Proteinas da Replicação 2.0/2.1/2.2 Flashcards
Defina DNA replicase
DNA replicase são DNA-polimerase que realiza a síntese das duas fitas novas de DNA.
Explique suscintamente como a DNA pol sintetiza de 5`-3´
Adicionando nucleotídeos trifosfatados na extremidade 3’-OH livre, sintetizando a fita no sentido 5’→3’
Oque é necessário para que a DNA polimerase faça a incorporação de bases ?
- Síntese prévia de pequenas sequências de ribonucleotídeos, denomina dos iniciadores (primers)
- Proteína primase / DNA-Pol 𝜶 sintetiza o primer nos eucariotos
Correlacione as DNA polimerases com suas respectivas funções
DNA Polimerases I (Familia A) ; DNA Polimerases III (Familia C)
- Replicação
DNA Polimerases II (Familia X) ; DNA Polimerases IV (Familia Y) e DNA Polimerases V (Familia Y)
- Reparação de Lesões no DNA
Cracteristica geral das DNA pol bacterianas
Fazem
- Polimerização - sintese 5´-3
- Exonuclease - remoção de nucleotídeos
Qual a importância da atividade de exonuclease(3´-5`) ? Qual seria sua principal função ?
- Permite que o processo de replicação feito pelas replicases ocorra livre de erro
- Sua principal função é reconhecer e clivar um pareamento incorreto na extremidade 3´-OH da fita nova
Como ocorre o processo de “correção de erro” na replicação de E.coli
- um nucleotídeo é adicionado na cadeia nova crescente pela atividade de polimerização da DNA-polimerase III, formando o pareamento das bases;
- a enzima anda uma base à frente para adicionar o próximo nucleotídeo de um novo pareamento;
- sendo o pareamento de bases anterior
- incorreto, a enzima fica impedida de continuar a polimerização e, movendo um nucleotídeo para trás, coloca-se em con- tato com o nucleotídeo que deve ser removido com a atividade de exonuclease 3’→5’;
- o nucleotídeo com pareamento de bases incorreto é removido e um novo nucleotídeo pode ser adicionado na região onde ocorreu a correção de erro
Quais as caracteristicas das exonucleases 5´-3´ presentes em algumas DNA Polimerases ?
Removem blocos de nucleotídeos (aproximadamente 10 nucleotídeos) de uma das fitas no sentido oposto ao da exonuclease de correção de erro.
O que pode acontecer se no DNA ocorrer uma quebra de ligação fosfodiéster (nick), ou há falta de alguns nucleotídeos (gap) ?
Podem acontecer …
- atividade de exonuclease 5’→3’ remove blocos de nucleotídeos no sentido 5’→3’, a partir da região alterada no DNA
- a atividade de polimerização sintetiza as regiões que foram removidas, originando uma fita nova de DNA nessa região
Principal diferença entre a replicação de E.coli e eucariotos.
Maior número de DNA - Polimerases envolvidas na replicação
Defina DNA-polimerase 𝜶
- Eucarioto
- Proteina complexa com capacidade de polimerização e primase
- Indicios q faz a sintese dos iniciadores nas 2 novas fitas de DNA (continua e descontinua)
Função da DNA Polimerase Delta 𝝳 (eucariotos)
O prosseguimento da fita continua
Quais são as proteinas, com funções especificas, necessárias para que aconteça o processo de replicação no replissomo ?
- Dna Polimerases
- Proteinas SSB
- Primases
- Ligase
- Topoisomerase
Função da helicase na replicação
- Quebra as pontes de hidrogênio entre as bases, separando as duas fitas de Dna.
- Sem a quebra, a forquilha não se movimenta
- Dna polimerase depende dessa “abertura” inicial para que possa replicar
Helicase DnaB
- Replissomo de E.coli
- Utiliza ATP p romper as ligações
- Movimenta-se 5´- 3´