1. Sélection positive et négative des cellules T Flashcards

1
Q

De quoi est constitué le thymus ?

A

Le thymus est constitué de deux lobes divisés en plusieurs lobules.

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Q

Quel est le nom des cellules T en cours de différenciation dans le thymus ?

A

Thymocytes

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3
Q

Quels sont les deux zones principales du thymus ?

A
  • Cortex
  • Médulla
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4
Q

Quelles molécules du CMH sont exprimées par les cellules épithéliales du thymus, les cellules dendritiques et les macrophages ?

A

CMH de classe I et II

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5
Q

Où se trouvent les macrophages et les cellules dendritiques dans le thymus ?

A

- Marcophages : répartis dans tout l’organe.

- Cellules dendritiques : la jonction cortico-médullaire et la médulla.

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6
Q

Quelles cellules spécifiques trouve-t-on dans le cortex du thymus ?

A

Cellules épithéliales corticales (CEC), macrophages et thymocytes (DN et DP).

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7
Q

Quelles cellules spécifiques trouve-t-on dans la jonction cortico-médullaire ?

A

Cellules dendritiques (DC), thymocytes DP et précurseurs hématopoiétiques.

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8
Q

Quelles cellules spécifiques trouve-t-on dans la médulla ?

A

Cellules épithéliales médullaires (MEC), cellules dendritiques (DC) et thymocytes CD4SP/CD8SP.

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9
Q

Par quelle structure les précurseurs hématopoiétiques entrent-ils dans le thymus ?

A

Par la jonction cortico-médullaire.

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10
Q

Quel mécanisme pousse les précurseurs hématopoiétiques à s’engager vers la différenciation en lymphocytes T ?

A

Les ligands de Notch, exprimés par les cellules épithéliales du thymus, se lient aux récepteurs Notch présents sur les précurseurs hématopoiétiques, déclenchant leur engagement vers la différenciation en lymphocytes T.

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11
Q

Que se passe-t-il après la bêta-sélection dans le développement des thymocytes ?

A

Après la bêta-sélection (expression et signalisation du pré-RCT), les thymocytes doubles positifs (DP) arrêtent de proliférer.

Cela stabilise la protéine RAG2, ce qui permet le réarrangement du locus alpha du récepteur des cellules T (RCT), ce qui est essentiel pour produire un récepteur fonctionnel capable de reconnaître des antigènes.

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12
Q

Quels sont les objectifs de la sélection positive et négative des thymocytes ?

A
  • Créer un répertoire de cellules T restreint au CMH mais autologues.
  • S’assurer que la cellule T exprime un RCT fonctionnel.
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13
Q

Quelles sont les conséquences fonctionnelles des étapes de sélection ?

A

- Sélection positive : Survie des lymphocytes T exprimant un RCT capable d’interagir avec les molécules de classe I ou II du CMH du soi (restriction par le CMH).

- Sélection négative : Les thymocytes qui reconnaissent le CMH de manière trop forte (auto-réactifs) sont éliminés.

Ces processus aboutissent à des cellules T capables de reconnaître les antigènes via le CMH tout en étant tolérantes au soi.

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14
Q

Est-ce que la sélection négative se poursuit-elle après le stade DP ?

A

Oui, la sélection négative continue au stade simple positif (SP) pour éliminer les thymocytes qui pourraient encore être fortement auto-réactifs.

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15
Q

Quelle proportion des thymocytes meurt par apoptose durant la sélection thymique ? Pourquoi ?

A

Environ 98 %

La majorité meurt par manque de sélection positive, car leur RCT n’est pas capable d’interagir avec les molécules de classe I ou II du CMH. Environ 2 à 5 % meurent à cause de la sélection négative (auto-réactivité excessive).

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16
Q

Les cellules T deviennent-elles restreintes pour le CMH lors de leur développement dans le thymus?

A

Oui, les cellules T deviennent restreintes pour le CMH lors de leur développement dans le thymus. Cette restriction survient grâce à la sélection positive, où seules les cellules T capables de reconnaître un peptide présenté par les molécules de CMH du thymus (sur les cellules stromales épithéliales) survivent.

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17
Q

Quelle était l’hypothèse testée dans cette expérience?

A

L’hypothèse testée était que les cellules T matures deviennent restreintes au CMH exprimé par les cellules stromales du thymus pendant leur maturation, même si le reste du système immunitaire exprime d’autres haplotypes de CMH.

