PCR Flashcards
Cada ciclo de PCR é dividido em 3 fases:
Desnaturação, anelamento, extensão.
O que faz a desnaturação?
Conversão do DNA dupla fita em simples fita.
O que faz o anelamento?
Ligação dos primers às fitas complementares do DNA
O que faz a extensão?
Taq polimerase sintetiza uma fita complementar de DNA.
O que é o Buffer?
tampão que mantém o ph ótimo para a reação.
O que são os dNTP’s?
precursores das novas fitas de DNA específico. Adenina, citocina, guanina, timina.
Porque usamos DMSO em herpesvírus?
por causa da ligação de citocina e guanina, ligação tripla.
O que é o cloreto de magnésio?
é um cofator da enzima taq polimerase.
O que são os primers?
São os iniciadores, o ponto inicial para a síntese de DNA. Irão demarcar a região do DNA que deve ser amplificada.
O que é a taq polimerase?
Ela que vai ligar a adenina, citosina, guanina e timina. Ela usa o DNA de fita única como molde para a síntese de uma nova fita complementar.
O que faz a água?
Completa o volume final da reação.
Qual é a T° da desnaturação?
95°C
Qual é a T° do anelamento?
55°C
Qual é a T° da extensão?
72°C
Característica importante da pcr:
a dna polimerase pode ser direcionada par sintetizar uma região específica do dna.
