unidad 4-C Flashcards

1
Q

¿Qué tipo de muestra se hace para la disrupción mecánica en licuadora?

A

Cuando tenemos una gran cantidad de tejido

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Q

¿Qué tipo de muestras usamos en la disrupción mecánica de tipo Dounce?

A

Células tisulares: útil para protocolos de enrequecimiento de proteínas nucleares o mitocondriales

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Q

¿Qué tipo de muestras usamos en la disrupción por homogenizador de ultrasonido?

A

Células, tejidos, bacterias

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4
Q

¿Qué tipo de muestras usamos en la disrupción mecánica por pulverización de nitrógeno líquido?

A

Células vegetales, células animales

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Q

¿Qué tipo de muestras usamos en la disrupción mecánica por perlas de vidrio

A

Levaduras

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6
Q

Propósito de la sustancia EDTA para lisis celular

A

Reducción del daño por oxidación, quelato de iones metálicos

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7
Q

Propósito de la sacarosa o glucosa para la lisis celular

A

Reducción del daño por oxidación, quelato de iones metálicos

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8
Q

Propósito del detergente para la lisis celular

A

Reducir la pérdida debida a la asociación con los componentes celulares o la autoagregación. extracción y purificación de proteínas integrales de membrana. solubilización de proteínas poco solubles

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9
Q

Propósito del glicerol para la lisis celular

A

para estabilización, se puede elevar la muestra hasta en un 50%

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10
Q

Propósito de la sacarosa para la lisis celular

A

Para estabilización

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11
Q

Propósito de las nucleasas para la lisis celualr

A

degradación de los ácidos nucleicos, reduce la viscocidad de una solocuión simple

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12
Q

Concentración de la sustancia EDTA para la lisis celular

A

10 mM

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13
Q

Concentración de la sacarosa o la glucosa para la lisis celular

A

25 mM

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14
Q

Concentración de los detergentes para la lisis celular

A

0.01-1%

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15
Q

Concentración del glicerol para la lisis celular

A

5-10%

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16
Q

Concentración de la sacarosa para la lisis celular

A

10%

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17
Q

Concentración del tapón de lisis de aproptina

A

1-2 ug/ml

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18
Q

Concentración del tapon EDTA para la lisis celular

A

1-10 mM

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19
Q

Concentración del tapon EGTA para la lisis celular

A

1-10 mM

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20
Q

Concentración del tapon de Luepeptina para la lisis celular

A

1-2 ug/ml

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21
Q

Concentración del tapon de Pepstatina A

A

1 ug/ml

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22
Q

PMSF

A

(17-170 ug/ml)

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23
Q

Elementos que contiene un Buffer de lisis

A

inhibidores de proteasas
detergente
agentes estabilizadores

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24
Q

Procedimiento o paso con mayor afinidad enzimática en la purificación de proteínas