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18
Q

Quelle manipulation a été effectuée pour tester cette hypothèse?

A
  • Greffe d’un thymus MHC b (irradié pour éliminer les cellules T matures) à des souris (A x B) F1 thymectomisées et irradiées.
  • Reconstitution du système hématopoiétique avec des cellules souches de moelle osseuse F1 (A x B).
  • Infection des souris avec le virus LCMV.
  • Analyse de l’activité cytotoxique des cellules T matures contre des cibles MHC a et MHC b.
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19
Q

Quels étaient les résultats principaux de cette expérience?

A

Les cellules T matures issues du thymus greffé n’ont lysé que les cibles MHC b. Cela démontre que la sélection des cellules T dépend du CMH exprimé par les cellules stromales épithéliales du thymus greffé.

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20
Q

Pourquoi observe-t-on une restriction au CMH b malgré la présence de cellules dendritiques et de macrophages exprimant MHC a?

A

La sélection positive des cellules T dans le thymus est dictée par les molécules de CMH exprimées par les cellules stromales épithéliales radio-résistantes, et non par les cellules dendritiques ou macrophages. Ainsi, seules les cellules T capables de reconnaître MHC b survivent.

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21
Q

Est-ce que les cellules dendritiques peuvent induire la sélection positive des thymocytes ?

A

Non, la sélection positive se fait exclusivement dans le cortex thymique et est médiée par les cellules épithéliales corticales exprimant les molécules de classe I et II du CMH. Les cellules dendritiques, situées à la jonction corticomédullaire et dans la médulla, interviennent plutôt dans la sélection négative.

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22
Q

Quel rôle jouent les macrophages dans le thymus ?

A

Les macrophages thymiques ne participent pas directement à la sélection positive ou négative. Leur rôle principal est de phagocyter les thymocytes apoptotiques qui meurent durant le processus de sélection thymique.

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23
Q

Quels sont les deux lieux principaux des étapes de sélection thymique ?

A
  • Cortex thymique : Sélection positive des thymocytes DP (interaction avec les cellules épithéliales).
  • Jonction corticomédullaire et médulla : Sélection négative pour éliminer les thymocytes auto-réactifs (interaction avec des cellules dendritiques ou macrophages).
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24
Q

Quelle est la durée de survie des thymocytes DP dans le cortex ?

A

Les thymocytes DP survivent environ quatre jours dans le cortex, le temps de tester leurs chaînes alpha de RCT pour leur interaction avec le CMH.

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25
Q

Comment la sélection positive influence-t-elle la migration des thymocytes

A

La sélection positive sélectionne les thymocytes exprimant un RCT fonctionnel, ce qui les pousse à migrer du cortex vers la jonction corticomédullaire, puis vers la médulla pour la sélection négative.

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26
Q

Quels peptides sont chargés sur les molécules du CMH dans le thymus en l’absence d’infection ?

A

Il ne faut pas oublier que les molécules du CMH sont toujours chargées avec un peptide. En absence d’infection, ce sera des peptides dérivés de nos propres protéines qui seront chargés sur les molécules du CMH.

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27
Q

Qu’est-ce qu’une souris KO et pourquoi est-elle utile ?

A

Une souris KO (Knockout) est une souris dans laquelle un gène a été invalidé, rendant la protéine qu’il code non fonctionnelle. Elle est utile pour étudier la fonction d’un gène spécifique et son impact biologique.

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28
Q

Est-ce que l’absence de molécules de classe I et II du CMH affecte la génération des thymocytes DP ?

A

Non, la génération des thymocytes DN (CD4⁻CD8⁻) et DP (CD4⁺CD8⁺) est indépendante des molécules de CMH.

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29
Q

Est-ce que l’absence de molécules de classe I du CMH affecte-t-elle le développement des thymocytes SP ?

A

En l’absence de molécules de classe I du CMH, les thymocytes CD8⁺SP ne sont pas produits, car leur sélection positive dépend des interactions avec le CMH de classe I.

30
Q

Est-ce que l’absence de molécules de classe II du CMH affecte-t-elle le développement des thymocytes SP ?

A

En l’absence de molécules de classe II du CMH, les thymocytes CD4⁺SP ne sont pas produits, car leur sélection positive dépend des interactions avec le CMH de classe II.

