Teorica

Question 1

Quando se deve subcultivar uma cultura? (assinale a opção CORRECTA)
a. Quando a cultura está confluente
b. Antes de se atingir a fase de plateau
c. Todas as opções estão correctas
d. A intervalos regulares, sempre com a mesma periodicidade
e. Quando o meio de cultura parece estar exaurido de nutrientes

Answer 1

c. Todas as opções estão correctas

Question 2

As culturas primárias (seleccione a opção CORRECTA):
a. são geralmente homogéneas
b. proliferam bem
c. Podem entrar rapidamente em senescencia
d. sofrem divisões celulares ilimitadas
e. tem geralmente um cariotipo diferente do tecido de origem

Answer 2

c. Podem entrar rapidamente em senescencia

Question 3

Qual a principal diferença em termos de protecção do utilizador entre as câmaras de fluxo laminar vertical e as câmaras de fluxo laminar horizontal? Seleccione a opção CORRECTA.
a. Não há diferenças em termos de capacidade de protecção entre as duas câmaras
b. Apenas a câmara de fluxo horizontal protege o utilizador
c. A câmara de fluxo horizontal tem mais filtros no percurso do ar filtrado
d. Apenas a camara de fluxo vertical protege o utilizador
e. Os filtros da câmara de fluxo vertical são mais eficientes

Answer 3

d. Apenas a camara de fluxo vertical protege o utilizador

Question 4

As células não modificadas param de proliferar quando a cultura atinge a confluência. Assinale a opção
CORRECTA:
a. Afirmação incorrecta, a confluência apenas abranda o crescimento celular
b. Afirmação incorrecta, as células não páram de proliferar quando ficam confluentes
c. Afirmação correcta, porque as células deixam de precisar de soro no meio de cultura depois de ficarem confluentes
d. Afirmação correcta, devido à inibição de crescimento por contacto entre células
e. Nenhuma das opções está correcta.

Answer 4

d. Afirmação correcta, devido à inibição de crescimento por contacto entre células

Question 5

A imagem mostra uma cultura de células transfectada com um plasmideo contendo como gene eporter a proteina verde fluorescente (GFP). A eficiência de transfecção nesta experiência foi muito paixa (15%). Qual a possivel razão? (seleccione a opção correcta)
a. ainda não passou tempo suficiente após a transfecção para se observar boa expressão do gene reporter
b. plasmideo utilizado não é compativel com o tipo celular a transfectar
c. a cultura apresentava uma confluência baixa na altura em que o vector foi transfectado
d. possivel contaminação das células com micoplasma
e. todas as opções estão corretas

Answer 5

e. todas as opções estão corretas

Question 6

Qual a razão de algumas células precisarem de crescer em meio condicionado por outras células (feeder cells)? (seleccione a opção CORRECTA)
a. Todas as opções estão correctas
b. Porque podem precisar de factores de crescimento secretados pelas feeder cells que ainda não foram identificados e como tal não é possivel reproduzir um meio de cultura supiementado com esses factores
c. É mais barato condicionar o meio de cultura por feeder cells do que suplementar o meio com
os factores pretendidos
d. As feeders cells podem crescer mais do que as células de interesse quando cultivadas juntas e como tal a utilização do seu meio condicionado contorna este constrangimento
e. É mais barato condicionar o meio de cultura do que crescer os 2 tipos celulares numa co-
cultura

Answer 6

b. Porque podem precisar de factores de crescimento secretados pelas feeder cells que ainda não foram identificados e como tal não é possivel reproduzir um meio de cultura supiementado com esses factores

Question 7

As células estabelecem ligações com outras células e com a matriz extracelular que lhes permite organizarem-se em tecidos. Qual a afirmação CORRECTA?
a. os receptores de adesão celular são sempre independentes de cálcio
b. a laminina é uma glicoproteina importante para a interacção entre as células e a matriz extracelular
c. nenhuma opção está correcta
d. a elastina é um proteoglicano que permite a interacção célula-matriz
e. a matriz extracelular é produzida por células do sistema imunitário

