Técnicas citológicas e histológicas

Question 1

Etapas para microscopia óptica

Answer 1

• Obtención de la muestra
• Fijación
• Corte
• Coloración y montaje

Question 2

Técnicas especiales para observar células vivas

Answer 2

• Exteriorización y transiluminación de órganos
• Cámaras transparentes
• Cultivo de células
• Micromanipulación y microcirugía

Question 3

Técnicas especiales para aislar estructuras celulares

Answer 3

• Centrifugación
• Centrifugación isopícnica
• Centrifugación zonal

Question 4

Coloración vital y supravital

Answer 4

1- Introducir colorante en el organismo vivo

2- Extraer células de un organismo y colorearlas

Question 5

1 Obtención de muestra

Answer 5

• Fresca

- Espesor no mayor a 1cm

Question 6

2 Fijación

Answer 6

Impide la autolisis y crecimiento bacteriano

Question 7

Fijadores más usados

Answer 7

• Formol al 10%
• Alcohol absoluto
• Bouin
• Zenker

Question 8

Mordientes

Answer 8

Sustancias que contienen algunos fijadores que permiten la coloración posterior

Question 9

3 Corte

Answer 9

Láminas de 5 a 10 um de espesor c/micrótomos

Question 10

Inclusión en parafina:pasos

Answer 10

• Deshidratación
• Aclaramiento
• Inclusión en parafina
• Confección de los bloques

Question 11

Deshidratación

Answer 11

Gradualmente, con alcohol 50 95 100%

Question 12

Aclaramiento

Answer 12

En benzol, xilol, toluol solventes del alcohol y de la parafina.
El aclarante desplaza el alcohol

Question 13

Inclusión en parafina

Answer 13

Se pone la muestras en recipientes con parafina (58°) que se introduce en el tejido y reemplaza al aclarante

Question 14

Confección de los bloques

Answer 14

La pieza se coloca en un molde rectangular con parafina liquida y se deja solidificar para luego cortar

Question 15

4 Coloración

Answer 15

Cortes adheridos al portaobjetos con albúmina son coloreados según necesidades de observación

Question 16

Coloración hematoxilina-eosina

Answer 16

• Desparafinado de cortes (xilol)
• Hidratación gradual
• Coloración H (tiñe núcleos)
• Lavado en agua (ex. colorante) viraje
• Coloración E (tiñe citoplasma)
• Deshidratación gradual
• Aclarado en xilol
• Montaje con bálsamo de canadá

Question 17

Obtención de muestra M/E

Answer 17

No deben transcurrir más de 4 min

Question 18

Fijación M/E

Answer 18

Tetraoxido de osmio y glutaraldehído

Cubos no mayores a 1-2 mm

Question 19

Corte M/E

Answer 19

Espesor 20-100 nm c/ultramicrótonos

Inclusión con plástico (epón - araldita)

Question 20

Coloración M/E

Answer 20

Tratamiento del corte con vapores o soluciones de metales pesados (acetato de uranilo hidrox de plomo)

Question 21

Exteriorización y transilumunación de órganos

Answer 21

Sacar órganos provistos de pedículo vascular que permita coloración

Question 22

Cámaras transparentes

Answer 22

Observar células vivas y tejidos provistos de su irrigación sanguínea

Question 23

Cultivo de células

Answer 23

Estudio de procesos vitales.

Desarrollar y lograr reproducción de células c/m contraste de fase

Question 24

Micromanipulación y microcirugía

Answer 24

Micromanipuladores reducen la amplitud de los movimientos, Se puede hacer microdisección

Question 25

Centrifugación

Answer 25

Separación de componentes estructurales y ultraestructurales de células

Question 26

¿En qué consiste la centrifugación?

Answer 26

Fraccionar las células -> émbolo dentro de tubo de vidrio-> rompe la membrana y libera el contenido -> centrifugaciones sucesivas +300 fuerza de gravedad

Question 27

Centrifugación isopícnica

Answer 27

Separa las partículas en un gradiente de densidades
Particulas de similar tamaño pero diferente densidadb(ac nuc)
-cloruro de cesio

Question 28

Centrifugación zonal

Answer 28

Las partículas se mueven a velocidades que dependen de la masa y sedimentan en diferentes zonas del gradiente