TP1 - Comment obtient-on une lame en histologie? Flashcards
Nommer les étapes de la préparation d’une lame en histologie
1) Prélevement par le chirurgien
2) Examination macroscopique, prise de mesure, poids et apparence
3) Fixation
4) Circulation
5) Enrobage dans de la parafilm
6) Coupe au microtome
7) Bain d’étalement et adhésion de la coupe sur la lame de verre
8) Coloration et montage de la lame
9)Visualisation (optique ou élèctronique)
Pour l’étape de la fixation des tissus
À quel moment est-elle faite et avec quelle substance
Parfois, directement après le prélèvement toujours après la mise en cassette, l’échantillon est placé dans de la formaline 10% tamponnée
À quoi sert l’étape de fixation
Préserver la morphologie du tissu cellulaire le plus près de son état vivant
En quoi consiste la circulation et nommer ses étapes
En générale, remplacer l’eau des tissus par de la parafine pour mieux la couper au microtome
1)Fixation
2) Déshydratation
3) Éclaircissement (xylène ou toluène)
4) Infiltration dans de la prafine sous vide à 60°C
En quoi consiste l’enrobage à la parafine
Enrouber les tissus en un bloc de parafine pour découpage au microtome
1) Utilisation de parafine liquide chaude pour mouler le tissu ensuite placer cassette avec identification par dessus
2) Refroidissement sur une plaque froide et demoulage (bloc de parafine solide qui sont présérvés pendant plusieurs années
Nommer l’étape primordiale après la coupe au microtome
Mise sur bain d’étalement (eau à 42°C-45°C) ensuite adhésion de la coupe sur une lame de verre + séchoir
Laquelle de ces étapes ne sont pas nécessaire dans la coloration HES d’une lame
* Déparaffinage
* Réhydratation
* Hématoxyline
* Éosine
* Safran
* Déshydratation
* Éclaircissement
* Milieu de montage
* Circulation
* Lamelle
* Séchage à plat
Circulation
Nommer les différents colorants utilisées dans la coloration HES et ce qu’ils colorent
Hématoxyline colorant basique qui lie les acides nucléiques acides (mauve)
Éosine: colorant acide qui lie les structures basiques cytoplasmiques
Safran: Colorant acide qui lie les structures basiques du collagène
Nommer les colorants utilisées dans une coloration de Trichrome de Masson bleu ce qu’ils colorent
1)Hématoxyline
2)Biebrich écarlate: Colorant acide qui lie les strcutures basiques cytoplasmiques
3)Bleu d’aniline: Colorant acide qui lie les structures basiques du collagène et mucus
Qu’est ce qui peut causer la formation de bulles comme artefacts
Montage de la lamelle (formation de bulles)
Qu’est ce qui peut causer des déchirures comme artecfact
Coupe au microtome
Bain d’étalement trop chaud
Quelle étape d’une montage d’une lame de microscopie fait en sorte que les lipides sont dissous
Circulation
Qu’est ce qui peut former des plis comme artefact
Coupe au microtome (forme circulaire du tissu)
Bain d’étalement, température trop basse
Nommer les 3 étapes qui peuvent formés un espacement vide comme artefact
Fixation, circulation (rétricissement)
Bain d’étalement (expension)
Nommer les causes probables des stries comme artefact
Coupe au microtome
-Couteau trop usé
-Particule dure dans le tissu