Answer 7

b. a laminina é uma glicoproteina importante para a interacção entre as células e a matriz extracelular

Question 8

Indique quais as 3 principais caracteristicas de um organoide deve apresentar para que possa ser
designado como tal
a. Organização espacial semelhante à do orgão; Apresenta os vários tipos de células do orgão; Recapitula as funções especificas do orgão
b. Organização espacial semelhante a do orgão; Apresenta apenas um tipo especifico de celulas do orgão; serve como plataforma para testes
C. Estrutura tridimensional; Apresenta apenas um tipo especifico de celulas do orgao; recapitula as funções especificas de um orgão
d. nenhuma opção esta correta
e. estrutura tridimensional; apresenta varios tipos de celulas do orgão, serve para modelar doenças

Answer 8

e. estrutura tridimensional; apresenta varios tipos de celulas do orgão, serve para modelar doenças

Question 9

O que distingue uma cultura mista de uma co-cultura é (seleccione a opção CORRECTA):
A co-cultula permire avallar a comunicacao intercelular atlaves de tactores de contacto
b. Nenhuma opçao esta correcta
с. A cultura mista é feita com contacto físico entre as células, e a co-cultura não permite contacto entre as células
d. A co-cultura permite avaliar interaccões célula-célula
e. A co-cultura permite avaliar interacções célula-substrato

Answer 9

с. A cultura mista é feita com contacto físico entre as células, e a co-cultura não permite contacto entre as células

Question 10

O sistema de contenção e manuseamento mais adequado a um organismo do grupo de risco 4 é:
a. camara de classe II
b. câmara de classe I
c. camara de clase III
d. câmara de classe IV
e. não é necessário sistema de contenção, é de baixo risco

Answer 10

c. camara de clase III

Question 10

Dependendo do tipo celular a cultura de células pode ser realizada em (seleccione a opção correta)
a. todas as opcões estão correctas
b. Adesão
c. Suspensão
d. Monocamada
e. co-cultura

Answer 10

a. todas as opcões estão correctas

Question 11

As linhas celulares (seleccione a opção CORRECTA):
a. são altamente heterogéneas
b. têm geralmente um cariótipo euplóide
c. não podem ser cultivadas por longos períodos de tempo
d. proliferam bem
e. sofrem divisões celulares limitadas

Answer 11

d. proliferam bem

Question 11

Como pode identificar uma contaminação por micoplasmas numa cultura de células? Seleccione a opção correta
a. Através da alteração do pH do meio de cultura
b. Observação ao microscópio óptico
c. Coloração das mitocôndrias
d. Através da alteração da turbidez do meio de cultura
e. Com um corante de DNA

Answer 11

e. Com um corante de DNA

Question 12

Acabou de descongelar um lote de células que recebeu há algum tempo de um colega da Universidade de Lisboa. Coloca as células a crescer e verifica que a morfologia que apresentam não é compatível com o tipo de celulas que deveria ter em cultura. Qual das seguintes possibilidades e CORRECTA
a. Identificou mal as suas celulas na incubadora
b. o seu colega enviou-lhe as celulas erradas
c. Houve uma contaminação por outras células, que cresceram muito mais que as suas e tomaram conta da superfície de cultura
d. Descongelou o lote errado porque tinha as suas células mal identificadas no contentor de azoto liquido
e. Todas as opção estão correctas

Answer 12

e. Todas as opção estão correctas

Question 13

Comparando uma cultura primária e uma linha celular continua (seleccione a opção CORRECTA):
a. a cultura primária é clonal
b. a cultura primária entra em senescência mais rapidamente que a linha celular
c. a cultura primária é geralmente homogénea
d. a a linha celular tem um cariótipo mais estável
e. a cultura primária é sempre proliferativa

Answer 13

b. a cultura primária entra em senescência mais rapidamente que a linha celular

Question 14

Uma cultura de células pode ser feita a partir de tecido adulto ou de tecido embrionário. Seleccione a opção CORRECTA:
a. tecido adulto tem maior fracção de crescimento
b. O tecido embrionário tem muitas celulas precursoras
c. tecido adulto permite uma cultura com um tempo de vida mais longo
d. tecido embrionário tem células altamente especializadas em grande quantidade
e. É mais difícil iniciar uma cultura a partir de tecido embrionário

