Processo de estudo histopatologico Flashcards
Processo de análise de um tecido
Quais as etapas de preparação para o estudo histopatologico
Fixação, inclusão e coloração
O que ocorre na etapa de fixação
A peça é submergida a uma solução de formaldedio a 4 % ,ou glutaraldeido(24h) , fixadores , com a finalidade de evitar autoliese e endurecer o fragmento formando pontes com moléculas adjacentes
O que ocorre na etapa de inclusão
A peça é desidratada por concentrações crescentes de etanol 70% (1h)/80%(1h)/90%(1h)/100%(3h)
Depois e substituída por uma solução intermediária (solvente orgânico ) xilol ou toluol
Em seguida é posto em uma estufa parafina derretida a 56°C com o intuito de evaporar o solvente e endurecer a peça após a retirada da estufa
Qual a finalidade do processo de inclusão
Endurecer a peça para prepara-la para a microtomia
O que é a microtomia
É processo onde os blocos que contem o tecido são secionados por uma lâmina de aço ou vidro de modo a fornecer cortes de 1 a 10 micrometros
O que é o processo de coloração
Consiste no destacamento de certas partes do tecido por meio da adição de corantes, visto que estes em sua maioria são incolores
Quais os principais corantes ácidos e básicos
Básicos ( acidofilos) : azul de toluidina, azul de metileno e hematoxilina
Ácidos ( basofilos) : orange G , eosina e fuscina ácida
Qual a combinação mais comumente utilizada de corantes
(HE) hematoxilina e eosina , sendo a hematoxilina evidenciado em azul o núcleo de regiões do citoplasma ricas em RNA e matriz extracelular de cartilagem hialina . Já a eosina cora em rosa o citoplasma e o colágeno
O que não é visto em uma microscopia
O limite celular
Quais as maneiras de se evidenciar o limite celular
Utilizando contracorantes e fazendo uma impregnação pó metais
O que é feito antes da coloração
A peça é posta em uma superfície de água quente aquecida e posta depois sobre uma lâmina onde é aderida , após isso a peça é posta em uma estufa a 56 °C e é encaminhada para a coloração
Como tirar os excessos de hematoxilina e eosina
Hematoxilina - água
Eosina - álcool etílico
O que é feito após a coloração
A montagem , onde a peça, previamente clarificada com xilol e álcool, sofre adição de entelã/bálsamo do Canadá e 1 gota de resina
Quais as vantagens da fixação por congelação
É mais rápida, torna a peça rígida para ser seccionada pelo crisrtomicrotomo , não desidrata e nem desnatura as proteínas, além de não dissolver os lipídios no solvente orgânico
