prot G Flashcards
Conjunto de proteínas codificadas por el genoma
Proteoma
Estudio de la estructura y función de las proteínas
Proteómica
Análisis múltiple de genes de RNAs basado en la hibridación
Transcriptómica
En qué está basada la proteómica?
En la separación bidimensional de genes por punto isoeléctrico y PM
Se modifica un gen y al insertarlo hay recombinación con el mismo sitio del que se tomó
Recombinación homóloga
Técnica para la identificación de proteínas específicas mediante electroforesis
Western Blot
Moléculas extracelulares de señalización que se unen a receptores específicos (pej hormonas)
primeros mensajeros
La activación de receptores por primeros mensajeros da cambios conformacionales que involucran:
segundos mensajeros
Segundo mensajero más famoso
cAMP
Blanco de cAMP
PKA
Cambios que induce PKA
metabólicos
movilidad celular
sx de prot y TF
V/F
El receptor de insulina se autofosforila
Verdadero
Activa a 3 cinasas que fosforilan (activan) un TF que se traslada al núcleo
Vía de las MAPK
Ejemplo de GPCR
7 dominios TM, extremo amina hacia afuera y carboxilo intracelular
Rodopsina
Cómo se llama la prot G de la rodopsina?
Transducina
Segundo mensajero de la rodopsina
cGMP
Enzima efectora de GPCRs con subunidad alfa s
Adenilil ciclasa
Tipos de receptores de señales
GPCR receptores de citocinas RTK TGFbeta Hedgehog Wnt Notch
Receptores en citosol inactivos y estabilizados por chaperonas Hsp, al llegar el ligando se libera Hsp y R-ligando se trasloca al núcleo
Receptores de hormonas esteroideas
V/F
La unión específica del ligando es saturable
Verdadero
V/F
100% de los receptores deben estar saturados para obtener un efecto máximo
Falso
De qué depende la sensibilidad de un tejido a una hormona?
De su KD y el # de receptores en la célula
Qué significa que la concentración de ligando sea igual a la KD?
Que el 50% de los receptores están saturados
[RL]/RT=
1 / (1+(Kd/ [L])
Defecto en la expresión de calpaína lleva a
distrofia muscular tipo 2A
Cáncer de mama triple negativo
baja la fosfatasa de PTPN12 (tirosina fosfatasa de non receptor tipo 12)
Residuos de Tyr permanecen fosforilados, lo que mantiene un crecimiento/proliferación cel sostenidos
Qué hace GEF en los GPCRs?
Pone el GTP
GEF es guanine exchange factor
Cosito que elimina GTP (estimula GTPasa en GPCRs)
GAP (GTPase-activating protein)
Prot G monoméricas como Sar1, Ras, Ran, Rho, Rheb etc son estimuladas por
proteínas GAP
Mutaciones en uno de los genes de Ras-GAP causan
neurofibromatosis-1
Qué son las RGSs?
Estimuladoras de la actividad GTPasa
Segundos mensajeros
cAMP (producido x AC) cGMP (guanilato ciclasa) DAG e IP3 (PLC) Ca2 IP3 (1,4,5 trifosfato de inositol) PIP3 (3,4,5 trifosfato de fosfatidilinositol)
Cuántas asas internas del GPCR son sitio de unión de la prot G?
3
Cambio en la subunidad alfa de la prot G al activarse el receptor
intercambio GDP-GTP
se disocia de beta gamma
puede abrir canales, reclutar moléculas o favorecer la endocitosis de receptores
Otro receptor que activa la PLC
ETA (receptor de angiotensina y endotelina)
Con ACh la apertura del canal de K se debe a
subunidad beta gamma
Cómo se desactiva la subunidad alfa?