31
Q

Vrai ou Faux ? La sélection positive se produit au stade DP (CD4⁺, CD8⁺) et est dépendante des molécules de classe I ou II du CMH.

A

La sélection positive se produit au stade DP (CD4⁺, CD8⁺) et est dépendante des molécules de classe I ou II du CMH. La spécificité du récepteur des cellules T (RCT) pour les molécules de classe I ou II détermine le choix du co-récepteur :

  • RCT restreint à la classe I → développement des CD8SP.
  • RCT restreint à la classe II → développement des CD4SP.
32
Q

Que se passe-t-il si on exprime les molécules de classe II par transgénèse uniquement dans les cellules épithéliales corticales des souris déficientes en molécules de classe II ?

A

Il y a une restauration de la sélection positive et du développement des cellules CD4SP.

33
Q

Pourquoi la génération des thymocytes DN et DP est-elle normale même en absence de molécules de classe I ou II ?

A

Parce que leur développement initial est indépendant de l’interaction avec un ligand.

34
Q

Que vise à étudier l’expérience utilisant des souris transgéniques exprimant un récepteur de cellule T (RCT) spécifique au peptide viral de la grippe ?

A

L’expérience vise à démontrer que la sélection positive des thymocytes dépend de la correspondance entre le RCT exprimé par les thymocytes et les molécules de CMH exprimées dans le thymus.

Plus précisément, elle examine si des thymocytes CD8⁺ (CD8SP) peuvent se développer lorsque le peptide viral est présenté par différentes molécules de CMH (H-2ᵏ ou H-2ᵈ).

35
Q

Comment les souris transgéniques sont-elles modifiées pour cette expérience ?

A

Les souris transgéniques expriment un RCT monoclonal codé par des gènes transgéniques. Ce RCT est spécifique à un peptide du virus de la grippe présenté par les molécules de classe I du CMH (H-2ᵏ). Les réarrangements endogènes des chaînes alpha et beta du RCT sont inhibés, garantissant que toutes les cellules T expriment le même RCT.

36
Q

Quels sont les résultats observés chez les souris transgéniques exprimant l’haplotype H-2ᵏ vs H-2ᵈ ?

A

Les thymocytes double-positifs (CD4⁺CD8⁺, DP) se développent normalement.

  • H-2ᵏ : Les thymocytes simples positifs CD8⁺ (CD8SP) sont également présents.
  • H-2ᵈ : Les thymocytes simples positifs CD8⁺ (CD8SP) sont absents.
37
Q

Quelle est l’importance de la correspondance entre le RCT et le CMH ? (selon l’expérience)

A

Elle montre que la sélection positive des thymocytes CD8⁺ nécessite une interaction spécifique entre le RCT et le peptide présenté par les molécules de CMH dans le thymus. Si cette correspondance n’existe pas (comme avec H-2ᵈ), les thymocytes CD8⁺ meurent par apoptose et ne se développent pas.

38
Q

Qu’est ce qu’une souris transgénique ?

A

Les souris transgéniques sont des souris génétiquement modifiées pour exprimer un gène supplémentaire (transgéne).

39
Q

Qu’est-ce que l’antigène H-Y et où est-il exprimé ?

A

L’antigène H-Y est un antigène codé par le chromosome Y, donc exprimé uniquement chez les mâles. Il est présent dans tous les tissus, y compris le thymus.

40
Q

Quelle est la différence entre les souris mâles et femelles transgéniques dans l’expérience avec l’antigène H-Y ?

A
  • Souris mâles (H-2Dᵇ) : Elles expriment l’antigène H-Y et subissent une sélection négative des thymocytes reconnaissant H-Y, ce qui empêche la production de cellules T CD8⁺ spécifiques.
  • Souris femelles (H-2Dᵇ) : Elles n’expriment pas H-Y. Les thymocytes spécifiques à H-Y ne rencontrent pas leur antigène et survivent à la sélection, produisant des cellules T CD8⁺.
41
Q

Pourquoi les cellules T CD8⁺ ne sont-elles pas produites chez les souris mâles ?

A

Chez les souris mâles, les thymocytes spécifiques à H-Y rencontrent leur antigène (présent dans le thymus), ce qui déclenche une sélection négative. Cette sélection élimine ces thymocytes pour éviter une réponse auto-immune, empêchant ainsi la production de cellules T CD8⁺ spécifiques.

