Proteines Flashcards
En quoi consiste la méthode de biuret et lowry?
( biuret+ folin)
Ajout de ions Cu2+ lié à azote
Absorbant dans 540nm-550
Absorbance liaison peptidique
210nm
AA aromatique
Absorbance à 1mg de prot ?
A280 entre 0,5 et 2,0
Biuret sensibilité ?
Peu sensible
1 à 20 mg/l
BCA
Moins d’interférences avec le saccharose, TRIS, glycérol
Lowry et BCA sensibilité ?
x100 plus sensible ( 5à 10 microgramme/l)
Pk+ ou - unite de pH
90% et 10%
Pk 2 + unité de PH
99% et 1%
Pk+ ou - de PH
99,9% et 0,1
AA neutre Phi?
Phi=6
AA acide phi?
Et exception ? Quand pka
Phi=3
Et D et E
PHi pour AA basique ?
Et exception ?
- pkapkr
-pkapkr H. Phi=8
Lyophilisation
Sublimation de l’eau
PAS de purification
CONCENTRATION
Ultrafiltration
Filtration sous pression d’air à travers une mb, pores X de sels et tampon retenant macromolécules
PAS de purification
CONCENTRATION
Chromatographie
Séparation selon critères bioch
CONCENTRATION SELON TYPE ELUTION
PURIFICATION