Tecnicas Histológicas Flashcards
¿Cuales son los pasos para la fijación de los tejidos para estudios histológicos?
- Obtención del material
- Fijación
- Deshidratación
- Aclarado.
- Inclusión.
- Corte.
- Montaje y rehidratación.
- Tinción.
¿Cuales son los tipos de obtención de muestra para los estudios histológicos?
(paso 1, obtención del material)
- Biopsia
- Frotis
- Necropsia
¿En que consiste la biopsia, y que se tiene que tomar en cuenta al realizarlo?
La extracción de una muestra de tejido apartir de un ser vivo
- Tiene que medir 10mmx5mm
- Tiene que estar rotulado
- Se tiene que poner la hora de extracción
¿Cual es el metodo de extracción adecuado cuando se quiere extraer una muestra de una mucosa o un tejido que cambia constantemente?
Frotis o citología
Ejemplo: frotis de sangre, es un tejido que cambia constantemente y se le hace frotis
¿Para que sirve la fijación de la muestra?
Detener la actividad degenerativa postmortem de la célula
¿Cuál es el tiempo correcto para hacer la fijación de un tejido para su estudio histológico?
6h-24h
¿Cuál es la razón por la que un tejido histológico debe ser fijado entre 6h a 24h?
Antes de las 6h: debido a que no ha transcurrido el suficiente tiempo desde que se extrajo, no se podran ver bien todos las estructuras de dentro
Después de las 24h: el tejido a degenerado mucho, decaen las estructuras y se pierde lo que se desea observar
¿Que nombre recibe la sustancia mediante la cual se detiene la actividad metabólica de un tejido para su estudio histológico?
Fijador
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¿Cuales son las cualidades que debe tener un fijador?
- Actuar con rapidez
- Alto poder de penetración
- Conservar detalles estructurales
- No crear artefactos
- Impedir la desaparición de los elementos solubles
- No retraer los tejidos
- Fácil manipulación
- Debe ser económico
- Debe coagular sin unirse a estructuras del tejido
- hacer pregunta sobre como furula lo de la coagulación
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¿Cómo se dividen los fijadores para estudios histológicos?
Fijadores Químicos
Fijadores Físicos
¿De que manera pueden ser los fijadores químicos para estudios histológicos y por qué?
Simples: solo poseen un componente, ejemplo: alcohol absoluto, formaldehído
Compuestos: tienen más de un componente, mientras mas compleja la dinámica química mejor ya que sirve para detener más rutas metabólicas
¿De qué esta constituido el líquido de Fleming, que tipo de fijador es y cómo actúa?
Mezcla de cromo,
osmio y ácido acético.
Fijador químico compuesto
¿De qué esta constituido el líquido de Zenker, que tipo de fijador es y cómo actúa?
Mezcla de bicromato sublimado y acético
Fijador químico compuesto
¿De qué esta constituido el líquido de Helly, que tipo de fijador es y cómo actúa?
Mezcla de zenker y formol
Fijador químico compuesto
¿De qué esta constituido el líquido de Bouin, que tipo de fijador es y cómo actúa?
Formol, Ácido Pícrico y Ácido Acético
Fijador químico compuesto
Entrecruza proteínas y mantiene una imagen del tejido similar al vivo
¿Cuales son los fijadores físicos más usados?
- Criodesecación
- Criosucción
- Congelación
- Calor seco
- Calor húmedo
¿En que consiste la criodesecación en el estudio histológico?
Congelación de los líquidos de la célula
¿En que consiste la criosucción en el estudio histológico?
Se congela el tejido y se saca el líquido
¿En que consiste la congelación en el estudio histológico?
Se congela el tejido completo, el proceso es similar a cuando uno mete agua al freezer para hacer hielo
¿En que consiste el calor seco en el estudio histológico?
sirve para deshidratar y fijar tejidos no muy vascularizados
¿En que consiste el calor húmedo en el estudio histológico?
Sirve para fijar tejidos vascularizados, se sustituye la sangre circulando por los vasos con agua, se usa este ya que también se quieren estudiar los vasos del tejido
¿Que técnica histológica de fijamiento con base física se usaría para un tejido vascularizado?
