semen

Question 1

que es la espermatologia forense ?

Answer 1

es una de las areas de la biologia forense que se ocupa del estudio de la morfologia y quimica del semen

Question 2

cual es la finalidad de la espermatologia forense

Answer 2

las finalidades son:
identificacion
casos de paternidad
deteccion de restos seminales (cuerpos u otros soportes)
el analisis de manchas y el liquido seminal pueden ser analizados en casos de probable ataque al pudor(violacion

Question 3

caracteristicas del liquido seminal

Answer 3

es lavable, soluble
es la enzima producto de las glandulassexuales (prostata)
tiene propiedades reproductivas

Question 4

caracteristicas de una mancha seminal

Answer 4

almidonadas, acartonadas con bordes irregualares
contiene: espermina, antigeno prostatico y acido citrico
se utiliza luz uv (lluz de wood ) para visualizarlas
la exposicion intensa y continua de dicha luz provoca una ruptura en la cadena de adn
da falsos positivos en el nylon
estas manchas y el liquido seminal pueden ser analizados en casos de probable ataque al pudor(violacion)

Question 5

toma de las muestras

Answer 5

por hisopado o macerado, con gasa en soporte tipo prenda o sillones( por transposicion) utilizando solucion fisiologica
no se recomienda para soportes porosos ejemplo : tierra, ladrillos , para estos se recomienda sacar la superficie o transportar el soporte.

Question 6

definicion de semen o liquido seminal

Answer 6

es el producto de la secrecion de las glandulas sexuales alcanzada la pubertad

Question 7

propiedades del liquido seminal

Answer 7

reproductivas
tiene capacidad de procular( coagular y volverse liquido )
puede ser amarillento( depende de la abstinencia), blanco o opalescente
el esperma tiene capacidad fecundante por 72 hs
contiene: espermina,colina,acido citrico,fructosa,cinc,fhtp,fht,psa

Question 8

transportes y tipos de superficies: importante

Answer 8

dado que los estudios de semen se realizan en base a presencia de espermatozoides es de suma importancia proteger las prendas que contengan a los mismos ya que la prescencia de completa de los mismos es la unica prueba irrefutable para determinar que sea semen por esta razon los articulos no deben enrollarse ni doblarse la parte manchada y no someterse a friccion
cuando hay cierta cantidad de agresores se le recoge directamente del soporte donde se encuentra (empleando pipetas o jeringas de cono grueso , la supervivencia del espermatozoide no supera las 48 hs de vida en el medio
es de vital importancia que ninguna prenda u otro tipo de soportes se remitan humedos al al laboratorio como tampoco bolsa de nylon ya que en ella se condensa humedad y la mancha se pudre .todas las evidencias deben estar correctamente cerradas y rotuladas indicando datos de la causa y elementos que contiene

Question 9

transportes y tipos de superficies:de la piel de la victima

Answer 9

una vez seca es muy facil de despegar de la piel a la mancha , esta forma una pelicula de consistencia similar a la plasticola por lo que se desprende cuidadosamente y se coloca en un porta objetos

Question 10

transportes y tipos de superficies: del cuerpo de la victima

Answer 10

en este caso las muestras se toman por hisopados( anal,vaginal,bucal,) lavados vaginales , exudados tanto vaginales como anales

Question 11

transportes y tipos de superficies: superficies absorbentes no transpotables

Answer 11

se realiza un hisopado, macerado stomando siempre un blanco de la superficie

Question 12

transportes y tipos de superficies: superficies absorbentes transportables

Answer 12

se las envia secas dentro de una bolsa de papel madera ejemplo , prendas pequeñas : la costra que forma el liquido seminal se desprende facilmente del soporte es por ello que este tipo de prendas, se transportan extendidas , prensada entre cartones , atada con hilos , para evitar dobleces
prendas grandes: las prendas de gran tamaño (la zona maculada no se corta en la medida que sea posible) tambien deben ser protegidas de la friccion prensada entre cartones enviandolas enteras sin enrrollarse.

Question 13

transportes y tipos de superficies: superficie no absorbente transportable

Answer 13

con la mancha seca se remite a al laboratorio en sobre papel madera o en el medio de trasnporte adecuado dependiendo del tamalo

Question 14

transportes y tipos de superficies:superficies no absorbentes no transpotables

Answer 14

en este tipo de superficie se procede a raspar con una hoja de bisturi nueva, una pequeña cantidad de la mancha que se coloca en un porta objetos, si la superficie es porosa se extrae una pequeña area de la mancha con agua destilada. tambien se puede utilizar un papel secante con solucion fisiologica , dejar secar y embalar en sobre papel madera

