Révision Exam 1 Flashcards
1 ppm = ?
1mg soluté / 1L soln
molarité = ?
moles soluté / L soln
Qu’est-ce que le PBS?
Tampon salin
Pourquoi est-il utile de préparer une solution plus concentrée que celle utilisée?
Pour diluer en plus petits volumes après
Quel volume de PBS 8X dois-je mettre dans quel volume d’eau pour obtenir un litre de solution 1X
125 mL
C1 = 8X
V1 = ?
C2 = 1X
V2 = 1000 mL
8X x ? = 1X x 1000mL
x = 125 mL
Si on veut pipeter un volume plus petit que 1uL, qu’est-il préférable de faire?
Une dilution de la solution pour pouvoir pipeter un volume plus grand
Si je veux pipetter 20uL, quelle pipette dois-je utiliser? Pourquoi?
P20, c’est plus précis de pipeter un volume plus proche de la limite maximale de la pipette
Si je veux pipetter 819uL, quelle pipette dois-je utiliser? Pourquoi?
P1000, puisque le volume se trouve entre 200uL et 1000uL
Si je veux pipetter 12uL, quelle pipette dois-je utiliser? Pourquoi?
P20, puisque le volume se trouve entre 2uL et 20uL
Quelle est l’utilité du dosage de molécules?
Pour mesurer l’état de santé (ex.: doser le glucose pour déterminer le taux de glycémie)
Quel est le taux de glycémie normal?
0,74 g/L à 1,06 g/L
4,04 mmol/L à 5,83 mmol/L
Comment se nomme la mesure du glucose dans l’urine?
Glycosurie
Quelle est la technique de dosage utilisée pour mesurer le glucose dans l’urine?
Technique basée sur l’activité de l’hexokinase
1. Glucose phosphorylé en G6P, rx catalysé par l’hexokinase (glucose + ATP –> G6P + ADP)
2. G6P oxydé en 6-phosphogluconate, rx catalysé par G6PDH (G6P + NAD –> 6-phosphogluconate + NADH)
3. C’est le NADH qu’on dose
Qu’obtient-on après le dosage avec l’hexokinase?
NADH ∝ glucose initial
Augmentation d’absorbance ∝ glucose initial
Comment est-il possible de déterminer la quantité de NADH dans une réaction?
Car le NADH absorbe la lumière à 340nM, mais pas le NAD
Que représente ε ?
Coefficient d’extinction molaire, la capacité à absorber la lumière
Que représente une trop grosse quantité de protéine dans l’urine?
Protéinurie (> 50mg/L) (élimination de plus de 150mg sur 24h)
ou
Albuminurie (protéine la plus présente dans l’urine
Que représente une trop grosse quantité de protéines dans le sang?
Hyperprotéinémie
Que représente une trop petite quantité de protéines dans le sang?
Hypoprotéinémie
Que doit-on faire si les protéines ne sont pas en circulation ou n’ont pas été excrétées?
Il faut extraire les protéines des tissus (pour un meilleur diagnostic et traitement)
Comment mesure-t-on la présence d’une protéine dans une cellule?
- Il faut libérer le contenu de la cellule avec un tampon de lyse RIPA buffer
- Quand protéines sont en solution, il faut les doser pour comparer les échantillons sur la base de quantités équivalentes de protéines totales
Qu’est-ce que le tampon RIPA buffer?
- Tampon de lyse
- Contenant du SDS, sodium deoxycholate et NP-40 (détergent)
- Permet la destruction des membranes plasmiques et nucléaires
- Permet la solubilisation des protéines transmembranaires et cytosoliques
Comment mesure-t-on la présence des protéines existantes (après les avoir isolées)? (Technique et kit)
- Folin-Lowry modifiée = combine 2 réactions chimiques qui génère une coloration et permettra d’évaluer la concentration de protéine de l’échantillon
- Kit: DC Protein Assay = méthode de dosage colorimétrique qui permet l’évaluation des concentrations protéiques suivant une solubilisation dans un détergent (95% couleur maximale en 15 minutes, décroît de moins de 10% en 2h) (permet lier ions cuivre avec protéines en conditions basiques = réaction de biuret)
