Travaux pratiques Flashcards
Quels-sont les éléments que nécessite une bactérie pour sa croissance ?
Chop’ns
Caborne Hydrogène Oxygène Phosphore Oligo-éléments Azote Soufre
pH
Température
Eau
Quels-sont les deux types de composition d’un milieu nutritif
- synthétique: Moins riche, mais on connaît sa composition chimique
- Empirique : plus riche, mais on ne sait pas sa composition
Quels-sont les types d’usage des milieux ?
Sélectifs: Inhibe la croissance de certains m.
Différentiel: Permet de différencer des m. avec la présence ou l’absence d’un caractère
Sélectif-différenciel
Quels-sont les deux types d’état d’un milieu ?
Liquide : ne permet pas de voir des colonies on doit utiliser le photo spectromètre pour voir la qt.
Solide: Permet de voir des colonies isolées
Au niveau des besoins nutritifs d’une bactéries, que veux dire un besoin en glucose et sels minéraux (Glu-Sels)
- Source de C (glucose)
- Phosphore
- Soufre
- Oligo-éléments
Au niveau des besoins nutritifs d’une bactéries, que veux dire un besoin en Sulfate d’ammonium (NH4)2 SO4
- Source d’azote
- Source de Soufre
Provenance inorganique
Possède toutes les enzymes nécessaires pour synthétiser ses composés azotés. (acides aminés, bases azotées, vitamines.. etc)
Au niveau des besoins nutritifs d’une bactéries, que veux dire un besoin en Hydrolysat de caséine (HC) ?
L’hydrolyse partielle des protéines produit une chaîne d’Acides aminés de longueur variable (peptone)
- Source d’Azote plus facilement métabolisée
Au niveau des besoins nutritifs d’une bactéries, que veux dire un besoin en extrait de levures (EL) ?
- Facteurs de croissance divers allant de base azotée aux vitamines
Une gélose MacConkey (McC) est une gélose de quel type ?
Sélectif-différentiel
Parles-moi de la gélose Mac-Conkey ? (McC)
- Violet de cristal
- Sels biliaires
Ces 2 éléments inhibent la croissance des bactéries Gram (+)
Laissent proliférer un nombre de bactéries Gram (-)
Ajout de lactose
Ajout de rouge neutre (indicateur de pH)
Permet de différentier les bactéries qui transforment le lactose en acide (lactose +)
Le rouge neutre va devenir mauve foncé
Parles-moi de la gélose Mannitol sel (MSA)
NaCl
Permet la croissance de Gram (+) dont staphylococcus (+)
Ajout de Mannitol
Rouge de phénol (Indicateur de pH)
Permet de différencier les bactéries qui dégradent le Mannitol en acide
Rouge de phénol devient jaune
Quel type de bouillon nutritif en gélose va montrer les Gram (-) avec lactase +
MacConkey
Quel type de bouillon nutritif en gélose va montrer les Gram (+)
Mannitol Sel
Pk des fois on décide de ne pas colorer les bactéries avant de les observer au microscope ? ( à l’état frais dans le fond )
Parce certains colorants peuvent tuer les cell. bactériennes
Donc des fois c’est mieux à l’état frais
Que veut-on dire lorsque la bactérie est motile ?
Se déplacent à l’aide d’un flagelle
Que veut-on dire lorsque la bactérie est mobile ?
Se déplacent à cause d’un mouvement involontaire:
- Mouvement brownien
- Mouvement hydraulique
Nommes-moi une bactérie Cocci gram +
Staphylococcus aureus
Nommes-moi une bactéries Gram (-)
Escherichia coli (entéro-bactérie)
Décris-moi les étapes (résumé) de la coloration de Gram ? et l’année de la découverte ?
1884
Coloration au Cristal Violet (1 min Laver, égoutter)
Fixation avec du Lugol (iodure de Potassium) (1 min égoutter)
Décoloration avec de l’Éthanol (15 s, Laver égoutter)
Coloration à la Safranine (1 min, Laver égoutter)
La paroi de la bactérie Gram (+) est comment ?
La couche de peptidoglycane est plus abondante
Que fait l’alcool à la membrane de la bactérie Gram (-)
La faible quantité de peptidoglycane laisse passer plus facilement l’alcool (bicouche de phospholipide) absorbe donc l’alcool et décolore le cytoplasme
Au final, que devons-nous regarder sur le frottis au niveau de la coloration de Gram ?
- Réaction : (violet ou rouge)
- Arrangement (Strepto, Staph, Paires, isolés)
- Morphologie (coques, bacilles, spirilles)
Décris-moi une bactérie aérobie ?