42
Q

Est-ce que nous retrouverons les mêmes populations de thymocytes (DN, DP, CD4SP et CD8SP) chez le mâle et la femelle ?

A

??

43
Q

Quelle population de thymocytes sera absente chez le mâle ?

A

??

44
Q

Qu’est-ce qu’un superantigène ?

A

C’est une molécule qui active une grande proportion de cellules T (plus de 5 %) en se liant directement à la région Vβ du récepteur des cellules T (RCT), sans nécessiter d’apprêtement ni de restriction au CMH.

Les superantigènes peuvent être exogènes (toxines bactériennes, comme SEA ou SEB) ou endogènes (protéines codées par des rétrovirus intégrés au génome, comme le MMTV).

45
Q

Comment les superantigènes diffèrent-ils des antigènes classiques dans leur reconnaissance par les cellules T ?

A

Contrairement aux antigènes classiques, les superantigènes ne nécessitent pas de présentation via la niche peptidique du CMH. Ils se lient directement et de manière non spécifique au RCT via la région Vβ, ce qui provoque une activation massive des cellules T.

46
Q

Quels sont les effets de l’activation massive des cellules T par les superantigènes ?

A

Cela entraîne une production excessive de cytokines, pouvant causer une toxicité systémique, comme dans les cas d’intoxications alimentaires provoquées par des toxines bactériennes superantigènes.

47
Q

Qu’est-ce qui distingue les thymocytes immatures (CD4+CD8+, DP) des cellules T matures dans l’expérience avec le superantigène Mls1 ?

A

Les thymocytes immatures (CD4+CD8+) expriment un récepteur T (RCT) contenant une chaîne β spécifique pour le superantigène Mls1. Cependant, après la sélection négative, les cellules T matures (CD4+ ou CD8+) spécifiques pour ce superantigène sont absentes, car elles ont été éliminées lors du développement thymique.

48
Q

Quelle différence existe entre les souches AKR et B10.BR par rapport à la présence du superantigène Mls1 et ses effets ?

A

La souche AKR exprime le superantigène endogène Mls1, tandis que la souche B10.BR ne l’exprime pas. Par conséquent, la souche AKR montre une absence de cellules T matures exprimant les chaînes Vβ6, Vβ7, Vβ8.1 et Vβ9 du RCT, ces cellules ayant été éliminées par sélection négative. En revanche, la souche B10.BR ne subit pas cet effet.

49
Q

Quel est le mécanisme expliquant l’élimination des thymocytes spécifiques pour Mls1 chez la souche AKR ?

A

Les thymocytes exprimant des chaînes β spécifiques pour Mls1 reconnaissent le complexe Mls1-CMHII, ce qui entraîne leur élimination par sélection négative dans le thymus. Ce processus prévient l’auto-immunité en éliminant les cellules T potentiellement autoréactives.

50
Q

Quelle hypothèse explique pourquoi la sélection négative n’élimine pas tous les thymocytes réactifs au CMH ?

A

L’hypothèse de l’affinité (ou avidité) stipule que le niveau d’intensité des signaux transmis par le récepteur des cellules T (RCT) détermine l’issue de l’interaction. Les signaux faibles à modérés favorisent la sélection positive, tandis que les signaux trop forts conduisent à la sélection négative.

51
Q

Quelle différence d’affinité existe entre la sélection positive et la sélection négative ?

A

Il existe une différence d’affinité d’environ 3 fois entre les ligands responsables de la sélection positive et ceux induisant la sélection négative. Cette différence permet de préserver un équilibre entre la tolérance au soi et la capacité à réagir aux antigènes étrangers.

52
Q

Quel est le rôle du transporteur TAP dans l’expression des molécules de classe I du CMH ?

A

Le transporteur TAP est nécessaire pour transporter les peptides du cytoplasme vers le réticulum endoplasmique, où ils s’associent aux molécules de classe I du CMH. Cette association est requise pour stabiliser l’expression des molécules de classe I à la surface des cellules présentatrices d’antigènes. En l’absence de TAP, les molécules de classe I sont rapidement dégradées.

53
Q

Comment la culture d’organe thymique fœtal (FTOC) est-elle utilisée pour étudier la sélection thymique ?