Answer 14

b. O tecido embrionário tem muitas celulas precursoras

Question 15

Como pode imortalizar uma cultura celular e fazer uma linha celular continua (seleccione a opção correcta)?
a. Sobre expressar a telomerase
b. Todas as opções estão correctas
c. Sobre expressar c-myc
d. Utilizar radiação
e. Utilizar genes de virus como o SV40

Answer 15

a. Sobre expressar a telomerase

Question 16

Mutações na CFTR nos doentes com Fibrose Quistica causam:
a. Ausência de transporte de iões de cloreto e bicarbonato
b. Nenhum opção está correta
c Aumento do transporte de ides de cloreto
d. Diminuição da actividade da enzima CFTR
e. Alterações no transporte de iões de potássio

Answer 16

a. Ausência de transporte de iões de cloreto e bicarbonato

Question 17

A glutamina é um aminoácido que se degrada quando em solução, produzindo amónia, que pode ser prejudicial para a cultura. Como pode contornar este constrangimento. seleccione a opção CORRECTA)
a. Nao colocar glutamina no meio
b. Nenhuma das opções está correcta
c. Utilizar uma forma mais estável da glutamina, como o dipéptido L-alanina-L-glutamina
d. Utilizar uma forma mais estavel da glutamina, como o dipéptido L-arginina-L-glutamina
e. Utilizar uma forma mais estável da glutamina, como o dipéptido L-metionina-L-glutamina

Answer 17

c. Utilizar uma forma mais estável da glutamina, como o dipéptido L-alanina-L-glutamina

Question 18

A cultura de células apresenta vantagens e desvantagens. Qual a opção CORRECTA?
a. fenótipo do tecido de origem é sempre preservado
b. é uma tecnologia com baixa especialização em termos tecnicos e humanos
c. pode haver um crescimento elevado de células indiferenciadas
d. para qualquer linha celular, o cariótipo é sempre igual ao tecido de origem
e. a quantidade de massa celular produzida é baixa

Answer 18

c. pode haver um crescimento elevado de células indiferenciadas

Question 19

Escolha a opção que menor completa a seguinte frase: o uso de cultura de celulas em terapia genica permite.
a. Avaliar a migração celular
b. Determinar a concentração celular
с. Quantificar a proliferação celular
d. Avaliar a diferenciação celular
e. Testar vetores de expressão

Answer 19

e. Testar vetores de expressão

Question 20

Há alguns equipamentos essenciais para fazer cultura de células. Seleccione a opção CORRECTA:
a. Todas as opções estão correctas
b. O microscópio de visualização das culturas deve ser invertido
c. As câmaras de fluxo laminar devem ter um fluxo vertical
d. A câmara de Neubauer é muito utilizada para contar células
e. E desejável a presença de sistemas de aspiração por vácuo e centrifugas, bem como armazenamento de frio.

Answer 20

a. Todas as opções estão correctas

Question 21

A figura mostra a coloração com sondas que avaliam a viabilidade celular (fluoresceina, a verde, e iodeto de propidio, a vermelho) de células MCF-7 (uma linha celular de cancro da mama) após tratamento com um fármaco de quimioterapia. Qual a afimação correta?
a. As células do painel A estão menos viáveis que as células do painel porque apresentam menos células coradas com iodeto de propidio
b. nenhuma opcao esta correcta
C. As células do painel A estão menos viáveis que as células do painel B, porque apresentam menos células coradas com fluoresceina
d. As celulas do palnel A estao mais viaveis que as celulas do palner b. porque apresentam menos celulas coradas com fluoresceina
e. As células do painel A estão mais viáveis que as células do painel B, porque apresentam mais células coradas com PI

Answer 21

C. As células do painel A estão menos viáveis que as células do painel B, porque apresentam menos células coradas com fluoresceina

