PCR Εργαστηριο Flashcards
Εφαρμογές
Διάγνωση και χαρακτηρισμός νεοπλασιών
Διάγνωση και χαρακτηρισμός μολυσματικών ασθενειών
Προγεννητικό διάγνωση
Συστατικά
Ελάχιστη αρχική ποσότητα DNA 0,1-1μg
Taq DNA Pol 1
Ρυθμιστικό διάλυμα 8,5 με συμπαράγοντα Mg
dNTPs
Εκκινητής
ddH20
Θερμοκρασία πολτμεράσης
72
Τm
Παρόμοια για τους δύο εκκίνησης
4(G+C)+2(T+A)
Αγαρόζη 100
Υγρή
45 βαθμοί και κάτω
Δημιουργεί ένα πάτωμα με πόρους που επιτρέπει στερεοχημικά την ελεύθερη διέλευση βιομακρομορίων
Πότε πολυμερίζεται η αγαρόζη
Πότε είναι σε μορφή gel η αγαρόζη;
Μεγάλου μεγέθους DNA άρα C αγαρόζης
0.4 - 1.2τοις 100 w/v
Μικρού μεγέθους DNA
Μέχρι 2.5 τοις 100 w/v
Συστατικά δειγματος
Βρωμοφαινόλη
Γλυκερόλη
Βρωμιούχο αιθίδιο
EtBr
Ενσωμάτωση στη μεγάλη αύλακα
Απορροφά 250
Εκπέμπει 590 δλδ πορτοκαλί κόκκινο
Μη ειδικό προϊόν pcr
Μη ειδικοί εκκινητές
Μη εμπιστεύσου προϊόν pcr
Επιμήκυνση από προηγούμενα προϊόντα
ΜΜ
Μάρτυρας μεγέθους
DNA φάγουν μετά από κατάτμηση με περιοριστικό ένζυμο