A

La FTOC permet de cultiver des lobes thymiques prélevés d’embryons de souris au jour 16 de la gestation. À ce stade, le thymus ne contient que des thymocytes DN (double négatifs). En ajoutant des peptides spécifiques à la culture, on peut observer les effets de différents niveaux d’affinité/avidité sur le destin des thymocytes (sélection positive ou négative).

54
Q

Comment le niveau de peptide ajouté à la culture influence-t-il la sélection thymique ?

A
  • Quantité faible/modérée de peptide : Provoque une interaction de faible avidité entre le RCT et le complexe peptide-CMH, ce qui favorise la sélection positive (survie des thymocytes CD8SP).
  • Quantité élevée de peptide : Provoque une interaction de forte avidité, conduisant à la sélection négative et à l’élimination des thymocytes.
55
Q

Quels sont les trois modèles principaux expliquant le choix de différenciation des thymocytes DP en cellules T CD4 ou CD8 ?

A

- Modèle instructif : La signalisation spécifique via le RCT et le co-récepteur (CD4 ou CD8) détermine la voie de différenciation en fonction du CMH reconnu (classe I ou classe II).

- Modèle stochastique : Le choix de différenciation est aléatoire, suivi d’une vérification pour confirmer si le co-récepteur exprimé correspond au type de CMH reconnu. Si ce n’est pas le cas, la cellule subit l’apoptose.

- Modèle cinétique de la liaison : L’interruption ou la continuité du signal reçu via le RCT et le co-récepteur détermine si le thymocyte devient une cellule T CD4 ou CD8.

56
Q

Comment fonctionne le modèle instructif dans le choix de différenciation des thymocytes DP ?

A

Dans le modèle instructif, l’interaction du RCT avec le CMH de classe I active le co-récepteur CD8, tandis que l’interaction avec le CMH de classe II active le co-récepteur CD4. Ces interactions génèrent des signaux distincts qui guident la différenciation des thymocytes vers la voie CD8 ou CD4, respectivement.

57
Q

Quelle est la base du modèle stochastique pour la différenciation des thymocytes ?

A

Dans le modèle stochastique, l’expression d’un co-récepteur (CD4 ou CD8) est aléatoire. Ensuite, la cellule vérifie si le co-récepteur exprimé correspond au CMH reconnu (classe I ou II). Si le co-récepteur ne correspond pas, la cellule subit l’apoptose. Ce processus garantit que seules les cellules T correctement restreintes au CMH survivent.

58
Q

Selon le modèle cinétique de la liaison, qu’est-ce qui différencie les cellules T CD4 des cellules T CD8 ?

A

Dans le modèle cinétique de la liaison :

  • Si le signal du RCT avec le CMH est interrompu, la cellule réduit l’expression de CD4 et devient une cellule T CD8.
  • Si le signal est continu, la cellule maintient l’expression de CD4 et devient une cellule T CD4.
59
Q

Quelles sont les trois issues possibles pour les thymocytes en fonction de l’affinité du RCT pour le complexe peptide-CMH ?

A

- Aucune interaction : Le thymocyte subit une “mort par négligence” (absence de signaux de survie).

- Affinité faible : Sélection positive, le thymocyte survit et mature.

- Affinité forte : Sélection négative, le thymocyte est éliminé pour prévenir l’auto-immunité.

60
Q

Comment l’affinité du RCT pour le complexe peptide-CMH influence-t-elle les lymphocytes T matures dans les tissus périphériques ?

A

- Aucune interaction ou affinité trop faible : Les lymphocytes T matures ont une faible survie et une division inefficace.

- Affinité faible à modérée : Les lymphocytes T survivent et se divisent efficacement.

- Affinité forte : Les lymphocytes T prolifèrent rapidement, générant des cellules effectrices et mémoires en réponse à l’activation par un antigène.

61
Q

Pourquoi une interaction de haute affinité entre le RCT et le complexe peptide-CMH entraîne-t-elle des résultats opposés dans le thymus et les tissus périphériques ?

A

Dans le thymus, une interaction de haute affinité active la sélection négative pour éliminer les thymocytes autoréactifs, prévenant ainsi l’auto-immunité.

Dans les tissus périphériques, une interaction de haute affinité active les lymphocytes T pour répondre rapidement aux antigènes étrangers, favorisant une réponse immunitaire efficace.

