Técnica histológica Flashcards
Serie de pasos llevados a cabo desde la obtención hasta la tinción que pemita observar las características de un tejido
Técnica histológica
Pasos de la técnica histológica
Obtención
Fijación
Lavado
Deshidratación
Aclaramiento
Inclusión
Corte
Montaje
Tinción
Etiquetado
Paso que consiste en adquirir la muestra.
Si proviene de un organismo vivo: biopsia
Si proviene de un cadáver: necropsia
Obtención
En este paso se añade comúnmente formol para conservar la estructura del tejido en los siguientes pasos
Fijación
Ventajas de la fijación
- Detiene el metabolismo celular
-Impide degradación enzimática (autolisis)
-Elimina microorganismos patógenos
-Endurece el tejido (resultado de la formación de enlaces cruzados)
Se realiza con el fin de eliminar exceso de formol
Lavado
Se pasa la muestra a una serie de disoluciones de alcohol con concentración creciente hasta 100%, con el fin de remover el agua
Deshidratación
Se utilizan solventes como xileno y tolueno miscibles en alcohol y parafina
Aclaramiento
Se aplica parafina con el fin de mantener una consistencia firme para hacer cortes sin que se distorsione la imagen del tejido y, por último, permitir el paso de la luz para ser observado en el microscopio óptico
Inclusión
Se utiliza un microtomo para hacer cortes de 3-5 micras
Corte
Los cortes obtenidos se montan sobre un portaobjetos utilizando un medio de montaje como adhesivo, manteniendo la muestra unida al vidrio e inhibiendo el deterioro
Montaje
Los medios de montaje pueden ser:
No acuosos
De base acuosa
Los medios de montajes no acuosos normalmente usados son:
Resinas sintéticas basadas en tolueno (Permount), bálsamo de Cánada
Los medios de base acuosa comúnmente son a base de
Glicerol y gelatina
Paso en el que se tiñe con el fin de visualizar las características del tejido
Tinción