Parte Practica Flashcards
Medio de cultivo CPG
Casaminoacidos 1g
Peptona (fuente de proteína)1 g
Glucosa(fuente de azúcar) 10 g
Agar 16 g
Reacción de RIU (KOH 3%)
Se mezcla el cultivo de bacteria con hidróxido de potasio y ver si hay reacción después de unos minutos
Resultados: gram + si hay viscosidad y se forma un hilo
Gram - si no hay viscosidad y no se forma hilo.
Crecimiento anaeróbico
En Medio de cultivo se coloca bacteria y se le pone una gota de aceite mineral estéril
+ amarilla, si crece y metabóliza oxígeno
- no cambia, no crece y no metaboliza oxígeno
Tincion de Gram
Se coloca agua destilada en porta objetos, luego la muestra de bacterias, se seca a la flama m, se le pone cristal violeta por 1 min, se decanta, se le agrega Lugo por 1 min, se decanta con alcohol, se le aplica safranina:
Color violeta = gram +
Color rosado-rojo= gram -
PRUEBA DE YDC
YDC = extracto de levadura, dextrosa y carbonato de calcio
Se coloca bacteria en tres puntos en medio de cultivo YDC
Las colonias de color amarillo: xanthomonas, pantoea, desarrollan mucha cápsula
Las colonias de color crema: pseudomonas, erwinia, agrobacterium, no desarrollan tanta cápsula
Prueba de BK
Bk= proteosa peptona No.3
Poner la bacteria en forma de carita y dejar 3 días y revisar a luz ultravioleta
Si fluorece: pseudomonas
Si no fluorece: siguen las pruebas
OXIDASA
Presencia o no de la enzima llamada citocromo oxidasa:
En una caja petri se coloca papel absorbente y se le añade una gota de la solución acuosa al 1% de N,N,N Trianina, después aquí se siembra una pequeña muestra de la bacteria, se observan los resultados después de 10 segundos
+ si el crecimiento bacteriano adquiere coloración sosa o roja
-si no presenta coloración
CATALASA
CATALASA: enzima que desdobla el peroxido de hidrógeno( agua oxigenada)
En un portaobjetos se pone una gota de agua oxigenada y se le agrega bacteria:
CATALASA + si hace burbujas
CATALASA - si no pasa nada
Hidrolisis de almidon
En un medio de cultivo con almidón se agrega bacteria en forma de carita, 1 semana después aplicar Lugol, se va a poner oscuro excepto donde ya no hay almidón
Si se ve la carita es que está hidrolizado el almidon +
Si no se ve la carita no hidrolizo el almidon -
Hidrolisis de gelatina(proteína)
Colocar la bacteria en medio de cultivo de gelatina
- si permanece sólido
+ si es líquido (hidrolizo la gelatina)
LEVANA
Medio de cultivo contiene sacárosa la cual es desdoblada para convertirla en paquetes de fructosa
Se colocan 3 puntos en el medio
+ colonia curvinada
- colonia plana
ÍNDOL
Medio de cultivo contiene triptofano
Se coloca la bacteria y en la sig clase se le agrega reactivo Kovac ( alcohol isoamilico, P-dimetil- amino- benzaldehido)
+ si se observa un anillo color rojo, la bacteria produce indol, por lo que el alcohol lo eleves y el sometió lo va a teñir
- si es café
Sacarosa y fructosa
Para cada medio se le aplicó muestra de la bacteria
+ si se pone amarillo
- si se pone azul o queda igual
Leche litmus
Contiene 2 azucares, 2 proteínas y 1 complejo proteico (Litmus)
Se coloca muestra de la bacteria en el medio
Si es que hidrolízan los azúcares se pondrá de color rosa a rojo (acidifican el medio)
Si es que hidrolizan las proteínas se pondrá de color azul (porque alcanizan el medio)
Si es que actúan sobre las proteínas y azúcares crean un coágulo (coagulizan el medio por la gran presciencia de ácido producto a partir de la lactosa
Degradación del coagulo (peptonizacion por acción del CO2 producida dura te la degradación de la lactosa.
S
Si utilizan el litmus se pondrá color amarillo
Reducción de nitratos a nitritos
el medio se coloca solución A y B
Se pone de color rojo si tiene la nitrato reductasa (convierte los nitratos a nitritos)
Si no se presenta la coloración roja se debe adicionar zinc al medio de cultivo este reactivo reducirá los nitratos presentes a nitritos y se formará el color rojo y la prueba será negativa. Si por el contrario no hay color rojo la prueba es positiva porque ya no hay nitratos en el medio