62
Q

Un thymocyte exprimant un RCT spécifique pour un peptide du virus de la grippe présenté par une molécule de classe II du CMH I-Aᴮ sera-t-il sélectionné positivement dans une souris H-2ᴮ ?

A

Oui, par les cellules épithéliales corticales.
Les cellules épithéliales corticales expriment les molécules de classe II du CMH nécessaires pour la reconnaissance du peptide par le RCT, permettant ainsi la sélection positive.

63
Q

Si ce thymocyte parvient à maturité et migre dans les organes lymphoïdes périphériques, quel co-récepteur exprimera-t-il ?

A

CD4.
Étant donné que le thymocyte reconnaît un peptide présenté par une molécule de classe II du CMH, il devient une cellule T CD4⁺ mature.

64
Q

Que se passe-t-il si vous effectuez une culture de lobe thymique fœtal de cette souris et ajoutez une très forte concentration du peptide viral ?

A

Il y aura sélection négative du thymocyte.

Une concentration élevée de peptide entraîne une interaction de haute affinité entre le RCT et le complexe peptide-CMH, ce qui provoque l’élimination du thymocyte par sélection négative, conformément au modèle de l’avidité.

65
Q

Quelle conséquence aurait l’inactivation du gène Rag-1 sur le développement des thymocytes ?

A

Arrêt de la différenciation thymique au stade DN3 suite à un échec de la beta-sélection.

Le gène Rag-1 est nécessaire pour le réarrangement des chaînes du RCT. Sans ce réarrangement, le RCT fonctionnel ne peut être exprimé, bloquant ainsi la différenciation des thymocytes au stade DN3.

66
Q

Dans une souris transgénique exprimant le RCT d’un thymocyte spécifique pour un peptide viral, quelles sous-populations de thymocytes retrouvera-t-on si cette souris est de la souche H-2ᴰ ?

A

DN (CD4⁻CD8⁻), DP (CD4⁺CD8⁺).

Dans une souche H-2ᴰ, les molécules CMH ne sont pas compatibles avec le RCT transgénique spécifique au peptide viral présenté par I-Aᴮ. Cela empêche la sélection positive, bloquant ainsi la différenciation des thymocytes en cellules SP (CD4⁺ ou CD8⁺).

67
Q

Quels sont les deux types principaux de cellules T régulatrices (Treg) et leur rôle dans la tolérance au soi ?

A

T reg. naturelles :
- Se développent dans le thymus.
- Constituent une voie alternative pour les lymphocytes T autoréactifs.

T reg. induites :
- Se développent à partir de cellules T CD4 conventionnelles dans les tissus périphériques lors de la réponse immune.

Les deux types expriment CD25 et le facteur de transcription Foxp3, et leur rôle est de maintenir la tolérance au soi.

68
Q

Quels sont les quatre principaux mécanismes par lesquels les cellules T régulatrices (Treg) exercent leur fonction ?

A

Privation en cytokines : Les Treg expriment IL-2R et consomment l’IL-2, réduisant sa disponibilité pour d’autres cellules T.

Sécrétion de cytokines inhibitrices : Libération de TGF-β et d’autres cytokines qui suppriment l’activation des cellules T.

Inhibition des cellules présentatrices d’antigènes (APC) : Blocage de leur fonction de présentation d’antigènes aux cellules T.

Cytotoxicité : Destruction des cellules T par des mécanismes cytotoxiques.

69
Q

Quels marqueurs sont exprimés par les cellules T régulatrices (Treg) et quel est leur rôle ?

A

Les Treg expriment CD25 et le facteur de transcription FoxP3, qui sont essentiels pour leur différenciation et leur fonction dans la tolérance immunitaire.

70
Q

Quels sont les impacts cliniques potentiels des cellules T régulatrices (Treg) ?

A

Déplétion des Treg :
- Pour améliorer l’efficacité des vaccins.
- Pour renforcer la réponse anti-tumorale.

Injection/Activation des Treg :
- Pour traiter les maladies auto-immunes en augmentant la tolérance au soi.

71
Q

Pourquoi les cellules T régulatrices (Treg) nécessitent-elles un contact cellulaire avec leur cible pour exercer leur fonction ?

A

La suppression par les Treg est antigène-spécifique et nécessite une activation via le RCT, ce qui implique un contact direct avec la cellule cible.