Test PCR Flashcards
Quel est le matériel requis pour effectuer un test PCR?
ADN, nucléotides libres, ADN polymérase, amorce, machine
Comment prépare-t-on l’ADN pour un test PCR?
Purifier l’ADN pour enlever les protéines. Couper l’ADN en morceaux plus petits avec une enzyme de restriction.
Comment sépare-t-on l’ADN?
On utilise la chaleur. 97 ℃ pendant 1 minute
Comment est-ce qu’on met une amorce?
Petit morceau d’ADN qui a une séquence précise connue. On refroidit et l’amorce se colle naturellement.
On refait environ ____ fois toutes les étapes. On double l’ADN à chaque fois. À la fin on a 230 fois l’ADN de départ.
30
Quelles sont les étapes d’un test PCR?
- Préparer l’ADN
- Séparer l’ADN
- Mettre une amorce
- Ajout d’ADN
- Recommencer
Qu’est-ce que l’électrophorèse sur gel?
L’ADN migre sur le gel avec le courant électrique. Les brins d’ADN sont séparé selon leur taille.
Commet fait-on un profil ADN?
- Couper l’ADN avec l’enzyme de restriction.
- Choisir des gènes à étudier qui ont des allèles de longueurs différentes.
- Faire une ACP avec les amorces des gènes choisis.
- Utiliser cet ADN pour l’électrophorèse.
L’ADN de provenance inconnue doit être comparé à __________ pour être identifié. La profil ADN est propre à une seule personne à moins de _________.
des échantillons de personnes connues
jumeaux identiques
Comment fait-on un test de paternité?
On fait le profil des parents et de l’enfant. On compare les bandes. Toutes les bandes de l’enfant doivent provenir du père ou de la mère.
Comment fait-on un test de matrilinéarité?
On fait un test d’ADN mitochondrial. Les mitochondries viennent toujours de la mère.
Le séquençage d’ADN a pour but ___________________.
d’identifier la séquence des nucléotides d’un gène
Comment fait-on un séquençage d’ADN?
On utilise les nucléotides spéciaux qui provoquent l’arrêt de la réplication. Ils ont chacun une couleur spécifique.
L’électrophorèse est ______________. Chaque longueur correspond à la _____ du dernier nucléotide. Il reste à lire les couleurs. La lecture au séquenceur lit les fragments du plus petit au plus grand pour trouver la couleur du dernier nucléotide de chacun, ça donne le nucléotide complémentaire de notre gène d’intérêt.
la séparation des brins selon leur taille
couleur
