Preparaciones de tinciones Flashcards
primer paso
fijacion
para que sirve la fijacion?
conserva la estructura
previene la degradacion enzimatica
detiene metabolismo celular
endurece tejido
mata a patogenos
segundo paso
deshidratacion y aclarado:
deshidratacion: baños de alcohol al 50% hasta llegar al 100 poco a poco
aclarado: xileno mezclado con alcohol y parafina fundida
el xileno hace que el tejido sea transparente
para que sirve la parafina.
permite su corte
tercer paso
inclusion: se coloca el tejido en parafina fundida hasta que queda todo infiltrado, luego se introduce en un pequeño recipiente recubierto con parafina y se deja introducir
en que microscopia necesitan hidrogeles que provoca la expansion fisica
MEx: microscopia de expansion
que fijadores se ocupan en un MET (microscopio electronico de transmision)
glutaraldehido y tetroxido de osmio
que metodos de inclusion se ocupa para un MET
resinas plasticas y epoxicas
que tinciones se ocupan para un MET
metales pesados
que es la eosina?
colorante acido, color rosa, con cagra neta negativa, reacciona con cuerpos cationicos positivos y en particular con los grupos amino de las proteinas
que es la hematoxilina?
colorante base, color azul, carga negativa positiva, reacciona con grupos fosfato ionizados
que es la PAS (acido peryodico de Schiff)
tiñe hidratos de carbono y moleculas con hidratos de carbono, color purpura, muestra glucogeno y moco, asi como membranas basales y fibras reticulares
que es la inmunocitoquimica?
reaccion entre antigeno-anticuerpo, color fosfo o con particulas de oro
localiza antigeno diana en celulas y tejidos
que es la histoquimica y citoquimica?
union entre colorante con componente que muestre actividad enzimatica inherente
que es la hibridacion:
localiza al ARNm o ADN
que es la FISH, tecnica de hibridacion in situ con florescencia
colorantes combinados con sondas de nucleotidos
muy usada en pruebas geneticas
que es la autorradiografia
emulsion fotografica que se coloca sobre un corte histologico para localizar material radioactivo en tejidos
con que se fija:
con formalina que es formaaldehido al 37%
que hace el formaldehido en la fijacion
no altera estructura tridimensional, tiene pH de 7 y no reacciona con lipidos
tamaño de los cortes
5 a 15 umas
con que se aclara
xileno o tolueno
el tejido se tiñe con hematoxilina en que:
agua
que ve la hematoxilina sola
ADN nuclear y citoplasma
que ve la eosina sola
nucleo es menos visible ):
que no ve la HyE:
-elastina
-fibras reticulares
-membranas basales
-lipidos
cuales son las tinciones mas usadas
HyE, azul de metileno y acido peroydico de Schiff
en que paso se diluye el formol al 10%’
fijacion
cuales son los agentes mas habituales?
formol y solucion de bown
cual es el 4to paso
corte: con un microtomo se recorta el bloque para retirar material de inclusion, grosor de 5 a 10 mm y luego se coloca en un portaobjetos de vidrio
cual es el 5to paso
- en una estufa se retira la parafina
- se rehidrata el tejido
- se tiña
- se vuelve a deshidratar
5.se fija al porta objetos