Besoin d’une qt d’oxygène pour croître
Quels-sont les moyens pour faciliter la pénétration de l’oxygène ?
Agitation
Barbotage
Parles-moi des bactéries anaérobie facultative ?
Peuvent croître en absence d’oxygène
Mais plus grande croissance avec de l’oxygène, car peuvent l’utiliser dans leur processus métabolique
Parles-moi des bactéries anaérobie aérotolérante
- Peuvent croîte en milieux avec ou sans oxygène, mais ne l’utilisent pas dans leur métabolisme
Parles-moi des bactéries microaérophiles
Croissance avec une quantité minimale d’oxygène donc entre 2% et 10%
Parles-moi des bactéries anaérobie strictes
Oxygène est toxique
Peuvent croître en absence d’oxygène
Mais plus grande croissance avec de l’oxygène, car peuvent l’utiliser dans leur processus métabolique
anaérobie facultative
- Peuvent croîte en milieux avec ou sans oxygène, mais ne l’utilisent pas dans leur métabolisme
anaérobie aérotolérante
Croissance avec une quantité minimale d’oxygène donc entre 2% et 10%
microaérophiles
Oxygène est toxique
Parles-moi des bactéries anaérobie strictes
Échelle analogue au pH pour savoir la concentration pure d’oxygène dans un milieu ? intervalle ?
rH
entre 0 et 40
À partir de quel chiffre sur l’échelle de rH les bactéries anaérobies peuvent pousser?
un rH de 14 ou moins
Si il n’y a plus d’oxygène, l’indicateur de rH devient quelle couleur ?
Blanc
Le Co2 est-il essentiel à l’anaérobiose ?
non
Comment nomme-t-on les bactéries qui sont favorisées par l’ajout de Co2 ?
Capnophiles
Quels-sont les méthodes pour la culture de bactéries anaérobies strictes ?
- Le tube de Hall (bille)
- Le tube de Veilon (agar)
- La jarre anaérobie (sachet de génératuer de gaz H) (indicateur de rH)
- Source de C (glucose)
- Phosphore
- Soufre
- Oligo-éléments
un besoin en glucose et sels minéraux (Glu-Sels)
- Source d’azote
- Source de Soufre
Provenance inorganique
Possède toutes les enzymes nécessaires pour synthétiser ses composés azotés. (acides aminés, bases azotées, vitamines.. etc)
un besoin en Sulfate d’ammonium (NH4)2 SO4
L’hydrolyse partielle des protéines produit une chaîne d’Acides aminés de longueur variable (peptone)
- Source d’Azote plus facilement métabolisée
un besoin en Hydrolysat de caséine (HC) ?
- Facteurs de croissance divers allant de base azotée aux vitamines
un besoin en extrait de levures (EL) ?
Lorsqu’il y a des m. dans l’environnement nous devons être capable d’évaluer le ___ et les ___ pour contrôler leurs présences
le danger et les mesures
Les techniques opérant au niveau moléculaire permettent de déterminer le génotype ou le phénotype d’une souche particulière ?
Génotype
pour déterminer le phénotype d,une espèce bactérienne on utiliser des milieux de type
différentiels (met en évidence un phénotype d’une bactérie)
la plupart du temps ce sont des enzymes qui sertont responsables de cette différenciation
Si une bactérie peut transformer l’urée qu’est-ce qu’in va pouvoir observer dans le milieu différentiel et pourquoi ?
- Indicateur de pH (ammoniac est alcalin (basique))
Transforme l’urée en ammoniac grâce à l’uréase
Quelles-sont les milieux différentiels qui permet de différencier des entérobactéries entres-elles ?
- Bouillon lactosé
- Eau peptonée
- Gélose citrate
- Gélose peptone fer (PIA, Peptone Iron Agar)
- Gélose PAD (phénylalanine désaminase)
- Glose urée
À quoi sert le bouillon lactosé ?
Permet de différentier les Entérobactéries
- Lactose
- Indicateur de pH
- Pour voir la production d’acide produit par la dégradation du lactose
- Tube de Durham qui permet de capter si il y a des gaz produits
Si des gaz sont produit dans le bouillon lactosé, quel objet pourra capter ce gaz ?
Le tube de Durham
À quoi sert l’eau peptonée ?