A

Afinidad por cromatografía

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25
Define que es la retención en el proceso de cromatografía
efecto producido sobre los componentes de una mezcla por una fase estacionaria, que puede ser un sólido o un líquido ancado a un soporte sólido
26
Define que es el desplazamiento en la cromatografía
Es el efecto ejercido sobre un mezcla por una fase móvil (eluyente), puede ser un líquido o un gas
27
Define que es el proceso de elución en una cromatografía
migración de los componentes sólidos por acción de la fase móvil
28
Fase estacionaria de una cromatografía en papel
Papel filtro
29
fase estacionaria de una cromatografía en columna
columna de aluminia o sílica gel
30
fase estacionaria de cormatografía en capa fina
placa adsorbente
31
¿Para qué podemos utilizar una cromatografía en papel?
para aminoácidos individuales o dipeptídos
32
Cromatografía empleada por Sanger para la secuenciación de proteínas
De papel
33
La muestra se aplica en la parte superior de la columna y se eluye con una mezcla de disolventes de diferentes polaridades
Cromatpgrafía por columna
34
Ejemplo de cromatografía en columna
Ensayo Bradford o ensayo específico
35
cromatografía que consiste en el cam bio gradual del pH y la concentración de sales de la fase móvil para crear un gradiente
Intercambio iónico de dipéptidos
36
Tipo de moléculas que avanzan más rápidamente en el intercambio iónico de dipeptídos
aquellas con carga opuesta a la matriz
37
Tipo de cromatografía que se basa en la separación de los componentes según la estructura molecular y el tamaño
Cromatografía por exclusión molecular
38
¿A qué sigue el orden de elución en la cromatografía por filtración en gel?
Al peso molecular
39
Cromatografía de mayor especificidad y selectividad para la purificación de proteínas
Cromatografía por afinidad
40
factores de debilitan la afinidad de las moléculas por la fase estacionaria en la cromatografía por afinidad
pH Fuerza iónica Polaridad Solución
41
¿Con qué se elimina una etiqueta terminal?
Con una proteasa
42
Ejemplo de una cromatografía líquida de alto rendimiento de tipo preparativa
Espectrometría de masas
43
cromatografía que hace uso de bombas de alta presión para mover las moléculas alrededor de la columna
Cromatografía líquida de alto rendimiento
44
componentes que analiza la cromatografía líquida de alto rendimiento
componentes no volátiles azúcares vitaminas drogas metabolitos
45
Ejemplo de etiqueta terminal
Glutation
46
Determinar la composición de una mezcla
Analítica
47
Se pueden recuperar los componentes posteriormente a su análisis para estudios posteriores
Preparativa
48
Herramienta molecular que separa macromoléculas en base a su movilidad dentro de un soporte o matriz sólida en un campo eléctrico
Electroforesis
49
Herramienta molecular que separa macromoléculas en base a su movilidad dentro de un soporte o matriz sólida en un campo eléctrico
Electroforesis
50
Tipos de muestras que pueden ser analizados mediante electroforesis
ácidos nucleicos y proteínas
51
¿La movilidad de una molécula en electroforesis de qué factores dependen?
peso molecular y carga eléctrica
52
Factores intrínsecos de la molécula
peso molecular carga eléctrica
53
Factores extrínsecos de la molécula
concentración en gel voltaje aplicado tiempo de corrida temperatura
54
Si la relación carga eléctrica-PM es constante la movilidad de qué dependerá
del PM
55
en una relación constante la movilidad se incrementa si se incrementa el peso
FALSO
56
en una relación constante la movilidad se incrementa si se incrementa el peso
FALSO
57
Es la secuencia de una cadena de aminoácidos
Estructura primaria de las proteínas
58
Ocurre cuando los aminoácidos en la secuencia interactúan a través de puentes de hidrógeno
Estructura secundaria
59
Ocurre cuando ciertas atracciones están presentes entre hélices alfa y las hojas plegadas
Estructura terciaria
60
Es una proteína que consta de más de una cadena de aminoácidos
Estructura cuaternaria
61
Componente del gel de poliacrilamida que funciona para la formación de peptídos
Acrilamida
62
componente del gel de poliacrilamida que funciona para el cross-linking entre cadenas de polímeros
Bisacrilamida
63
Proteínas que presentan mayor movilidad
Proteínas globulares
64
Solución que se debe emplear cuando en la electroforesis el fraccionamiento no obedezca a la diferencia de PM
Emplear SDS en la preparacipon de gel de poliacrilamida
65
Solución cuando el corrimiento electroforético observado represente más de una cadena polipeptídica
Emplear un desnaturalizante reductor
66
Factor que afecta a la interpretación de la electroforesis porque cabe la posibilidad de que dos cadenas polipeptídicas independientes corran como si fueran una cadena de mayor pesos molecular
Puentes disulfuro en las proteínas
67
menciona dos agentes desnaturalizantes reductores
Ditiotreitol o beta-mercaptoetanol
68
Método de tinción que puede detectar hasta 50 ng
Azul de cromaisse
69
Método de tinción que incrementa la sensibilidad de detección 50x
Tinción de plata
70
Conjunto de proteínas de un organismo
Proteoma