Question 22

Para garantir a esterilidade de uma solução à qual adicionou um suplemento que não tem a certeza de estar estéril, qual o tamanho do poro do filtro que utilizaria?
a. 1 micrómetro
b. 0,2 milimetros
c. 0,45 micrómetros
d. 0,55 micrometros
e. 0,2 micrómetros

Answer 22

e. 0,2 micrómetros

Question 23

Vai iniciar um projecto de investigaçao com uma cultura da linha celular de glioblastoma humano U87. Qual o sistema de contenção mais adequado a trabalhar com este grupo de risco? (Seleccione a opção CORRECTA)
a. câmara de classe IV
b. câmara de classe IV+
c. camara de classe Il
d. câmara de classe l
e. câmara de classe III

Answer 23

c. camara de classe Il

Question 24

O ambiente de cultura apresenta alguns constrangimentos que podem condicionar o fenótipo das células. Qual dos seguintes NÃO é um constrangimento para células em cultura? Seleccione a opção CORRECTA.
a. Superficie de crescimento carregada negativamente
b. Ausencia de factores de crescimento/hormonas
c. Redução dos contactos célula-célula e célula-matriz
d. Perda da estrutura 3D
e. Favorecimento de crescimento e proliferação, em detrimento da diferenciação e expressão de funções especializadas

Answer 24

a. Superficie de crescimento carregada negativamente

Question 25

As superfícies de cultura devem ser adaptadas à aderência e crescimento celular, uma vez que
a. Todas as opções estão correctas
b. Superfícies de crescimento próprias para microscopia podem permitir a utilização directa da
cultura neste tipo de tecnica
c. Celulas que não produzem matriz podem aderir se a superficie de cultura for previamente tratada com componentes de matriz extracelular
d. As células aderentes preferem superficies tratadas especialmente para a cultura celular
e. Uma superficie carregada negativamente favorece a produção de matriz extracelular pelas celulas em cultura

Answer 25

a. Todas as opções estão correctas

Question 26

O uso rotineiro de antibióticos na cultura de células é aconselhado. Concorda ou discorda? (seleccione a opção CORRECTA)
a. Discordo. porque torna a cultura de células muito cara
b. Discordo, o uso continuado pode mascarar contaminações incipientes que de outra forma
seriam identificadas
c. Concordo, deve sempre usar-se antibióticos na cultura de células porque não permitem o
crescimento de bactérias
d. Discordo, porque pode interferir com o crescimento da cultura
e. Concordo, assim evitam-se contaminações por microorganismos

Answer 26

b. Discordo, o uso continuado pode mascarar contaminações incipientes que de outra forma
seriam identificadas

Question 27

Começou a trabalhar com uma linha celular que necessita de sor pala crescer adequadamente. No entanto, verifica que o crescimento das células é muito lento. Qual a razão possível? (seleccione a opção CORRECTA)
a. A placa de cultura não foi revestida com o revestimento correcto
b. soro não foi inactivado
c. Utilização de um lote de soro diferente
d. Contaminação por micoplasma
e. Todas as opções estão correctas

Answer 27

e. Todas as opções estão correctas

Question 28

Vai utilizar uma linha celular cujas exactas condições de cultura são conhecidas. Qual o meio de cultura que lhe permite ter maior reproducidilidade experimental!
a. Meio de cultura com soro e condicionado por feeder cells
b. Meio de cultura condicionado por feeder cells
c. Nenhuma opção está correcta
d. Meio de cultura com soro
e. Meio de cultura sem soro

Answer 28

e. Meio de cultura sem soro

Question 29

Qual dos seguintes e indicativo de atmostera com baixo CU2 (abaixo do normal) numa incubadora?
a. Alterações fenotípicas das células
b. Depleção de nutrientes
c. Meio de cultura de cor rosa intensa
d. Alteração da turbidez do meio de cultura
e. Diminuição do pH do meid

Answer 29

a. Alterações fenotípicas das células

Question 30

Nem todas as células secretam matriz extracelular. Qual a alternativa CORRECTA para aderir estas células numa superficie de cultura?
a. Todas as opções estão correctas
b. Revestimento da superficie com matriz extracelular comercial
c. Revestimento da superficie com componentes da matriz
d. Utilização de superficies de cultura de plástico de boa qualidade
e. Utilização de feeder cells na superficie de cultura