Permet de différentier les Entérobactéries
- Contient des peptones
- À grande teneur de tryptophane
- Ajout de réactif de Kovacs pour déterminer la production d’indole à partir du tryptophane
À quoi sert la gélose de citrate
Permet de différentier les Entérobactéries
- Contient du citrate
- Contient du sulfate d’ammonium
les 2 sont les seuls sources de Carbone dans cette gélose
- Indicateur de pH
- Si la bactérie peut utiliser le citrate et le sulfate d’ammonium
- le sulfate d’ammonium sera dégradé en ammoniac ce
- PH acide
À quoi sert la gélose peptone fer (PIA)
Permet de différentier les Entérobactéries
- Contient du citrate ferrique
- Devient noir
quand la bactérie produit du sulfure d’hydrogène
À quoi sert la gélose PAD
Permet de différentier les Entérobactéries
(phénylalanine désaminase)
- Contient du phénylalanine
- si désaminé par la bactérie = devient de l’acide phénylpyruvique
- Détecté par l’ajout de FeCl3 après l’incubation ?
À quoi sert la gélose urée ?
Permet de différentier les Entérobactéries
Si dégradé par uréase +
se transforme en ammoniac et ce sera basique
Qu’est-ce que on ajoute à l’eau peptonée pour savoir si la bactérie à produit de l’indole à partie du tryptophane ?
Réactif de Kovacs
Qu’est-ce qu’on ajoute sur la pente de la gélose PAD pour déterminer si l’acide devient phénylpyrivique en ayant désaminé la phénylalanine ?
Fe Cl 3
Chlorure ferrique
Pour éviter que les bactéries Gram + déjà ensemencées meurts On porcède à une expérience ?
Repiquer sur un milieu frais et stérile pour éviter qu’ils ne meurent par manque d’éléments nutritifs ou par empoisonnement de leurs propres déchets métaboliques
Est-ce que les gram + peuvent faire des endospores ?
oui
Pour comparer les résistances des gram + à certains agents physiques et chimique qu’est-ce qu’on. va regarder ?
La production d’endospores
pH des acidophiles ?
1,0 à 5.5
pH des neutrophiles ?/
5.5 à 8,0
pH des alcalophiles ?
8,5 à 11,5
Qu’est-ce qui arrive à la bactérie lorsque son milieu change radicalement de pH ?
- Destruction de la membrane plasmique
- Inhibe certains processus métaboliques
Quels sont les indicateurs de ph dans le bouillon lactose ?
Rouge de phénol
Bromocresol
qu’est-ce qu’on ajoute au bouillons lactosé (Lac) pour voir le pH ?
tube de durham
rouge de phénol
Bromocrésol pourpre
Si dans le tube de durham ert dans le bouillon lactosée, il y a une croissance et un pH neutre ou alcalin ?
le sucre n’a pas été utilisé
Si dans le tube de durham et dans le bouillon lactosé il y a croissance et ph acide et présence ou absence de gaz ?
sucre a été utilisé avec ou sans dégagement de CO2
Dans quel gélose on met du FeCl3 ?
PAD
péhylalanine désaminase
Qu’est-ce qui se passe dans la gélose citrate si le citrate est utilisé comme seul source de Carbone et le phosphate d’ammonium comme seul source d’azote ?
L’indicateur de pH va du vert au bleu
alcalination
Que se passe-t-il dans l’eau peptonée et qu’est-ce que on va voir si on ajoute un réactif qui s’appel ?
Kovacs
Détecte l’indole et devient rouge vif !
Quelle couleur va virer la gélose urée ?
Passe de l’orange au rouge
Qu’est-ce qui arrive à la gélose PIA si il y a degagement de h2S ?
Gélose devient noir
Quelles-sont les espèces gram+ qui vont créer des endospores ?
Clostridium
Bacillus
Les entérobactéries , au niveau de l,oxygènes, vont croître dans un milieu de quel type ?
Anaérobie facultatif
Quels-sont les gram+ témoins pour l’entretien de routine des autoclaves ?
Geobacillus
Stearothermophilus
La germination des spores sera déterminé par quoi ?
l’acidité du milieu
Quelles est la technique pour voir les endospores ?
La coloration à chaud (coloration schaeffer-Fulton)
- vert de malachite
- Safranine
Conséquence lorsque la température n’est pas optimale pour la bactérie ?
Les molécules structurales et enzymatiques sont déformés
Pas de multiplication
Cause la mort des cellules
Quels-sont les paramètres à tenir en compte lors de la stérilisation ?
Moyen d’élimination
Type de m.
Âge de la culture
Qt de m. présents (concentration)
Quel est le procédé le plus économique de stériliser des milieux de culture et des objets ?
Procédés thermiques
Quels-sont les procédés thermiques de la stérilisation ?
Incinération
Chaleur sèche
Chaleur humide
Quels-sont les procédés à froid de la stérilisation ?
Filtration
irradiation
Oxyde d’éthylen