Question 15

transportes y tipos de superficies:
preservativo y superficies problematicas

Answer 15

preservativo: se los debe anudar en el extremo y remitirlo al laboratorio, cabe aclarar que debido al espermicida que contiene los espermatozoides se mueren
superficies problematicas :
a continuacion numeraremos superficies que presentan un gran problema a la hora de determinar si hay presente liquido seminal
tierra: es muy absorbente y da falsos positivos con uv
agua: primero flacura y luego se disuelve en este estadio la luz uv no sirve
arena: mismo inconveniente que con la tierra
vegetacion: arroja falsos positivos con uv
goma :; tapizados y alfombras de auto
hierro: es peor si esta oxidado ,interfiere con la luz uv

Question 16

analisis pericial de la mancha :luz uv

Answer 16

cuando se deben examinar muchos materiales o extensas superficies es util la luz ultravioleta ( uv ), bajo la radiacion de estas, las manchas de semen presentan una fluorescencia amarillenta, que si bien no es especifica ya que hay otros materiales que producen el mismo efecto, es un recurso util existen luz uv que van de 254 hasta 356 nanometros. la fosforescencia de las manchas de semen es independiente a la presencia de espermatozoides . esta relacionada con los aminoacidos , tirosina ,y triptofano , componentes del liquido seminal

Question 17

pruebas de orientacion :

Answer 17

el extracto de la mancha unido a ciertos reacitvos produce la formacion de micro cristales originados por la colina ya la espermina que son productos d ela descomposicion del esperma , estos derivados faltan en el esperma fresco y muy antiguo con otras sustancias organicas como pus bilis etc se obtiene un resultado similar , estas pruebas no osn especificas y solo se utilizan como complemento de otras de mayor fidelidad

Question 18

metodos cristalograficos: reaccion de florence

Answer 18

esta reaccion es conocida desde el siglo pasado (1897)se basa en la formacion de cristales de yoduro de colina , la colina entra en la formacion normal del esperma , en forma fosforil-colina y de leciticina , para llevar a cabo esta reaccion se utiliza el reactivo de florence . cosntituido de la siguiente manera
yodo metalico —-2,54 gramos
yoduro de potasio——-1,56 gramos
agua destilada ——-30 mililitros
se extrae una pequeña parte de la mancha con agua destilada , se coloca una gota en el porta objetos y se lleva a sequedad a baño maria, se coloca un cubreobjetos sobre el residuo y se colocan una o dos gotas del reactivo en forma que por capilaridad corra entre porta y cubre hasta ponerse en contacto con dicho residuose deja en reposo unos minutos y se los observa en el microscopio, los cristales de yoduro de colina constituyen laminas romboidales de color pardo

Question 19

metodos cristalograficos: reaccion de barberio

Answer 19

data del 1905 se basa igual que la de florence el reactivo esta constituido por solucion saturada de acido pierico , la tecnica de reaccion es igual a la de florence se obtienen cristales fusiformesde color amarillo

Question 20

Valor criminalístico

Answer 20

Del minucioso estudio ordenado del semen o esperma, podrán
obtenerse conclusiones importantes para la investigación del hecho.
Surgirá así, si realmente hay semen en las muestras analizadas y si
dicho resto biológico es humano. Asimismo, se determinará si hubo
eyaculación interna y con ella penetración. El elemento fundamental en
la identificación de esta secreción está en el hallazgo del
espermatozoide,

Question 21

características en el humano son las
siguientes:

Answer 21

Cabeza: Es de forma ovoide vista de frente y piriforme de perfil;
mide de 4-5 micras de longitud. Contiene el núcleo haploide
cubierto por el acrosoma y un par de centriolos detrás del núcleo.
El acrosoma contiene enzimas como la hialuronidasa y la
acrosina que facilitan la penetración del espermatozoide al
ovocito.
1.1.2. El segmento intercalar: Región que une la cabeza con la cola y
que contiene la carga mitocondrial que provee la energía
necesaria (ATP) para la movilidad del espermatozoide. Es de
forma cilíndrica, mide 5 micras de longitud.
1.1.3. Cola: Da la movilidad al espermatozoide. Tiene una longitud de
40-50 micras de longitud.

Question 22

Composición química del esperma

Answer 22

La mayoría del líquido en el semen se compone de las secreciones de

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los órganos reproductivos masculinos. Contiene ácido cítrico,
aminoácidos libres, fructosa, enzimas, fosforilcolina, prostaglandina,
potasio y zinc (11).
46 al 80 % del líquido es producido por las vesículas seminales.
13 a 33 % por la glándula de la próstata.
5 % de los testículos y el epidídimo.
2-5 % de las glándulas uretrales y bulbouretrales.

