Parcial 2 Flashcards
Que es la BTC Médica
Uso de herramientas biotecnologicas para investigar y generar productos para el diagnostico, tratamiento y prevención de enfermedades
Productos de la BTC Médica
Antibioticos
Vacunas
Insulina
Celulas madre
1882 (primera)
Walter Flemming: Cromosomas descubiertos en larvas de salamandra
1944-1965 (segunda)
ADN como material hereditario, estructura
Que descubrieron Watson y Crick?
Doble hélice del ADN
Que descubrió Marshall Nirenberg?
Que bases estan en cada codón
1971-1980 (tercera)
Empresas BTC, Primer producto HGH
1983 (cuarta)
Prevención del VIH
1984 (quinta)
fingerprinting, se comercializa HGH, se secuencia el genoma de VIH
1986 (sexta)
vacuna recombinante para hepatitis B
1988 (primero)
Oncoraton
1991 (segundo)
Terapia génica pata paientes con cancer para inhibir tumores
1995 (tercera)
secuenciacion de genomas no viral, Haemophilus influenzae
1997 (cuarta)
oveja dolly
1998 (quinta)
aislamiento de ESC
2007 (sexta)
Factores de Yamanaka, iPSCs
Técnicas de BTC médica (7)
PCR
FISH
Secuenciación
Microarrays
Cultivo celular
ARN de interferencia Edición genómica
Objetivo de la PCR (Reacción en la cadena de la polimerasa)
Se busca obtener gran cantidad de copias
Componentes de PCR (6)
Primer, cebador o iniciador: señala el sitio donde se dará la amplificación
Taq polimerasa: permite la replicación
MgCl2: cofactor de la poli
dNTPs: nucleótidos que se añaden
Buffer: pH necesario para la reacción
Agua de PCR
Objetivo de FISH (Hibridación in situ fluorescente)
localizar secuencias específicas de ADN en un cromosoma
Usos de FISH
Detección de anormalidades cromosómicas como:
Aneuploidas (Down, Klinefelter, Turner)
Translocaciones, inversiones, duplicaciones (cáncer mama, leucemia)
Pasos de FISH
- Producir sondas fluorescentes complementarias a ADN target
- Denaturación de ADN y sondas (calor o químicos)
- Hibridización
- Microscopio
Objetivo de la secuenciación
Orden de nucleótidos, entender la estructura de genes, qué secuencia codifica para qué proteína, predecir mutaciones genéticas relacionadas a enfermedades
Que son los Microarrays
Es un sustrato solido que permite determinar la expresión génica del ADN target a partir de la sonda
Pasos de microarrays
- Obtener ADNc de diferentes muestras
- Marcar con fluorescencia
- Mezclar e hibridizar muestras con el chip
- Escanear el chip
- Analizar
Que es el cultivo celular?
Se hacen crecer cels fuera del cuerpo controladamente
Usos del cultivo celular (6)
Producción de vacunas
Anticuerpos monoclonales
Proteínas recombinantes
Terapia celular
Celulas para trasplante
Historia del cultivo celular
- Sidney Ringr mantenía corazones animales en soluciones de Na, K, Ca, Mg
- Wilhelm Roux extrajo medula de un embrion de gallina y puso en sal con T caliente
- Ross Granville hizo la metodología para cultivo cel
- Primera vacuna del polio
Tipos de cultivo celular
Adherente y en suspensión
Objetivo ARNi
interrumpir acción de ciertos genes que provocan enfermedades
Pasos del iRNA (6)
- ARN de doble cadena es reconocido por la proteína Dicer
- Dice es una nucleasa que corta la cadena
- Se forma siRNA (small interfering rna)
- Argonauta reconoce siRNA y se activa RISC que destruye una de las cadenas del siRN
- Cadena restante guía a RISC a un ARNm complementario y se hibridiza
- Argonauta corta ARNm = silencia función génica
Objetivo de la edición genómica
Cambiar la estructura del gen, insertar, quitar y reemplazar genes
Pasos de la edición genómica
- Nucleasa rompe las dos cadenas de ADN
- Célula repara la ruptura por homologa y no homologa
Homóloga: insertar gen de interés
Que son los antibioticos?
Productos antimicrobiabnos para tratar y prevenir infecciones bacterianas
Describa el descubrimiento del primer antibiótico
Descubrimiento de la penicilina por Alexander Flemming. Tenia cajas petri con estafilococos (bacterias). Un día una caja estaba abierta con contaminación fúngica y alrededor había un halo que inhibía el crecimiento de bacterias. Descubrió que el hongo penicilium emitía una sustancia y se hizo un filtrado del caldo de cultivo
Los antibióticos se clasifican por:
Mecanismos de acción - inhibir síntesis
Clasificación de antibiótico (6)
Inhibir sintesis de:
Pared celular
Proteínas
ADN
ARN
Acido micólico
Acido fólico
Antibiótico para inhibir pared celular
Penicilina, cefalosporina, vancomicina –> piel, meningitis, septisemia
Provocan muerte bacteriana porque inhiben la síntesis de pared de peptidoglicano, por lo que no pueden dividirse ni reproducirse
Antibiótico para inhibir proteínas
Aminoglucósidos, tetraciclinas –> bacterias que resisten a penicilina
Antibiotico se une a la subunidad 30s o 50s del ribosoma, bloqueando la función de traducción de ARNm a proteína
Antibiótico para inhibir ADN
Fluoroquinalona, metronidazol
No permiten que el ADN se desenrolle y se replique
Antibiótico para inhibir ARN
Rifampicina –> tuberculosis y lepra
Inhibe a la ARN poli para la formación de ARNm apartir deADN
Antibiótico para inhibir ácido micólico
Izoniazida –> micobacterias
Inhiben síntesis de acido micolico que forma la pared celular
Antibiótico para inhibir ácido fólico
Trimetoprima –> estreptococos
Impiden sinteizan acido folico necesario para sistensis de aminoacidos y nucleótidos
Que es un esferoplasto?
Cuando a una bacteria se le pone antibiótico, se sale de la pared celular
Usos de los antibioticos
Tratmiento de infecciones, revención e inmunomodulacion
ADN recombinante
molecula de ADN de dos especies diferentes
Requerimientos para ADN recombinante
Enzimas de restricción: ligasas, polimerasa
Vector: plásmido
Organismo hospedero
Pasos para ADN recombinante (6)
- Enzima de restriccion corta ADN de interés y de vector
- Se amplifica el ADN cortado mediante PCR
- unir vector cortado y fragmento de ADN con ligasa
- Obtención de vectores recombinantes
- Se transforma a un organismo hospedero
- Bacteria de produce y se genera ADN recombinante
Que es una proteína recombinante
Proteína codificada por un gen de ADN recombinante que ha sido clonada a un organismo hospedero
Funciones de proteínas
Reemplazar
Incrementar
Inhibir
Carrier protein
Proteínas recombinantes para reemplazar otras
proteína de la insulina humana
Proteínas recombinantes para incrementar otras
Hormona de crecimiento humano
Proteinas para inhibir agentes infecciosos
proteína recombinante interferon alfa-2b
Carrier protein
Graves disease
vacunas –> transportan moléculas a través de la membrana lipidica
Tipos de vacuna (8)
- Inactivada
- Atenuada
- Toxoide
- Subunidad
- Conjugada
- ADN y ARN
- Célula dendrítica
- Heterotípica