מבחנים אימונואנזימתיים

Question 1

למה אגלוטינציה ופרסיפיטציה סובלות מרגישות נמוכה?

Answer 1

סיבה: מעקב באופן ויזואלי אחר היווצרות הקומפלקס

Question 2

מהם שיטות אימונואנזימתיות הטרוגניות?

Answer 2

שיטה הטרוגנית מחייבת הפרדה של הקומפלקס המסומן מהמרכיב החופשי המסומן. נוכחות המרכיב החופשי המסומן מהווה גורם מפריע ויש צורך להפטר ממנו.

Question 3

מהן שיטות אימונואנזימתיות הומוגניות?

Answer 3

שיטות שאינן מחייבות הפרדה בין הקומפלקס המסומן למרכיבים החופשיים.

Question 4

איך שיטות הומוגניות מתאפשרות?

Answer 4

זה מתאפשר בעזרת המודולציה שנגרמת רק בהיווצרות הקומפלקס במרכיב המסמן ומונעת מהסיגנל להופיע בראגנט החופשי. כלומר יש מעבר מחומר פלואורסנטי לא פעיל (במקרה של הראגנט החופשי) לפעיל (בהיווצרות קומפלקס)

Question 5

באיזה קשר נקשרים האנזימים למרכיב הראקציה?

Answer 5

בקשר קוולנטי ויציב.

Question 6

מהם האנזימים השימושיים ביותר במבחנים אימונואנזימתיים?

Answer 6

AP, HRP, Urease

Question 7

איך פועל AP (alkaline phosphatase)?

Answer 7

אנזים שמפרק קבוצות פוספט ופעיל בתנאים בסיסיים. ניתן לקשור עד 2 מולקולות פוספט לנוגדן/אנטיגן.

Question 8

איך פועל Hoderadish peroxidase (HRP)

Answer 8

מחמצן, יש צורך בחמצן/פרוקסידים. ניתן לקשור עד 4 מולקולות של אנזים לנוגדן/אנטיגן ולכן מגביר את רגישות השיטה

Question 9

מהם המרכיבים העיקריים בכל מבחן אנזימתי?

Answer 9

נוגדן מתאים: ספציפי נגד האנליט.
מצע מוצק: עליו סופחים ומבצעים את הראקציה.
אמפליפיקציה אנזימתית: שימוש באנזים כסמן, הסגנל מתקבל כתוצאה מראקציה אנזימתית. סיגנל יהיה פרופורציונלי (ישיר או הפיך) לריכוז האנליט.

Question 10

מהם התכונות הרצויות של אנזימים?

Answer 10

ספציפי לסובסטרט
יציבות: יציב בתנאי ראקציה שונים.
ניקיון: רמת ניקיון גבוהה.
גבוה  Turnover rate: כלומר קינטיקה אנזימתית גבוהה.
שלא יהיה מושפע מראגנטים שונים בדגימה.

Question 11

מהו סובסטרט כרומוגני?

Answer 11

סובסטרט ללא צבע ותוצר הפירוק האנזימתי שלו הוא צבעוני.

Question 12

מהו סובסטרט לוקסוגני?

Answer 12

סובסטרט שתוצר הפירוק שלו נותן סיגנל של אור. למשל גחליליות פולטות אור שהוא נובע מראקציה אנזימתית.

Question 13

מהו סובסטרט כימופלורסנטי?

Answer 13

תוצר הקטליזה האנזימתית נותן חומר פלואורסנטי. חומר פלואורסנטי זה חומר בעל מבנה טבעתי שעל ידי אירור שלו באורך גל מתאים הוא פולט אור פלואורסנטי.

Question 14

מה סוג הדטקציה שנשתמש כאשר מדובר בסובסטרט כרומוגני?

Answer 14

ספקטופוטומטר

Question 15

מה סוג הדטקציה שנשתמש עבור סובסטרט לוקסוגני?

Answer 15

לומינטור : מכשיר שמאפשר מעקב/מדידה של סינגל של אור נראה

Question 16

מה סוג הדטקציה שנשתמש על סובסטרט כימופלורסנטי?

Answer 16

פלורומור

Question 17

מהן שלושת הקטגוריות שניתן לחלק את השיטות האימונו-אנזימתיות ההטרטרוגניות?

Answer 17

Sandwich Elisa
Indirect Elise
Competitive Elise

Question 18

מהן השיטות הלא תחרותיות של אלייזה?

Answer 18

Direct Elisa
Indirect Elisa
Sandwich Elisa

Question 19

רגישות נמוכה תביא לאחד מהם:

1. Fasle positive
2. False negative

Answer 19

2

Question 20

ספציפיות נמוכה תביא ל:

1. False positive
2. False negative

Answer 20

1

Question 21

מה זה קוניוגט

Answer 21

מרכיב מסומן שקשור לאנזים

Question 22

מיהו הקוניוגט באלייזה ישירה ובלא ישירה?

Answer 22

בישירה: נוגדן ראשוני

בלא ישירה: נוגדן שניוני

Question 23

מהם השלבים העיקריים במבחני אלייזה הטרוגניים?

Answer 23

1. ציפוי/הצמדה
2. חסימה
3. דגימה
4. דטקציה
5. סובסטרט
6. מדידה

Question 24

מה זה סנסיטיזציה?

Answer 24

החלק הראשוני של האינטראקציה בין הנוגדן לאנטיגן שנמצא על החלקיק. זה החלק הראשון של אגלוטינציה

Question 25

מה זה אגלוטנינים?

Answer 25

נוגדנים שגורמים לאגלוטינציה

Question 26

מה ההגדרה הביולוגית של incomplete antibodies?

Answer 26

נוגדן שאין ביכולתו לבצע אגלוטינציה בתנאים אופטימליים של הראקציה.

Question 27

איך אנזים סיאלדיאז עוזר להתגבר על פוטנציאל זטא בכדוריות דם אדומות?

Answer 27

הוא מאכל חומצה סיאלית ובכך מפחיד את את המטען השלילי על כדורית הדם וכך מאפשר תנאים אופטימליים לאגלוטינציה של כדוריות דם

Question 28

מה יכול לגרום לספציפיות נמוכה?

Answer 28

ראקציה צולבת

Question 29

תני דוגמאות לראגנטים שמתאימים לחסימה

Answer 29

BSA, OVA, אבקת חלב, ג’לטין, סרומים

Question 30

מה זה כימו-לומינסציה?

Answer 30

ייצור ושחרור של אור נראה כתוצאה מראקציה כימית

Question 31

מה זה הדירות של שיטה?

Answer 31

הדירות של שיטה מתארת את הקירבה בין המדידות השונות של אותה דוגמה (בין דופליקטים וכו’)

Question 32

מתי שיטה מוגדרת שיטה ספציפית?

Answer 32

שיטה שיש לה את היכולת לספק תוצאות מדויקות והדירות מקובלת, בהיעדר תוצאות חיוביות שגויות

Question 33

מתי שיטה מוגדרת כשיטה רגישה?

Answer 33

שיטה רגישה שיטה שיש לה את היכולת לספק תוצאות מדוייקות והדירות מקובלת בהיעדר תוצאות שליליות שגויות

Question 34

מה יכול להפריע לכל מיני בדיקות אימונו-כימיות?

Answer 34

נוכחות של נוגדנים הטרופיליים בדם של האנשים

Question 35

3 שיטות לזיהוי תוצאות חיוביות שגויות:

Answer 35

1. Non-linear dilution method
2. Alternative assay methods
3. Blocker method