Answer 30

a. Todas as opções estão correctas

Question 31

Um investigador detectou micoplasmas numa cultura de celulas que recebeu de um colaborador em Madrid. Qual a provável forma de detecção que utilizou? (seleccionar a opção correcta)
a. inspeção visual da cultura (morfologia celular alterada)
b. depleção de nutrientes no meio de cultura
c. alteração visível do pH
d. nenhuma opção esta correcta
e. aumento da turbidez do meio

Answer 31

d. nenhuma opção esta correcta

Question 32

Uma cultura organotípica caracteriza-se por (seleccione a opção CORRECTA):
a. Ser útil para a propagação de orgãos
b. Manter a arquitectura dos tecidos do orgão de origem
c. Nenhuma das opções está correcta
d. Dissociar as células de um orgão e fazer uma co-cultura
e. Fazer uma cultura de orgão

Answer 32

b. Manter a arquitectura dos tecidos do orgão de origem

Question 33

Num embrião de Xenopus laevis onde se situa a animal cap?
a. Nenhum opção está correta
b. No polo animal
c. Entre o polo vegetal e o polo animal
d. No polo vegetal
e. Numa região adjacente ao organizador de Spemann

Answer 33

b. No polo animal

Question 34

Um investigador esteve a passar culturas celulares numa câmara de fluxo laminar e detectou uma
contaminação por fungos. Qual a origem mais provavel de contaminação selecciona a opção correcta
a. ma manutenção da incubadora que alojava as celulas
b. quebra na contenção da camara de fluxo por falta de manutenção
c. todas as opções então correctas
d. contaminação por contacto com outras culturas contaminadas
e. má tecnica asséptica

Answer 34

c. todas as opções então correctas

Question 35

O laboratorio de cultura de celulas e uma infraestrutura muito especializada. Seleccione a opção CORRECTA sobre a configuração do laboratório de cultura de células:
a. A zona de lavagens e preparação deve estar incluida na área de manipulação estéril
b. A esterilização de material e a inactivação de resíduos devem ser feitas em unidades de esterilização diferentes.
c. A área de manipulação estéril pode ser uma zona de circulação de investigadores
d. A zona de manipulação estéril também pode ser usada para fazer manipulações bactenologicas
e. A zona de armazenamento deve ser afastada das câmaras de fluxo e incubadoras, de preferência fora da zona de manipulação estéril

Question 36

A utilização de tripsina pode ser feita a frio ou a 37°C. Qual a vantagem da tripsinização a frio? (assinale a opção CORRECTA)
a. Pode ser feita sem agitação
b. Utiliza-se menos tripsina do que a 37°C
c. Mais económico porque gasta menos energia
d. Boa penetração no tecido antes de se aumentar a actividade da tripsina por elevação da temperatura até 37°C
e. Evita a utilização de DNAse

Answer 36

d. Boa penetração no tecido antes de se aumentar a actividade da tripsina por elevação da temperatura até 37°C

Question 37

Indique qual a sequência correta para estabelecer uma linha celular primária:
a. Descongelar um vial de células criopreservadas: utilização de uma enzima para digestão dos fragmentos: plaqueamento dos pequenos fragmentos numa placa de cultura de células com meio adequado
b. Obter uma amostra do tecido de interesse sub cultura das celulas: plaqueamento dos pequenos fragmentos numa placa de cultura de células com meio adequado
C. Obter uma amostra do tecido de interesse; utilização de uma enzima para digestão dos fragmentos; plaqueamento dos pequenos fragmentos numa placa de cultura de celulas com meio adequeado
d. Nenhum opcão esta correta
e. Descongelar um vial de células criopreservadas: sub-cultura das células: plaqueamento dos pequenos fragmentos numa placa de cultura de células com meio adequado

Answer 37

C. Obter uma amostra do tecido de interesse; utilização de uma enzima para digestão dos fragmentos; plaqueamento dos pequenos fragmentos numa placa de cultura de celulas com meio adequeado