TA 7.3 : Généralités Sur Les Techniques Electrophoretique Flashcards
définition de l’electrophorese
l’electrophorese est une méthode de séparation (fractionnement) et d’analyse (identification et dosage) de molécules sous forme de particules charger suite à leurs migration différentielle sous l’action d’un champs électrique
comment s’appelle une technique électrophorétique qui sépare les ions de petite taille
Ionophorèse
comment s’appelle une technique électrophorétique qui sépare les molécule neutre chargé artificiellement
Cataphorèse
quel est l’intérêt de l’electrophorese ?
but analytique
purification
une particule placer dans un milieu liquide est soumis à deux force, les quel ?
force de sédimentation
force de friction
quesque Fe
Force exercé par le champs électrique
Fe = qE
=> q = charge net de la molécule (=z)
=> E = champ électrique
quesque Ff ?
Ff : force de friction, qui s’oppose au déplacement de la particule chargé vers la cathode
Ff= = -fv (v vitesse de la pticule et f = coefficient de friction)
quesque µ ?
ces la mobilité électrophorétique ces la vitesse de migration de la particule, rapporter à la valeur du champ électrique
µ = v/E
v en cm/s
E en V/cm
Comment est la distance parcouru par la particule par rapport à sa charge
La distance parcouru par la particule charger est proportionnel à sa charge
Comment est la distance parcouru par la particule par rapport à sa taille
La distance parcouru par la particule charger est inversement proportionnel à sa taille
Quesque le courant d’électroendosmose (ou endosmose)?
courant liquidien, lié a la nature de certain support.
se courant accélère ou ralentit la migration des molécules en fonction de leur sens de migration des molécules en fonction de leur sens de migration (peut déplacer des molécule non charger)
-peut même les entrainer dans le sens opposer a celui attendue
courant n’égligeable avec le gel de polyacrilamide
Quesque le courant d’évaporation ou rhéophorèse?
l’eau sévapore et établit un courant liquidien des extremités vers le centre
Quesque le courant d’électrolyse ?
ces la décharge ionique aux électrodes (il faut donc penser à changer le tampon si les électrophorèse son longue)
quel sont les différente électrophorese classique?
- sur papier et acétate de cellulose
- sur gel poreux (polyacrylamide, gel d’agarose)
- isoélectrification = IEF
- bidimentionnelle
Quel sont les application de l’électrophorèse sur papier et sur acétate de cellulose?
Papier: séparation aa et prot
acétate de cellulose : sépration de protéine sérique
Application d’électrophorèse en gel de polyacrylamide ?
sépre les prot et AN de petite taille
Application d’électrophorèse en gel d’agarose ?
sépare plutot aux AN
Application de l’isoélectrofocalisation (IEF)?
séparation des protéine
définition de l’isoélectrofocalisation (IEF)?
méthode de séparation de protéine en foction de leurs point isoélectrique
Quesque le point isoionique?
pH auquel la charge nette de la molécule est nulle quand elle est dissoute dans l’EAU PURE
Quesque le point isoélectrique?
pH auquel la charge nette de la molécule ayant fixé des ions étranger est nulle ( en solution SALINE)
Principe de l’IEF?
Gel avec un gradient de pH (grace à des ampholytes)
- l’échantillon de prot s’arrette lorsque le pH ou elle se trove = pI