Preparo De Amostra Flashcards
Quais são os três principais tipos de preparação de amostra?
Desproteinação, extração liquido-liquido e extração em fase sólida.
Qual o tipo de amostragem utilizada para a desproteinação?
Sangue.
Quais as formas de realizar a desproteinação?
Através de temperaturas elevadas, alteração de pH, agentes orgânicos de precipitação e enzimas proteoliticas.
Quais os solventes orgânicos utilizados na desproteinação?
Metanol, acetonitrila e TCA.
Qual a amostra utilizada na extração liquido-liquido?
Urina.
Quais são os passos para a realização da extração liquido-liquido?
Colocar a urina no funil de decantação, ajustar o pH, adicionar NaCl, adicionar o solvente, filtrar o solvente em Na2SO4 e evaporar o solvente.
Qual a necessidade de ajustar o pH na extração liquido-liquido?
O analito de interesse precisa estar na sua forma não-ionizada. Dessa forma, analitos ácidos devem ser colocados em pH ácido, e analitos básicos devem estar em pH básico. Assim, o analito se acoplará no solvente apolar, separando-se da água da urina que será descartada.
Por que adiciona-se NaCl na extração liquido-liquido?
Para realizar o salting-out, ou seja, os analitos estão solvatados na água da urina, com a adição do sal, ele se separa e acopla-se no solvente apolar.
Qual a necessidade do solvente?
O solvente será apolar, a agua polar e o analito deverá ser apolar. Assim, o solvente irá separar o analito de interesse da porção polar da amostra.
Qual a necessidade da adição de Na2S04 na extração liquido-liquido?
O Na2S04 é dessecante, ou seja, auxilia na evaporação do solvente.
Por que realiza-se a evaporação do solvente no final da analise de extração liquido-liquido?
Para que o analito volte a concentração anterior.
Como é realizado a extração de fase sólida?
Utiliza-se diversos extratores colocados em seringas, juntamente com a amostra, que irão retirar impurezas da amostra. Realiza-se em cuba à vácuo.
Quais são as hidrólises de conjugados?
Enzimática, ácida e alcalina.
