Thème 10 Flashcards
Qu’est-ce que la biotechnologie?
Technique utilisant des organismes vivants ou leurs produits en vue d’en tirer divers avantages
Qu’est-ce qu’un génie génétique?
Technique portant sur la manipulation directe des gènes a des fins pratiques (une branche de la biotechnologie)
Quelles définition est la plus large, biotechnologie ou génie génétique?
biotechnologie
Quelle est la différence entre un plasmide et un vecteur?
Les vecteurs sont des plasmides modifié pour les applications en biotechnologie
Les plasmides se font naturellement dans les bactéries
Quelles sont les trois étapes du clonage moléculaire?
1 : Insertion du gène d’intérêt
2 : Transformation
3 : Mise en culture
Quelles sont les trois étapes du cycle 1 du principe d’amplification par PCR?
1: dénaturation : chauffage pendant une courte période à 95 degré Celsius
2 : hybridation: refroidissement
3 : élongation
Combien de cycles contient le principe d’amplification par PCR?
3 cycles
Quel est le but du premier cycle d’amplification par PCR?
Production de deux molécules
Quel est le but du deuxième cycle d’amplification par PCR?
Production de 4 molécules
Quel est le but du troisième cycle d’amplification par PCR?
Production de 8 molécules
2 correspondent à la séquence visée et de la bonne longueur
Comment fonctionnent les enzymes de restriction?
Reconnaît la site de restriction (séquence d’ADN) et coupe exactement où il est situé
Qu’est-ce que l’ADN ligase?
C’est l’enzyme qui permet la ligation du vecteur et du gène d’intérêt
Qu’est-ce que la ligation du vecteur et du gène d’intérêt ?
Réunion de deux fragements d’ADN
Quelle est la deuxième étape du clonage moléculaire?
Transformation
Quel est le but de la transformation dans le clonage moléculaire?
Faire entrer le vecteur recombiné (vecteur + gène d’intérêt) dans une bactérie, une levure ou une cellule animale.
Quel est l’avantage de l’utilisation des levures par rapport aux bactéries dans la transformation lors du clonage moléculaire ?
Peut faire des modifications post-traductionnelles
Nommer une des techniques de transformation et expliquer la.
Choc thermique : Variation de la température (déstabilise la membrane plasmique)
Quelle est la troisième étape du clonage moléculaire?
Mise en culture
À quoi sert la sélection par les antibiotiques?
On met les virus sur une gélose contenant des antibiotiques, donc les cellules non transformées (celles qui n’ont pas le vecteur résistant aux antibiotiques) meurt
À quoi sert la sélection par le gène LacZ (X-Gal)?
Différencier les cellules ayant un vecteur recombiné versus non recombiné
Après la sélection par le gène LacZ, qu’est-ce qui nous permet de distinguer les vecteurs non-recombines des vecteurs recombiné?
Vecteurs non recombiné : gène LacZ fonctionnel donc il y a d’hydrolyse X-gal donc les colonies deviennent bleues
Vecteurs recombiné : gène LacZ non fonctionnel donc il n’y a pas d’hydrolyse X-gal donc les colonies restent blanche
Quel est l’utilité d’un plasmide bactérien?
Avantageux pour les bactéries
Exemple : les rend résistantes aux antibiotiques
A quoi sert un vecteur de clonage?
Réplication du gène introduit
À quoi sert un vecteur d’expression?
Expresison du gène introduit