravascular
Uno de los mejores fijadores que es muy habitualmente usado
Solución isotónica tamponada de formaldehído al 4%
Mecanismo de funcionamiento de fijadores
Reaccionan con NH2 de las proteínas
Dialdehído fijador que induce a enlaces cruzados entre proteínas
Gutaraldehído
Tipo de fijación utilizada para microscopio electrónico
Doble fijación con gutaraldehído y tetroxido de osmio
Fijador cuyo efecto es la preservación y el incremento del contraste de los lípidos y proteínas
Tetróxido de osmio
Proceso en el que se proporciona consistencia rígida a los tejidos a través de la impregnación de sustancias
Inclusión
Sustancia de inclusión utilizada para microscopía óptica
Parafina
Sustancia de inclusión utilizada para microscopía electrónica
Resina de plástico
Método de deshidratación utilizado en una inclusión con parafina
Etanol del 70-100%
Método de deshidratación utilizado en una inclusión con resina de plástico
Etanol del 70-100%
Sustancia utilizada para la aclaración (sustitución de etanol) en la inclusión con parafina
Xilol
Método utilizado para sustitución del etanol en la inclusión con resina de plástico
Soluciones de plástico endurecidas por polimerización
Temperatura en que se realiza el baño de parafina para la inclusión
58-60 °C
2 Ventajas de inclusión con resina de plástico
Evita artefactos por temperatura
Permite cortes más finos
Materiales de los que esta hecho la cuchilla del microtómo
Acero, vidrio (MO) cristal, diamante (ME)
Grosor de los cortes que se obtienen con un microtomo
1-10 μm
Pasos posteriores al corte con el microtomo
Baño de agua para planchado
Colocación en portaobjetos
Tinción
Método utilizado para la preparación rápida de cortes histológicos, (por ejemplo durante intervenciones quirúrgica) también usado para estudio histoquímico
Congelación
Tipo molecular que se disuelve por la inmersión de tejidos en xilol
Lípidos
Componentes de los tejidos que se tiñen bien con colorantes básicos
Basófilos
Componentes de los tejidos que presentan una mayor afinidad por los colorantes ácidos
Acidófilos
Ejemplos de colorantes básicos
Hematoxilina
Azul de toluidina
Azul de metileno
Ejemplos de colorantes ácidos
Eosina
Naranja
Fucsina ácida
Tipo de colorante que actúa en ácidos nucleicos, glucosaminoglucanos y glucoproteínas ácidas
Colorantes básicos
Tipo de colorantes que actúa en gránulos de secreción, proteínas citoplasmáticas y colágeno
Colorantes ácidos
Técnica de tinción más utilizada
Hematoxilina y eosina
Tipo de tinción utilizado para definir bien el núcleo y citoplasma, facilitar diferenciación ente colágeno y músculo liso
Tricrómico (ej. Mallory o Masson)
Técnica adecuada para el estudio y diferenciación del colágeno
Pricosirio visualizado con luz polarizada
Técnica de tinción aplicada a un corte histológico para facilitar la visualización de los contornos de las células y núcleos
Tinción de contraste
Método frecuente en el estudio del sistema nervioso
Impregnación de sales metales (oro o plata)
3 sistemas de lentes que forman el componente óptico en la microcopia óptica
Condensador
Objetivo
Ocular
Lente parte del componente óptico en la microscopía óptica que concentra la luz y muestra un haz luminosos sobre la muestra
Condensador
Lente parte del componente óptico en la microscopía óptica que proyecta una imagen aumentada del objeto hacia el ocular
Objetivo
Lente parte del componente óptico en la microscopía óptica que amplía más la imagen y la proyecta
Ocular
Lugares a donde se proyecta la imagen desde el ocular
Retina
Pantalla
Negativo
Detector
Fórmula para determinar la ampliación total ofrecida por un microscopio óptico
Aumento de objetivo x aumento de ocular
Distancia menor existente entre 2 partículas o líneas para ser visualizadas como 2 objetos distintos
Poder de resolución
Poder máximo de resolución es llamado
Límite de resolución
Límite de resolución del microscopio óptico
.2 μm
Número aproximado de aumentos de imagen para que se obtengan imágenes adecuadas en un microscopio óptico
1 000 - 1 500 veces
Factor que determina la riqueza de detalles en la imágen obtenida por un sistema óptico (límite de resolución o poder amplificante)
Límite de resolución
Con aumentos mayores se ofrece un poder de resolución… (Bajo o elevado)
Elevado
Tipo de microscopia que utiliza un sistema de lentes que da lugar a imágenes visibles de estructuras casi transparentes
Microscopía de contraste de fases
Índice dado por el hecho de que la luz modifica su velocidad al atravesar estructuras
Índice de refracción
Instrumento que permite estudiar las células de los tejidos no teñidos dando una imagen aparentemente tridimencional
Microscopia de contraste interferencial o de Nomarski
Tipo de microscopia que utiliza un filtro polarizado y perpendicular a el un filtro que bloquea el paso de luz, sirve para observar átomos y moléculas con elevado grado de orientación
Microscopia de polarización
Capacidad de distintas estructuras de modificar el plano de vibración de la luz polarizada
Birrefrigerencia
Tipo de microscopia que hace posible localizar un plano de foco muy delgado de la muestra
Microscopia confocal
Tipo de iluminación utilizado en la mayoría de los microscopios confocales
Láser
Tipo de marcador que se utiliza en la microscopia confocal para el componente de la muestra que se desea visualizar
Molécula fluorescente
En la microscopia confocal captura la luz reflejada para posteriormente ampliar la señal y permitir la visualización en un monitor
Detector
Forma de llamar a un plano focal muy delgado
Sección óptica
Fenómeno en que ciertas sustancias reciben la luz de cierta longitud de onda y emiten luz cuya longitud de onda es mayor
Fluorescencia
Tipo de iluminación utilizado en la microscopia de fluorescencia
Luz ultravioleta
Tipo de colorante fluorescente utilizado para visualizar ADN y ARN
Naranja de acridina
Color de la fluorescencia emitida por el complejo formado por ADN y naranja de acridina
Verde amarillento
Color de la fluorescencia emitida por el complejo formado por ARN y naranja de acridina
Verde-anaranjado
Tipo de microscopia fundamentada en las interacciones de los electrones y los componentes de los tejidos
Mcroscopia electrónica (de transmisión y de barrido)
Resolución teórica y práctica de un microscopio electrónico de transmisión
.1 nm y 3 nm
Número de ampliaciones que permite un microscopio electrónico de transmisión en análisis de partículas aisladas y número de ampliaciones usadas en observación de tejidos
400 000 veces , 120 000 veces
Principio en el que se fundamenta el funcionamiento de un microscopio electrónico
Los electrones pueden ser desviados por campos electromagnéticos de manera semejante a la refracción de la luz por lentes de cristal