TEM Flashcards
TEM = transmission electron microscope
דומה למיקרוסקופ אור, רק שמקור האלקטרונים הוא מעל לדגימה. כמו כן, יש צורך ליצור ואקום באזור הדגימה. הדגימה נצבעת באמצעות חומר עם צפיפות אלקטרונים , אלקטרונים שנתקלו בצבע ולא יגיעו למצלמה יראו בשחור. הפוקוס נעשה באמצעות סלילים היוצרים שדה מגנטי.
ניגודיות התמונה
נקבעת לפי צפיפות החומרים. ככל שהחומר בעל מספר אטומי גבוה יותר, כך הוא פחות חדיר לאלקטרונים. דגימות ביולוגיות בד”כ מורכבות מיסודות בעלי מספר אטומי נמוך, לכן יש לסמן אותן בחומרים כמו עופרת, אוסמיום או אורניום.
סימון חלבונים
שימוש בנוגדנים בדומה למיקרוסקופ אור. רק שהשימוש יהיה בזהב, שהוא אלקטרון דנס.
immunogold electron microscopy
שימוש בנוגדנים מצומדים לחלקיקי זהב לסימון חלבונים
בדגימה. מגבלת השיטה היא שהנוגדנים המסומנים לא יכולים לחדור את הדגימה אז יסמנו רק אזורים בקצה החתך.
פתרונות למגבלות השימוש בזהב
סימון לפני הוספת הרזין באמצעות
חלקיקי זהב קטנים במיוחד - קוטר של 1 ננומטר. צריך להוסיף עוד שלב של הוספת חלקיקי כסף או זהב נוספים.