Calor húmedo
¿En que consiste la deshidratación de un tejido para un estudio histológico?
en la deshidratación de la muestra usando etanol, alcohol isopropílico u otros componentes
Al usarse alcohol para deshidratar una muestra para un estudio histológico, ¿se sumerge en alcohol al 100% la primera vez?
No, se va sumergiendo en diferentes líquidos con su % aumentado progresivamente
Primero 70%, luego 75%, luego 80% y así sucesivamente
¿Para que sirve el aclaramiento del tejido para los estudios histológicos?
Limpia la muestra, la vuelve mas traslucida y quita los artefactos que puede dejar el fijador
¿De que está compuesto el xilol y para que sirve?
Dimetil beceno, sirve para aclarar muestras
¿Para que sirve la inclusión en los estudios histológicos?
Sirve para darle rigídez a la muestra y prepararla para ser cortada ya que muchos tejidos son muy suaves o delicados y en el proceso de cortado podrían ser destruidos o no obtener el resultado deseado.
¿Cuales son algunas sustancias usadas para la inclusión de estudios histológicos?
Parafina (La más usada)
Resina
¿En qué consiste la microtomía en cuanto a los estudios histológicos?
Se cortan las muestras usando un microtomo, los cortes suelen ser de 5 a 15 micras
¿En que consiste la rehidratación de un tejido para los estudios histológicos?
Se vuelve a introducir agua al tejido haciendo la inversa que en la deshidratación, primero en concentración de OH de 95%, luego 90%, 85% y así sucesivamente.
Se suele hacer para que el agua, ahora dentro del tejido pueda propagar el colorante de una manera más fácil.
¿Qué se hace con la parafina de la inclusión luego de que se realiza el corte histológico?
Se disuelve la parafina ya que una vez hecho el corte, no es necesario más, se disuelve en xileno o tolueno, se disuelve y se extrae, luego ocurre la rehidratación del tejido (con una solución de alcohol decreciente, 95% OH, 90%, 85%…)
¿Una vez hecho el corte del tejido, que se hace con la parafina?
se extrae, ya sea mediante calor o xileno o tolueno, para poder hidratar la muestra para su posterior tinción
¿En que consiste la coloración en los estudios histológicos?
Se tiñe la muestra, usando diferentes técnicas y diferentes sustancias según lo requiera el tejido y lo que se quiera ver, se usa para ver y poder diferenciar las estructuras que se quieren estudiar
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Según su origen, ¿Cómo se clasifica la coloración?
Natural y artificial
Según su capacidad de coloración, ¿Cómo se divide la coloración?
Ortocromático
Monocromático
¿En que consiste el método de tinción ortocromático?
El colorante tiñe a la muestra del mismo color del colorante, por ejemplo el azul de metileno tiñe todo de azul, tiñe el tejido de su mismo color
¿En que consiste el método de tinción metacromático?
tiñen la muestra de colores diferentes según el tipo de tejido
¿Todas las tinciones son solubles en agua?
No, algunas lo son en alcohol, y se juega con las hidrataciones deshidrataciones para aplicar diferentes tipos de tinciones
¿Los colorantes básicos en estudios histológicos, con que parte de la célula reaccionan?
Reaccionan con los componentes anionicos de los tejidos (grupos fosfato de acidos nucleicos, grupos carboxilo de proteínas, grupo sulfato de los glucosaminoglucanos)
¿Que es la basofilia en estudio histológico?
Afinidad por bases o álcalis
¿A que parte de la célula tiñen los colorantes básicos?
al núcleo
¿Según que cosa varía la tinción de los grupos anionicos en estudios histológicos?
según el pH, si el pH es cerca de 10 los 3 grupos (grupos fosfato de acidos nucleicos, grupos carboxilo de proteínas, grupo sulfato de los glucosaminoglucanos) están ionizados y disponibles para la reacción mediante uniones electroestáticas
si es básico a neutro 5-7, solo los fosfato y sulfato
cuando es inferior a 4, solo se afecta el sulfato
¿Cuál es la carga de los colorantes ácidos?
Negativa
¿Cuál es la carga de los colorantes básicos?
Positiva
¿Qué es un líquido diafanizador?
Es un líquido capaz de mezclarse con el alcohol y disolver la parafina, se usa en las muestras deshidratadas.
El xilol es un líquido diafanizador
Asd
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