PCR Flashcards
en la PCR se requiere (4)
secuencia de DNA
Enzima DNA polimerasa
desoxirribonucleotidos (dNTP)
primers
los componentes para la PCR se pone en el ______ y ahí se hace
termociclador
la DNA polimerasa se encuentra de una bacteria que se encuentra en el geiser llamada
Taq (thermus aquaticus)
cofactor de la Taq polimerasa
cloruro de magnesio
el amortiguador es pH adecuado de __
8.4
los ________ son secuencias complementarias a la secuencia que busco
iniciadores
para la PCR tenemos dos iniciadores: (2)
forward
reverse
secuencia 3’ a 5’ es el iniciador
reverse
secuencia 5’ a 3’ es el iniciador ______
forward
los iniciadores son los ______
primers
los iniciadores teniendo primers tendrán muchas bases de (2)
citosina y guanina
pasos para hacer la PCR después de los iniciadores (3)
desnaturalización
hibridación
extensión
se abre la hélice del DNA para separarlas por medio de temperatura 95º c de 20 a 30 seg
desnaturalización
temperatura para desnaturalizar el DNA
95ºc
se usa temperatura de alineamiento o Tm para el paso de ________
hibridación
fórmula para calcular la Temp de alineación:
Tm = 4(G + C) +2 (A+T)
para la temperatura de alineamiento tenemos 2 y se utiliza la temp más ______
bajita
temperatura con la cual la Taq polimerasa puede empezar a poner nt
temperatura de extensión
Temperatura de extensión
72ºC
4 tipos de Desoxirribunucleótidos
dATP, dCTP, dGTP, dTTP
un sitio de PCR equivale a los (3) pasos
desnaturalización
hibridación
extensión
la PCR debe tener de _ a _ sitio entonces el proceso ocurre esas veces
30 a 40
Temperatura de hibridación es de __ a __ ºc
50 a 60
PCR significa
Reacción en Cadena de Polimerasa
tipo de PCR que dice si tiene o no el gen de lo que se está buscando, pero no dice cuánto
PCR PUNTO FINAL
PCR que puede buscar varios genes
PCR múltiple
tipo de PCR donde se utiliza una transcriptasa reversa para aislar RNA en vez de DNA
PCR transcriptasa reversa
PCR donde se pueden cuantificar los genes, se valora severidad en el momento ej. saber carga viral
PCR en tiempo real
la PCR _____ necesita colorantes
tiempo real
los tipos de colorantes que usa la PCR en tiempo real (2)
específicos y no específicos
colorante ____ que se unen a doble cadena en los primers
no específico
tipos de cuantificación en la PCR (2)
absoluta y relativa
cuantificación que da a conocer el número exacto de copias amplificadas del blanco, mide y cuantifica los genes
absoluta
con la cuantifcación absoluta puedes conocer la _____ de una persona
carga viral
cuantificación que evalúa los cambios en la expresión de genes en distintos estados fisiológicos
relativa
