Práctica 1 Flashcards
¿Por que los acidos nucleicos se precipitan en presencia de alcohol y sal?
el ADN tiene carga negativa debido a sus grupos fosfato, cuando se añade sal, los iones de sodio con carga positiva son atraídos por las cargas negativas del ADN y neutralizan la carga. Esto permite que las moléculas de ADN se unan, y la adición de alcohol frío precipita el ADN debido a que es insoluble en altas concentraciones de sal y alcohol y forma unas hebras finas y blancas visibles
pasos para la extracción del ADN
- Lisis (se degrada la membrana biologica con detergentes y prpteinasa k y AL)
- precipitacion (con alcohol)
- purificacion
- lavado (AW1, AW2 y AE)
propiedades y caracteristicas del ADN
-pureza
- concentracion
- temperatura
- pH
- Cantidad
Para que sirve el kit de columnas?
para obtener ADN puro
Funcion de la proteinasa K
para el aislamiento de ácidos nucleicos ya que es capaz de degradar las proteínas e inactivar las DNasas y RNasas contaminantes presentes. también degrada las nucleasas que pueden estar presentes durante la extracción de ADN y protege a los ácidos nucleicos del ataque de estas.
Tecnicas que forman parte del diagnostico molecilar
- PCR
- Electroforesis en gel
- PCR cuantitativa
Espectofotómetro
instrumento con capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. esto permite obtener información sobre la naturaleza de la sustancia de la muestra y obtener la cantidad de sustancia de interes que está presente en la muestra.
Diferencia entre electroforesis vertical y horizontal de los Acidos nucleicos
- Horizontal: es de acuerdo el punto isoeléctrico y es la más utilizada para separar las moléculas de ADN
- vertical: es más utilizada para separar proteínas en geles de poliacrilamida
significado de AL
Solucion de lisis
significado de AE
solución de elución (libre de DNasas)
espectro de luz UV:
menor a 400 nm
espectro de luz UV en ADN
260-280 nm (pureza)
a que temperatura debe estar la proteinasa K para extraccion de ADN?
56°C
Diferencia entre plasma y suero
- Plasma: sangre completa , sin células. Se obtiene por centrifugación de la sangre. (tubo morado)
- Suero: sangre completa, menos celulas y sin factores de coagulación. Se obtiene por coagulación de la sangre. (tubo rojo)