Urgente !!!!

Question 1

Quais enzimas necessárias para a técnica de engenharia genética?

Answer 1

endonulceases de restrição, DNA ligase, DNA polimerase, topoisomerase

Question 2

Qual a função de cada enzima?

Answer 2

Endonuclease de restrição (cliva o DNA em fragmentos específicos )

DNA ligase (liga os fragmentos de Okasaki)

DNA plimerase (sintetiza uma nova fita através da fita molde)

Topoisomerase (desenrola a fita de DNA para a replicação)

Question 3

O que é um vetor ?

Answer 3

é uma molécula de DNA capaz de transportar a sequencia gênica a ser clonada para o interior da célula

Question 4

Quais os critérios que o vetor deve possuir ?

Answer 4

O vetor deve crescer de forma fácil em meios de culturas baratos, não ser patogênico, ser competente e ser geneticamente estável em cultura

Question 5

Quais são os tipos de vetores e quais são suas diferenças ?

Answer 5

Vetores bifuncionais (capazes de se duplicar e serem selecionados em dois hospedeiros diferentes)

Vetores de expressão (utilizados para expressar peptídeos ou proteínas codificados pelo segmento de DNA)

Question 6

Como ocorre a purificação da proteína ?

Answer 6

é necessário inserir uma sequencia peptídica na região aminoterminal ou carboxiterminal que altera a sequencia do gene e é utilizado cromatografia de afinidade e removida por uma protease específica

Question 7

Quais as características de um bom hospedeiro?

Answer 7

aceitar o DNA exógeno sem modifica-lo, fácil seleção do hospedeiro que contem o DNA exógeno, para hospedeiros de expressão ser deficientes em proteases e baixo risco de proliferação no ambiente

Question 8

Como ocorre a expressão em procarioto ?

Answer 8

não possui processamento transcricional sendo necessário a clonagem de DNAc e também não realiza eventos pós- traducionais restrigindo a produção de proteínas

Question 9

Como ocorre a expressão em eucarioto?

Answer 9

resolve o problema de processamento dos procariotos, mas necessita de técnicas mais sofisticadas

Question 10

Quais são os produtos produzidos pelos procariotos e eucariotos?

Answer 10

insulina, IGF, somatotrofina, antígenos virais, anticorpos monoclonais, proteínas diversas e biofármacos

Question 11

Como a biotecnologia está envolvida na área da saúde ?

Answer 11

por meio de desenvolvimento de novos medicamentos, diagnóstico de doenças e aperfeiçoamento de técnicas de tratamento

Question 12

Em que se baseia a terapia gênica ?

Answer 12

introdução de genes nas células e tecidos dos indivíduos que possuem uma doença causada pela deficiência desses genes (utilizam vetores virais)

Question 13

Em que se baseia a vacina recombinante ?

Answer 13

deleta- se genes do patógeno que codifica para fatores de virulência, mas mantendo os produtos que induzem a resposta imune

Question 14

O que são biofármacos ?

Answer 14

são produzidos por microrganismos como fator de coagulação VIII, interferon beta

Question 15

Em que região do plasmídeo deve-se inserir um gene de interesse para sua expressão?

Answer 15

No sítio múltiplo de clonagem.

Question 16

O que consiste o corte sticky ends ?

Answer 16

deixa pontas complementares coesivas e se ligam ao vetor por complementariedade de base

Question 17

O que consiste o corte blunt ends ?

Answer 17

não deixa pontas complementares e é necessário utilizar DNA ligase para inserir ao vetor

Question 18

Mutagênese sítio-dirigida ?

Answer 18

utiliza técnica de DNA sintético e de clonagem para modificar poucas bases e manipular características de proteínas

Question 19

Qual a diferença do fago lambda para vetores cosmídeos ?

Answer 19

O fago lambda possui 1/3 do seu genoma não essencial que pode ser substituída por um DNA exógeno

Os vetores cosmídeos apresenta extremidades coesivas quando clivado

Question 20

Quais são os tipos de cromossomos artificiais ?

Answer 20

BAC-> baseado no plasmídeo F
YAC-> origem de replicação de DNA, telômeros para a replicação do DNA nas regiões terminais do cromossomo e um centrômero para a regeneração durante a mitose

Question 21

Como você poderia detectar uma colônia contendo um gene clonado, caso já conhecesse a sequência do gene?

Answer 21

Para isolar as células hospedeiras contendo um vetor plasmidial pela seleção de um marcador presente no vetor e em vetores virais pela placas de lise

Question 22

Gene repórter

Answer 22

consiste na modificação de uma proteína de fácil análise e detecção que podem ser utilizados para sinalizar a presença ou ausência de um elemento genético em particular ou a inserção de DNA em um vetor

Question 23

Plasmídeo Ti

Answer 23

usado para modificar o DNA de planta

Question 24

Vetores de expressão

Answer 24

permite aos cientistas que controlem a expressão gênica da célula em questão

Question 25

Vetores bifuncionais.

Answer 25

permite o transporte de DNA exógeno para dois organismos que não estão relacionados

Question 26

Para que servem cromossomos artificiais ?

Answer 26

são usados para organismos que possuem genomas maiores e que necessitam de muitos números de clones para obter a sequência completa

Question 27

Vacinas de subunidades

Answer 27

são contituídas de uma ou mais proteínas específicas do patógeno e são purificadas

Question 28

Características de um plasmídeo

Answer 28

Origem de replicação, genes de resistência à antibióticos e ser autorreplicantes

Question 29

O que é RFLP

Answer 29

é um segmento de DNA produzido quando uma endonuclease de restrição hidrolisa o DNA

Question 30

O que é sonda de DNA

Answer 30

é um fragmento curto de DNA de fita simples

Question 31

Descreva um experimento com rDNA em duas ou três frases. Utilize os seguintes termos: íntron, éxon, DNA, mRNA, cDNA, RNA- -polimerase e transcriptase reversa.

Answer 31

Em matérial genético de eucarioto é necessário retirar os introns e deixar somente os éxons para que a RNA polimerase se ligue a sequencia de DNA para produzir o RNAm a qual é necessário realizar a transcriptase reversa para produzir o DNAc para ser inserido no vetor bacteriano

Question 32

Qual a importância da manipulação do DNA in vitro

Answer 32

pode ser utilizado para estudar regulação gênica, aumentar a expressão de um produto gênico de interesse ou para analisar a resposta de uma região reguladora a diversas condições