RT

Question 1

Mitose, 2 parties

Answer 1

Mitose : division nucléaire

Cytocinese: division cytoplasmique

Question 2

Etapes de la mitose

Answer 2

Pro-Meta-Ana-telo-cytocinese

Question 3

Meiose

Answer 3

Phase S - Meiose I (reductionnelle) - Meiose II (equationnelle)

Question 4

Le caryotype de fait en isolant les cellules en

Answer 4

Metaphase

Question 5

Type d’ARN

Answer 5

t : transport = 16 %

r: ribo = 82 %

Question 6

Convention de lecture des acides nucléiques

Answer 6

5’ - 3’
Phosphate en 5
OH en 3

Question 7

Etapes de la réplication de l’ADN

Answer 7

1- Recherche de l’origine (1 seule chez pro, plusieurs chez Eu)
2-Initiation :Topoisomerase (empeche emmelement) , Helicase (deroule double helice et separe double brin), proteine SSB (embeche 2 brins de se reappatrier)
3-Replication, construit nouveau brin 5’-3’ (donc de 3’ a 5 du brin matrice)

Question 8

Brin avance / retardé

Answer 8

retardé = fragments d’okazaki

Question 9

Structure gène eucaryote

Answer 9

1 - Region codante Exon
2- Regions non codantes Introns
3-Regions regulatrices de l’expression d’un gène

Question 10

Transcription d’un gène, definition

Answer 10

Mecanisme permettant la synthèse de l’ARNm, c’est donc la production d’une molécule d’ARN à partir de l’ADN d’un gène.

Question 11

le promoteur est

Answer 11

Une sequence sur laquelle se fixe l’ARN polymérase

Question 12

Etapes de la transcription de l’ARN

Answer 12

Dans le sens 5’-3’ (donc de 3’ a 5 ‘ de la matrice)

L’ARNm est donc identique au brin codant et complémentaire au brin matrice

Question 13

Codons d’initiation et de terminaison (stop) de la synthese des proteines

Answer 13

Initiation : AUG
Stop : AUG
UAA
UAG

Question 14

Spectro, concentration d’ADN a

Answer 14

260nm

Proteines 280nm

Question 15

Absorbance pour dosage ADN spectro

Answer 15

Absorbance de 1 = 50ug/mL ADN double

Donc ex. solution diluée 1/40 , absorbance de 0.3

0.3x40x50=600ug/mL

Question 16

Absorbance pour dosage ARN spectro

Answer 16

Absorbance de 1 = 40ug/mL ARN simple

Question 17

Ratio 260/280

Answer 17

permet d’évaluer la propreté
Ratio petit = contaminé

Selon méthode Dnazol on veut entre 1.4 et 2.0
Methode Phenol/chloro on veut entre 1.8 et 2.0

SI >= à 2 = contaminé à l’ARN
Ajouter de la RNAse A à la solution

Question 18

Etapes de la PCR

Answer 18

Denaturation (chaleur pour séparer)-Hybridation(Temperature 5degre au dessous du TM de l’amorphe ayant le Tm le plus bas)-Élongation(Taq synthetise brin de l’amorce, ad bout du brin)

Question 19

PCR-RFLP

Answer 19

Met en évidence une portion d’un gene porteur d’une mutation d’une base. Mutations génétiques (CF, hémochromatose)

Question 20

PCR temps réel

Answer 20

Temps réel
minimum 3 amorces
Quencher
Fluorescence
Utile pour determiner charge virale ou bacterienne
Suivi
Peut identifier mutation (COmme RFLP) mais plus rapidement.

Question 21

RT-PCR (RT=Reverse transcription)

Answer 21

Permet de faire PCR a partir de l’ARNm, donc mesuré a partir de l’expression des gènes.

Question 22

FISH

Answer 22

Fluo in situ hybridation
A l int de la cellule en metaphase
Sonde marquée d’un fluorochrome

Question 23

Blot

Answer 23

Western: Transfert proteine
Southern: ADN
Northern: ARN
Eastern: lipid