Por hidrólisis de GTP
Qué hace arrestina en receptores beta?
desactivación por fosforilación o endocitosis del receptor (?)
prot G a la que se une receptor alfa2 adr
Gi (inhibe adenilato ciclasa)
prot G a la que se une receptor beta2 adr
Gs (aumenta cAMP)
asas del receptor que definen con qué prot G interactuará
5-6
prot G a la que se une receptor alfa1 adr
Gq (activa PLC –> sube IP3 y DAG)
Proceso de desensibilización de los receptores
subunidad beta gamma interacciona con GRK o PKA, fosforilan R, propicia unión de beta arrestina, endocitosis
beta arrestina puede mandar señalizacón al núcleo por medio de:
Raf y ERK
blanco de la toxina del cólera, que induce ADP ribosilación en prot G e inhibe su actividad de GTPasa
Arginina 201
asociada a Hipertensión esencial en la prot Gi
Deleción en beta3
frecuentemente mutada en adenomas pituitarios
Arginina 201
Mutaciones en Gsalfa causan
sx de osteodistrofia (paterna por haploinsuf) y pseudohipoparatiroidismo (materna)
resistencia a PTH, TH, FSH y LH
(en tejs endocrinos gralmente se expresa la materna)
Mutaciones en transducina causan
Retinitis pigmentosa
Causa de la pubertad precoz con pseudohipoparatiroidismo
subunidad alfa se vuelve sensible a la temperatura
baja esteroidogénesis por mala movilización de colesterol a mitocondria –> alta producción de ACTH–> Gs (sx cAMP)
mutación en stAR
tipo de hiperplasia adrenal congenita lipoidea
Mutación inactivadora de CaSR da
Hipercalcemia hipocalciúrica (no funciona inhibicion de PTH por altas [Ca])
aumenta reabsorción renal de Ca en porción prox de riñón
Mutación activadora de CaSR da
Hipocalcemia-hipoparatiroidismo
disminuye secreción de PTH aún con niveles bajos de Ca
Situación en la que el mismo ligando causa desensibilización
Desensibilización homóloga
Otro receptor activa prot que desensibilizan receptores a distancia
Desensibilización heteróloga
subunidades efectoras que abren canal de K en receptores muscarínicos
beta y gamma (interaccionan con Gi)
Qué TF se activa por la fosforilación mediada por cAMP (atd PKA)?
CREB
CREB fosforilado va al núcleo e interacciona con CBP/P300, activan transcripción de genes
Qué hacen los AKAP
son prot fijadoras de PKA que crean puntos focales para la transducción de señales
Que produce fosfolipasa C?
DAG e IP3
Que produce fosfolipasa D?
PDAG (ácido fosfatídico)
Qué hace IP3?
actúa sobre receptores de REL y libera Ca
ACh en GPCRs de cels endoteliales vasculares
PLC-IP3-Ca calmodulina-NO sintasa-síntesis de citrulina y NO apd Arg y O2-RNO (GMP ciclasa en m liso)- PKG-relajación
Para qué sirven los canales STIM?
están en mb de RE, se unen con Orai1 en mb plasmática cuando no hay Ca en RE y permiten la entrada de éste desde el espacio EC
Desensibiliza rodopsina
Restina
está mutada en la amaurosis congénita de Leber
RPE65 isomerasa
Qué efecto tiene la transducina en la señalización?
Activa la fosfodiesterasa de GMPc (baja niveles de GMPc, necesario para mantener abiertos canales de Na y Ca)
Prots G de cels que perciben sabor dulce
Gs y Gq
ProtG de cels que perciben sabor amargo
Gustatina, acoplada a PLPCbeta
RTKs (receptores tirosina kinasa)
unión de ligando hace que se dimericen, hay actividad de tirosina cinasa cruzada (autofosforilación) lo que atrae prot con dominios SH2 o PTB
En receptores para factores de crecimiento
Dominios que se atraen como magnetos a cualquier prot con fosfotirosinas
SH2 o PTB (Asn-Pro-X-Tir)
Resultado de unión de Grb2 con un RTK
Grb2 interacciona con Sos que activa Ras con GTP
En receptor de insulina qué pasa?
se unen prot IRS, el receptor las fosforila y esto atrae otras prot como PIK3
Receptores para citokinas
atraen JAK kinasa que fosforila STATs que se dimerizan y traslocan a núcleo
Familia de receptores para EGF2
HER2 asociado a ca de mama (receptor con actividad de tirosina cinasa)
vías que se activan por el receptor para insulina (RTK)
vía PI3-K: Akt de mTOR fosforila 4EBP para dejar libre a eIF4E y que se una al cap p/ iniciar traducción
vía Ras: Mnk-1 fosforila a 4E y aumenta su afinidad por el cap
pasa de PI(4,5)P2 a PI(3,4,5)P3
PI3K
