Transfert de gène

Question 1

protéines recombinantes

Answer 1

protéines produites par des cellules dont le contenu génétique a été modifié

Question 2

production de protéine préférable

Answer 2

production par génie génétique

Question 3

problèmes liés à l’utilisation d’hormone de croissance humaine

Answer 3

extraite à partir d’hypophyse de cadavres (contamination par le prion : Creuzfeld-Jacob)

Question 4

problèmes liés à l’utilisation d’insuline de porc

Answer 4

un AA de plus que l’homme : réaction antigénique

Question 5

problèmes liés à l’utilisation de FSH humaine

Answer 5

prélèvement d’urine de femmes ménopausées

Question 6

synthèse de protéines recombinante : transcription d’un …

Answer 6

ADNc (complémentaire)

Question 7

technique de sous-clonage

Answer 7

insertion du gène dans un vecteur

Question 8

exemples de vecteurs pour le sous-clonage

Answer 8

plasmide, adénovirus inactivé

Question 9

vecteur d’expression

Answer 9

transporteur génétique du gène d’intérêt codant pour la protéine recherchée

Question 10

étapes du processus biotechnologique

Answer 10

(vecteur + cellule hôte)
production
séparation
extraction
purification

Question 11

utilisation d’hôtes procaryotes

Answer 11

pas de modifications post traductionnelles (glycolysation)

Question 12

utilisation d’hôtes eucaryotes

Answer 12

production de petits peptides (insuline)

Question 13

utilisation de cellules CHO (ovaires de hamster chinois) comme hôtes

Answer 13

production de protéines complexes (poids moléculaire élevé)

Question 14

utilisation de plantes comme hôtes

Answer 14

production de molécules à effet thérapeutique (ex : tabac)

Question 15

utilisation d’animaux transgéniques comme hôtes

Answer 15

gène inséré en aval de la caséine : molécule sécrétée dans le lait
(investissements lourds et marchés très restreints)

Question 16

banques cellulaires

Answer 16

congelées (décongelées lors de besoin de production)

Question 17

objectifs des thérapies géniques

Answer 17

addition d’un gène exogène :

• restauration d’une fonction perdue
• invalidation d’un gène
• acquisition d’une nouvelle fonction cellulaire

Question 18

transgenèse directe

Answer 18

micro-injection dans un ovocyte fécondé

Question 19

caractéristiques de la transgenèse directe

Answer 19

délicat
intégration au hasard
rentabilité faible

Question 20

éléments utilisés losr du ciblage génétique par recombinaison homologue

Answer 20

• enzyme de recombinaison (recombinase : CRE)
• séquences flanquantes connues
• cassette de sélection

Question 21

caractéristique du ciblage génétique par recombinaison homologue

Answer 21

remplacement ou insertion contrôlée

Question 22

comparaison du ciblage génétique (recombinaison) à la transgenèse directe

Answer 22

le ciblage génétique par recombinaison homologue est plus efficace que la transgenèse directe

Question 23

knock-in

Answer 23

apport d’un gène

expression ou surexpression

Question 24

knock-out

Answer 24

altération d’un gène

absence d’expression

Question 25

préparation de cellules ES à partir de …

Answer 25

la masse cellulaire interne (embryon de la même espèce)

Question 26

préparation de souris transgéniques à partir de cellules ES

Answer 26

préparation de cellules ES
insertion ADN (vecteur)
sélection des cellules recombinées (gène de sélection)
injection dans un blastocyte
souris mosaïque/chimérique
génération suivante : souris transgénique

Question 27

pour des souris transgéniques il faut que le …

Answer 27

transgène soit intégrés aux gamètes

Question 28

thérapie génique in vivo

Answer 28

injection directe du transgène

Question 29

problèmes de la thérapie génique in vivo

Answer 29

accessibilité du tissu à traiter

nature du vecteur (utilisation de vecteurs viraux)

Question 30

thérapie génique ex vivo

Answer 30

greffe de cellules génétiquement modifiées

Question 31

cellules souches pluripotentes induites (IPS)

Answer 31

cellules adultes ramenées à l’état de cellules souches embryonnaires indifférenciées par injection de gène précis à l’aide de virus

Question 32

exemple de cellules transformées en IPS

Answer 32

globules rouge

Question 33

ARN interférents

Answer 33

petis ARN (ARNsi/ARNmi) susceptibles d’inhiber ou détruire spécifiquement un ARN cible

Question 34

le siRNA est …

Answer 34

complémentaire de l’ARNm

Question 35

interférence ARN

Answer 35

“post-transcriptional gene silencing”

Question 36

pri-microARN

Answer 36

repliement du précurseur du microARN

longue épingle à cheveux : 1 000 nt

Question 37

pré-microARN

Answer 37

pri-microARN coupé par Drosha

courte épingle à cheveux : 100 nt

Question 38

Drosha

Answer 38

endonucléase du nucléoplasme

Question 39

exportine-5

Answer 39

exporte le pré-microARN dans le cytoplasme

Question 40

Dicer

Answer 40

endonucléase du cytoplasme

transforme le pré-microARN en miARN sb

Question 41

complexeRISC

Answer 41

protéine argonaute + ARNmi

Question 42

obstacles à l’utilisation d’ARN interférents (knock-down)

Answer 42

franchir les membranes cellulaires pour atteindre les cellules cibles
absence de toxicité
estimer leur stabilité et les doses à administrer
s’assurer de leur spécificité

Question 43

utilisation des ARN interférent en thérapie humaine

Answer 43

pathologies tumorales

dégénérescence maculaire

Question 44

utilisation des ARN interférent contre les pathologies tumorales

Answer 44

inhibition des EGFR (récepteur de facteur de croissance )

Question 45

utilisation des ARN interférent contre la dégénérescence maculaire

Answer 45

inhibition des VeGF

Question 46

bioinformatique

Answer 46

banque de données de séquences (AN, protéines)

banques de maladies (Orphanet)

Question 47

application du transfert de gène au mammouth

Answer 47

fécondation à partir de sperme congelé de mammouth
clonage reproductif à partir d’une cellule congelée
clonage à partir du séquençage du génome du mammouth