Unidad 1. Técnicas Flashcards
Cuales son los 2 tipos de microscopios que más se usan?
Optico y virtual
Cuales son las tecnicas auxiliares? (8)
- Metodos de tincion
- Histoquimica y citoquimica
- Inmunocitoquimica
- Autoradiografia
- Cultivo de tejidos y organos
- Separacion de celulas y organulos por centrifugacion diferencial
- Preparacion tisular especializada (de expansión)
- Sistemas opticos especializadps (microscopio de polarizacion, de barrido o fluoresencia)
Cuales son los 3 pasos para la tincion con H&E?
- Fijación
- Preparar la muestra para su inclusion con parafina
- Tinción
Para que sirve la fijacion de la tincion?
- Para detener el metabolismo celular e impedir la degradacion enzimatica de las celulas y los tejidos por autolisis
- Destruir patogenos (para evitar que se degrade más rapido)
- Endurecer el tejido
Porque se endurece el tejido?
Como resultado de la formacion de enlaces cruzados o de la desnaturalizacion de moleculas de proteinas
Cual es el fijador más habitual?
Formalina (formaldehido)
Como el formaldehido conserva la estructura general de la celula?
Al reaccionar con los grupos amino de las proteinas, las proteinas mantienen su capacidad para reaccionar con anticuerpos
El formaldehido es un mal fijador de____________ porque __________
Membranas celulares
No reacciona con lipidos
Con que se deshidrata la muestra?
Con alcohol
Con que se aclara la muestra?
Xileno o tolueno
Para que se sirve la parafina?
Para cortar la muestra
En general las muestras estan fijadas con ___________, incluidas en ___________ y teñidas con ______________
Formalina
Parafina
Hematoxilina y eosina
De que color son los nucleos en las tinciones?
Azules
De que color es el citoplasma en las tinciones?
Rosa
Que se usa para fijar membranas celulares?
Metales pesados como permanganato y osmio, que se unen a los fosfolipidos
El _________________ como fijador en la microscopia electronica es excelente en la conservacion de las membranas
Tetroxido de osmio
H&E permite ver _______, _________ y _______
ADN nuclear, ARN y citoplasma
Que NO permite ver de forma adecuada el H&E?
Elastina
Fibras reticulares
Membranas basales
Lipidos
Cuales son los componentes que permancen despues de la fijacion?
Moleculas grandes (nucleoproteinas, proteinas intracelulares del citoesqueleto, proteínas extracelulares y complejos de fosfolipidos y proteinas en las membranas)
Cuales son algunos componentes que se pierden durante la fijacion de rutina en fijadores acuosos?
- Glucogeno
- Proteoglucano y glucosaminoglucanos
- Metabolitos intermedios, glucosa, sodio y cloro
La hematoxilina es una ________ y reacciona en _________
Base (+)
Aniones
La eosina es __________ y reacciona con _________
Acida (-)
Cationes
Ej de aniones con los que reacciona la hematoxilina
Grupos fosfato
Ej de cationes con los que reacciona el colorante acido
Grupos amino
Ejemplo de colorantes acidos usados en combinacion para teñir selectivamente distintos componentes tisulares, el cual tiñe el colageno, citoplasma y eritocitos
Tecnica de tincion de Mallory
( anilina azul + fucsina acida + naranja G )
Cuales son los colorante basicos
- Verde de metilo
- Azul de metileno
- Pironina G (rojo)
- Azul de toluidina
Cuales son los colorantes acidos
- Fucsina acida
- Anilina
- Eosina
- Naranja G
Que es metacromasia?
Cambio de color
Cuales son las estructuras celulares y tisulares que presentan metacromasia?
Cartilago
Granulos de heparina de los mastocitos
RER de los plasmocitos
En la metacromasia, el azul de toluidina se observara de color ________
Purpura a rojo
PAS se combina con ___________ para teñir el ADN
Feulgen
La tincion PAS de la membrana basal y las fibras reticulares se basa en el contenido de ___________
Proteoglucanos
Porque el ARN no se tiñe con PAS?
Porque carece de desoxiribosa
Para que se usa la microespectrofotometria de Feulgen?
- Para estudiar cambios en el ADN en celulas en division que expermentan diferenciacion
- Analizar cantidades anomalas de cromosomas en celulas malignas
Cual tincion es una de las herramientas más valiosas para evaluar el potencial metastasico (cancer)?
Feulgen
