Technique Culture Flashcards
Pour avoir une bonne culture cellulaire il faut donner un env. in vivo aussi proche de celui qu’elle avait in vitro
FAUX!
Il faut donner un env. in vitro aussi proche de celui qu’elle avait IN VIVO
Il faut:
- apporter des elements nutritifs
- maintenir les conditions physico chimiques(ph et osmolarité)
- apporter des facteurs de prolifération
VRAI!
Le milieux de culture stérile contient?
- des constituants minéraux
- des substances énergétiques (glucose)
- des AA
- des vitamines
On rajoute rarement du sérum au milieux de culture
FAUX!
On rajoute tres souvent du serum a 10 ou 20%
Serum SVF
Le serum est important pour la division cellulaire il apporte…?
- des hormones
- des vitamines
- facteurs de croissance
- de la fibronectine (favorise l’adherence des cellules au support)
Le sérum a une composition exacte définie
FAUX!
Le serum a une compo exacte non definie (inconvénient)
La variabilité du serum est forte d’un fournisseur a l’autre (inconvénient)
Le milieu synthétique non definie est un milieu de culture de base associé a du serum
VRAI!
Le milieu synthétique definie contient?
- culture de base sans sérum
- facteurs de croissance
- transferrine (fer)
- albumine (transport AG)
- fibronectine ou collagene (attachement)
Le PH doit etre inferieur a 7
FAUX !
Le PH doit etre compris entre 7,2 et 7,4
Le bicarbonate est un système tampon
VRAI!
Il va alcaliniser le milieux
Pour le bon developpement des cellules en culture il faut mieux une température assez basse
FAUX!
Il faut une température autour de 38 degres
Une cuve remplie d’eau sature l’athmosphere en eau et favorise l’évaporation excessive des milieux de culture qui modifieraient l’osmolarité de ces milieux
FAUX!
Eviter l’evaporation excessive
A quoi sert le fractionnement cellulaire ou tissulaire?
- désorganiser les organites des tissus ou cellules isolées
- isoler les organites ou autres structures
- il faut preserver la fonction des organites
L’homogénéisation consiste a isoler les organites sous forme pure
FAUX !
C’est l’isolement
Car l’homogénéisation sert a briser les tissus ou les cellules de façon a liberer les organites
L’homogénat est seulement constitué du matériel brisé
FAUX!
Il est egalement constitué du liquide d’homogénéisation
Les fragments des mb issus de l’homogénéisation ne se recollent pas
FAUX!
Les mb des organites vont subir une rupture en fragments mais ils se recollent pour former des vésicules closes ou microsomes (RE et GOLGI)
Lors de l’homogénéisation la mb du noyau et des mitochondries ne se rompt pas
VRAI!!
Seuls la MP, celle du RE et de l’appareil de golgi se romptent
Le broyage est une technique mécanique d’homogénéisation
VRAI! Technique tres utilisée 2 systemes: -homogénéisateurs (tissus et cellules isolées) -broyeur (que les tissus)
Le potter est un homogénéiseur qui est constitué d’une tige et d’une eprouvette en verre
FAUX!
Il est constitué d’une eprouvette en verre et d’une tige en métal
Le Dounce n’a pas de tige en métal
Le polytron est un exemple de broyeur
VRAI!
C’est une methode plus destructrice pour les organites que les homogénéiseurs
La sonication est uniquement utilisée pour les cellules isolées
VRAI!
Ultrasons qui provoquent la lyse des cellules
Inconvénient: echauffement important
Le choc osmotique est une technique chimique d’homogénéisation
VRAI !
Valable uniquement pour les cellules isolées
Endommage les organites
Eau qui fait eclater les cellules
Les lipases, les protéases et les glucanases sont des enz utilisés dans les techniques chimiques ou enzymatiques
VRAI
L’aprotinine et la leupeptine sont des antiprotéases
VRAI!
Permettent de proteger les organites contre les enzymes lithiques
L’isolement des cellules comprend 3 étapes
FAUX!
Pas toujours, pour les cellules déjà en suspension il n’y a pas d’étape de dissociation
L’homogénéisation peut également rompre l’enveloppe nucléaire
FAUX!
Dans les lignées cellulaires, les caractéristiques du type cellulaire sont perdus tout au long de la culture
FAUX!
Les caractéristiques sont maintenues
Les lignées cellulaires continues ont des caractéristiques se rapprochant des cellules tumorales
VRAI
La cytométrie en flux et le piégeage par billes magnétiques sont deux techniques de séparation des cellules
VRAI
La trypsine peut être utilisée pour réaliser des subcultures
VRAI!
Pour les repiquages soit on utilise de la trypsine ou sinon on réalise un grattage
La centrifugation en gradient de densité est moins précise que la centrifugation différentielle
FAUX!
Plus précise
Le broyage est une technique de dissociation
FAUX
C’est une technique d’homogénéisation