Question 23

tecnicas de tinsion: gram

Answer 23

Tinción Gram: Desarrollada por el Doctor Gram en 1984, La es usada
para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaños,
morfologías celulares y reacción Gram (color). A nivel del laboratorio es
útil como test para un rápido diagnóstico presuntivo de agentes
infecciosos, tanto en muestras como en cultivos en crecimiento, y
adicionalmente sirve para valorar la calidad de la muestra clínica. Las
bacterias se tiñen Gram positivas (+), Gram negativas (–) o no se tiñen
debido a sus diferencias en la composición de su pared y arquitectura
celular (Rodríguez, E. et al,2005). Además, es una coloración muy útil
para el análisis de evidencia de espermatozoides. Involucra varios
pasos:
a. Tinción inicial: Las células se tiñen con cristal violeta, el cual es el
colorante primario. En este paso todas las células se tiñen de
morado.
b. Mordiente: Se adiciona yoduro (lugol) que reacciona con el cristal
violeta y forma un complejo cristal violeta-yoduro. En este punto todas
las células continúan de color morado.
c. Decoloración: Se adiciona un solvente no polar, el cual actúa lavando
el complejo cristal violeta-yoduro de las células Gram negativas. De
esta manera las bacterias Gram positivas continúan moradas y las
Gram negativas quedan incoloras. Este es el paso critico de esta

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tinción, pues si se exagera, decolora las Gram positivas y si se hace
muy débil no decolora a las Gram negativas.
d. Contra tinción: Se vuelve a teñir con safranina o fucsina, de manera
que las bacterias Gram negativas, que habían sido decoloradas, se
tiñen de rosado a fucsia según el colorante empleado; en tanto, las
bacterias Gram positivas no se afectan con la contra tinción y
permanecen moradas debido a lo intenso de esta coloración.

Question 24

tecnicas de tinsion: tinsion cristal violeta

Answer 24

En la forma pura, el violeta de cristal se
presenta como lustrosos cristales azul verdosos que funden a 137°
Celsius. Son solubles en agua, etanol, dietilenglicol, y dipropilenglicol.

Question 25

pruebas de certeza

Answer 25

Microscopía: Búsqueda de espermatozoides completos (cabeza y cola) y/o
espermatozoides incompletos (solo cabezas).
Transcurrido dos meses, se realizó el estudio de las muestras de manchas
de semen, en donde, cada muestra pura se tiñó mediante la coloración
Gram y Cristal violeta (usada actualmente en el laboratorio de Biología
Forense) para determinar la mejor técnica de tinción en la observación de
espermatozoides humanos. La técnica empleada fue la siguiente:
1. Se observa el aspecto de la mancha de semen impregnada en el soporte
(acartonado, películas brillantes, mapa geográfico, etc.).
2. Se corta la zona con restos de manchas de semen con una medida de
1.5 cm x 1.5 cm como máximo (depende de cada tipo de soporte).
3. Se embebe con suero fisiológico (1mL) y se deja macerar por
aproximadamente 20 minutos (depende del tipo de soporte) para
desprender el semen de la tela.
4. Se retira el retazo de tela del tubo de ensayo.
5. Centrifugamos a 2500 rpm por 3 minutos.
6. Eliminar el sobrenadante.
7. Extender el sedimento y fijarlo al calor.
8. Teñir con cristal violeta por 1 minuto, luego enjuagar la lámina con agua
corriente.
9. Secar al calor y observar al microscopio.
Procedimiento para la Tinción Gram:
 Colorear con cristal violeta por 1 minuto según la concentración de la
muestra obtenida (47 segundos si la mancha de semen está muy
concentrada).
 Enjuagar con agua corriente.
 Decantar con Lugol por 1 minuto.

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 Agregar alcohol acetona hasta que ya no escurra más líquido azul.
 Lavar con agua para quitar residuos el colorante y secar la lámina.
 Agregar safranina por 40 segundos.
 Enjuagar la lámina con agua y dejar secar.

Question 26

caracteristica tincion cristal violeta

Answer 26

 El núcleo de los espermatozoides se
colorea de color violeta intenso mientras
que el resto de la cabeza y la cola con un
violeta de menor intensidad.
 No hay una buena discriminación entre los
espermatozoides y las células epiteliales ya
que todo se tiñe de un solo color.
 No hay diferenciación de otros tipos de
células y/o bacterias.
 Rapidez de la técnica.
 Bajo costo por utilizar solo un reactivo.

Question 27

caracteristica tincion de gram

Answer 27

El núcleo de los espermatozoides se colorea
de color rosa-violeta intenso mientras que el
resto de la cabeza y la cola con un color
rosa de menor intensidad.
 Buena discriminación entre los
espermatozoides y las células epiteliales ya
que se tiñen de diferente color.
 Permite diferenciar otros tipos de células y/o
bacterias, sean Gram positivas o Gram
negativas.
 La técnica requiere más tiempo.
 Alto costo por utilizar cuatro reactivos como
Cristal violeta, Lugol, Alcohol acetona y
Safranina.