Replicação; PCR

Question 1

Quais são os tipos de replicação?

Answer 1

Modelo theta (procariontes)
Circulo-rolante (plasmideos e virus)
Linear (eucariotos)

Question 2

Como é a replicação do modelo theta?

Answer 2

Se inicia em uma origem de replicação, com abertura da dupla fita formando uma bolha de replicação e formando duas forquilhas de replicação (uma para cada lado da bolha), elas vão replicando as duas fitas nos dois sentidos até formar duas duplas fitas

Question 3

O que fazem as proteinas iniciadoras e um exemplo delas

Answer 3

DNA A: reconhecem a origem e abrem a dupla fita em sítios específicos

Question 4

O que faz o DNA B?

Answer 4

É uma helicase que abre a hélice na forquilha de replicação

Question 5

O que faz o DNA G?

Answer 5

É uma primase. Adicionam os primers, que são os primeiros nucleotideos de rna da replicação e a partir do primer a DNA polimerase vai polimerizando a fita, adicionando nucleotídeos na fita complementar

Question 6

O que faz a DNA girase?

Answer 6

Gira o dna diminuindo a tensão da dupla fita gerada pela dna helicase

Question 7

O que são as SSDs?

Answer 7

Proteínas ligadora de fita simples. Evita que bases complementares se liguem antes que ocorra a replicação da fita que está aberta

Question 8

O que é a fita líder?

Answer 8

É a fita que esta sendo formada no sentido da abertura da forquilha

Question 9

O que é a fita tardia?

Answer 9

Fita sendo formada no sentido contrário da forquilha. Ocorre em fragmentos: fragmentos de okazaki (esse fragmentos são ligados pela ligase)

Question 10

Quais enzimas tem atividade revisora?

Answer 10

Dna polimerase 1 e 3

Question 11

Qual dna polimerase é responsavel pelo alongamento do dna e qual e responsável por colocar ou tirar primers?

Answer 11

Alongamento: 3
Colocar ou tirar primers: 1

Question 12

O que o Ciprofloxacino faz no organismo?

Answer 12

Ciprofloxacino atua impedindo a ação da girase, bactérias não conseguem replicar o dna e consequentemente não conseguem se proliferar

Question 13

O que fazem as DNA polimerases?

Answer 13

Catalisam as reações de alongamento de cadeia. Primer é colocado, após isso a dna polimerase polimeriza até o próximo fragmento (nas fitas tardias). Nas fitas contínuas há apenas a polimerização

Question 14

Quais são as dna polimerases de eucariontes?

Answer 14

Alfa: inicio da síntese de DNA nuclear, tem atividade de primase
Delta: síntese de filamentos lagging dna nuclear
Epsilon: síntese de filamento leading

Question 15

Os telomeros são responsáveis pelo que?

Answer 15

Dão estabilidade aos cromossomos e impedem a degradação do dna

Question 16

Porque a cada ciclo de replicação o dna diminuiria de tamanho?

Answer 16

Porque a fita tardia não tem espaço para colocar um primer de polimerização no sentido contrário à abertura da forquilha

Question 17

O que faz a dna telomerase?

Answer 17

Ela possui um molde em rna da sequência complementar à sequência consenso (cada espécie tem a seu tipo de sequência repetitiva). Elas reconhecem as sequências consenso livres dos telomeros e ela se liga e completa e alonga a fita molde da fita tardia, abrindo espaço para a primase adicionar um primer e a partir dele ocorrer a polimerização do trecho final que não foi replicado

Question 18

O que acontece quando o telômero é replicado?

Answer 18

Eles formam uma alça: há a abertura de um trecho do telômero e ocorre a invasão de uma extremidade 3’ em uma região telomerica de dupla fita. Essa abertura é feita por uma helicase TRF1 e depois proteínas se ligam ao TRF1 para revestir os telômeros

Question 19

Quais são os requisitos do processo de replicação do dna?

Answer 19

1. Um molde de DNA unifilamentar
2. Matéria prima para a síntese do novo filamento de DNA (nucleotideos)
3. Enzimas e outras proteínas que leem o molde e sintetizam a nova fita a partir da informação contida no molde

Question 20

O que é o PCR?

Answer 20

Reação em cadeia da polimerase (PCR). É uma replicação in vitro

Question 21

Quais são os componentes do PCR?

Answer 21

Dna, primers, nucleotideos, taq polimerases (de termobacterias), termociclador (modifica a temperatura interna por tempos pré estabelecidos)

Question 22

Quais são os processos do PCR?

Answer 22

1. Desnaturação para a dupla fita do dna se separar
2. Anelamento. Para que os primers reconheçam a sequência complementar no molde e ocorra o pareamento dos primers
3. Atuação das taq polimerases para reconhecem os primers e alongar as fitas novas
4. Repete o ciclo

Question 23

Qual é a diferença do PCR para o qPCR (PCR e tempo real)

Answer 23

Os primers que serão utilizados ou alguns nucleotideos podem ser marcados com fluorescência, dessa maneira, a medida for ocorrendo os ciclos de replicação, é possivel avaliar a fluorescência e avaliar e quantificar a fluorescência ao longo dos ciclos