Recepteurs couplés aux protéines G

Question 1

Quelle est la structure des RCPG?

Answer 1

glycoprotéine monomérique à 7 hélices transmembranaires

Question 2

Quelle est la structure de la protéine G trimérique ?

Answer 2

hétérodimère constitué de 3 sous unités : a, b, g liés à l’état inactif et b et g sont indisociable

Question 3

Quelle activité exprime la ssu a?

Answer 3

activité GTPasique qui hydrolyse le GTP

Question 4

Quelles sont les protéines G trimériques ?

Answer 4

Gi : réduit phosphorylation
Gs : accroit la phosphorylation
Gq : accroit phosphorylation et active les protéines liant le calcium
G12

Question 5

exemple RCPG?

Answer 5

R dopaminergique

Question 6

Comment peut-on doser l’AMPc endogène lors de l’activation du RCPG?

Answer 6

• ELISA
• FRET dont HTRF

Question 7

Que signifie HTRF? en quoi consiste cette technique ? A quoi faut il faire attention?

Answer 7

fluorescence homogène en temps résolu comme binding par compétitionc
consiste à mesurer la fluorescence émise par l’accepteur lorsqu’il n’y a pas de synthèse endogène d’AMPc. Signal HTRF inversement proportionell à la quantitié d’AMPc
Attention à choisir un donneur qui n’émet pas dans la même longueur d’onde que l’accepteur

Question 8

Dans HTRF a quoi est conjugue le donneur ? l’accepteur ?

Answer 8

• Ac anti-AMPc
• AMPc
• possibilité d’ajouter forskoline qui augmente prod AMPc lors d’étude des effets d’un antagoniste

Question 9

Comment fonctionne la voie de la phospholipase C?

Answer 9

1. synthèse IP3 par PLC lors de l’activation du RCPGq permettant le dosage d’IP1
2. augmentation [Ca2+]
3. activation PKC

Question 10

Comment peux-t-on doser l’IP lors de l’activation du RCPGq?

Answer 10

• FRET
• HTRF

Question 11

Comment MEE l’augmentation de [ca2+]?

Answer 11

sonde fluorescente sensible au Ca, telle que le fluo-4 qui chélate le calcium puis émet en vert

Question 12

Comment mesure-t-on la liaison du GTP à la protéine G, càd l’activation de la portéine G?

Answer 12

• FRET
• HTRF
  utilisation d’AC spécifique de Gi.

Question 13

comment s’appelle la technique ancienne permettant toutes les mesures lié à la protéine G?

Answer 13

radioisotopique

Question 14

Comment mesure-t-on l’activité GTPase?

Answer 14

• TR-FRET
• polarisation de d=fluorescence ou intensité de fluorescence

Question 15

Que permettent le mécanismes de régulation de l’activité du RCPG?

Answer 15

• controle durée de l’activation, évite effets éfaste
• ajuster l’intensité au stimulus chimique

Question 16

Quelles sont les mécanismes de régulation ?

Answer 16

• suppression du messager du milieu extracellulaire
• retour de la cellule à un état de repos
• découplage physique entre le R et la protéine G par phosphorylation des RCPG par protéine kinase

Question 17

Explique le découplage physique du R et la protéine G

Answer 17

1. phosphorylation du T activé par des GRK
2. recrutement des b- arrestines
3. interaction des b arrestines avec protéine cytosoliques permettant l’internalisation des R
   4.endocytose avec recyclage et dégradation des RCPG

Question 18

Combien de voies peuvent activés les agoniste du RCPG?

Answer 18

2
- voie dépendante protéine G
- voie indépendante protéine G

Question 19

Qu’est ce qu’un agoniste biaisé?

Answer 19

agoniste qui active RCPG mais n’active qu’une des 2 voies