TD Flashcards
quel est le rôle de l electrophorese ?
technique de séparation et caractérisation de certaines molecules
dans quel domaine l electrophorese est elle utilisée ?
biochimie ou biologie moleculaire
comment se fait la separation des molecules ?
en fonction de leur taille et de leur charge
formule de la force électrostatique
F= qE
que se passe t il si on augmente l intensité d un champs électrique ?
force et charge augmentent
formule de force de frottement pour une sphère ?
Ff= 6πnvr
que se passe t il si la taille de la particule augmente ?
force de frottement augmente aussi et viscosité
dnas e champ électrique, y a t il une force de. gravitation ?
oui, mais négligeable
formule de la viscosité ?
v= Felectrostatique / Ff
pourquoi la formule de la viscosité est elle approximative ?
biomolecule n est pas une sphère, viscosité peu définie, taille des ions difficile a prédire
une petite molecule ira t elle plus vite qu une grande ?
OUI
quelles sont les differentes matrices utilisées?
acetate de cellulose
gel d amidon
gel d agarose–> très utilisé
acrylamide–> le plus utilisé
qu est ce que le point isoélectrique ?
correspond au pH auquel une protéine possède autant de charge + que -
–> neutres
les proteines continuent elles de migrer une fois le point isoélectrique atteint ?
NON
deux proteines avec des mêmes aa peuvent elles avoir des point isoélectrique différents ?
OUI, car la proteine peut se modifier différemment apres la traduction –> modifications rarement neutres
l electrophorese permet elle de détecter des proteines a formes et charges differentes ?
oui
qu est ce que l electrophorese SDS-PAGE?
technique qui consiste a faire migrer des proteines dans un gel sous l influence d un champ électrique –> séparation des proteines selon leur tailles
quelle est l autre utilisation du SDS?
detergent –> casse et dénaturé les liaisons non covalences des proteines et les solubilise
comment varie la charge des protéines sous l effet du SDS?
tres négative car dénaturant
peut on ajouter du SDS avec separation par focalisation isoélectrique ?
non car pas de liaisons covalentes avec les propriétés
que se passe t il en cas d ajout de SDS?
proteine plus soluble et change sa charge nette
–> n aide pas a la separation isoélectrique
application clinique de l electrophorese ?
detection de mutations en comparant aux autres personnes