parcial 1 Flashcards
¿qué es la bioseguridad en el laboratorio?
principios, tecnologías y prácticas de contención que previenen la exposición no intencional a agentes biológicos y toxinas o su liberación accidental
material y equipos de bioseguridad en el lab de biomol
botiquín
extintores
sistema de ventilación adecuado
agua
soluciones que se usan para limpiar el área
hipoclorito al 10%
alcohol al 70%
¿qué es un residuo peligroso?
toda sustancia que por sus características corrosivas, reactivas, explosivas, tóxicas, inflamables y biológico-infecciosas, represente un peligro para el equilibrio ecológico o el ambiente
norma para el manejo de rpbi
NOM-087-ECOL-SSA1-2002
¿qué son los rpbi?
materiales generados por muestras biológicas
sangre, cultivos, cepas, tejido, residuos, materiales punzocortantes utilizados para extracción, tubos de almacenamiento
¿dónde se desechan los residuos: sangre, cultivos y cepas, no anatómicos?
sólido: bolsa de plástico roja. Calibre mínimo:200
líquido: recipiente rojo rígido hermético
¿dónde se desechan los residuos patológicos?
sólido: bolsa de plástico amarilla. Calibre 300
líquido: recipiente amarillo hermético con tapa rígida
¿dónde se desechan los residuos punzocortantes?
recipiente rígido de polipropileno, de penetración de 12.5 N
¿qué se desecha en la bolsa o recipiente rojo?
material desechable y recipientes con sangre o empapados de ella
cultivos y cepas de agentes biológico infecciosos
¿qué se desecha en el contenedor de punzocortantes?
material punzocortante o de vidrio que estuvieron en contacto con humanos o animales o con sus muestras biológicas
jeringas, navajas, lancetas, tubos capilares, tubos de vidrio
¿qué se desecha en la bolsa amarilla?
partes de tejidos u órganos, cadáveres de animales
instrumentos de alta precisión empleados para la medición de micro volúmenes
micropipetas
en el laboratorio se trabaja con volúmenes de reactivos del orden de…
mililitros
microlitros
pasar de mililitros a microlitros
multiplicar por 1000
pasar de microlitros a mililitros
se divide entre 1000
¿cuáles son los tipos de micropipetas?
de volumen fijo y de volumen variable
micropipetas que miden un solo volumen
de volumen fijo
micropipetas que pueden tomar múltiples volúmenes dentro de un rango establecido
de volumen variable
¿qué micropipetas se utilizan en el lab de biomol?
de volumen variable
rangos más frecuentes de las micropipetas de volumen variable
0.2 a 2
1 a 10
2 a 20
20 a 100
50 a 200
200 a 1000
principio del funcionamiento de las micropipetas
a través de pistones que generan vacío, esto permite que el volumen ingrese a la punta desechable
medida de las puntas azules
200-1000 microlitros
medida de las puntas amarillas
2-200 microlitros
medida puntas blancas
0.2-10 microlitros
separan sustancias de distinta densidad o partículas suspendidas en un líquido
microcentrífuga y minicentrífuga
volumen de tubos que pueden ser usados en la micro y minicentrífuga y volumen usando adaptadores
1.5 a 2 ml
con adaptadores: 0.2-0.7 ml
cantidad de posiciones en los rotores de la microcentrífuga
12-24
cantidad de posiciones en los rotores de la minicentrífuga
8-12
velocidad máxima de una microcentrífuga
15,000 rpm
velocidad máxima de una minicentrífuga
500 rpm
equipo destinado a la agitación de tubos para el mezclado/homogenización de reactivos, muestras
vórtex
¿qué es el genoma?
composición completa de nucleótidos en una persona
¿el adn tiene que ser purificado para la pcr?
sí
es la combinación de la mitad del ADN materno y la mitad del paterno
información genética
% del genoma correspondiente a genes
4%
¿qué es la díada?
pares de bases
¿de qué consiste cada cadena de ADN?
grupos fosfato diéster unidos por medio de enlaces 3’ a 5’ a la B-desoxirribunofuranosa
¿dónde se encuentra el azúcar del ADN?
perpendicular a la base a la que se une
este ADN está organizado en los cromosomas
adn nuclear
segmento de adn que contiene la información para sintetizar una proteína
gen codificante
cuántos genes contiene el genoma aprox
40 000
son las plantillas para la síntesis proteica
arnm
disuelven las moléculas grasas
detergentes
moléculas que principalmente pueden interferir en la extracción y precipitación del ADN
proteínas
enzima que digiere proteínas
proteasa
¿qué otra cosa se elimina al destruir las proteínas?
DNAsas
son proteínas que digieren el ADN, lo cortan y degradan
DNAsas
¿qué se añade para separar el ADN del resto de moléculas?
alcohol frío
dónde es menos soluble el ADN, en alcohol o en agua
alcohol
relación entre el etanol y el ADN
entre más frío se encuentre el etanol, el ADN se torna más insoluble
en presencia de altas concentraciones de… el ADN precipita y se agrega hasta ser visualizado a simple vista
sal y alcohol frío
moléculas que no se pueden visualizar al estar disueltas en alcohol y agua
aminoácidos y carbohidratos
¿qué son las enzimas de restricción?
endodeoxirribunocleasas capaces de cortar ADN de doble cadena en una secuencia específica
¿qué permitió el uso de enzimas de restricción?
cortas secuencias de interés y ensamblarlas en una forma deseada para obtener una molécula de ADN artificial
¿de qué forma se protegen las bacterias contra la degradación?
metilación en sus cadenas
¿qué son los fragmentos de restricción?
segmentos de ADN de doble cadena producidos por la acción de una enzima de restricción
cuánto más corta es la secuencia de reconocimiento…
mayor es el número de fragmentos generados
¿qué permite la tecnología del ADN recombinante?
aislar, secuenciar, manipular y conocer estructura y función de genes individuales
¿qué es RFLP?
polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción
¿por qué pueden verse alterados los sitios de reconocimiento?
por variaciones en la secuencia del ADN
¿qué es un marcador genético?
segmento de ADN con ubicación física conocida en un cromosoma
aplicaciones del análisis de RFLP
establecer relaciones genéticas entre personas
identificar cepas virulentas
monitoreo del transplante de médula ósea
¿qué es la electroforesis?
una herramienta para aislar y purificar macromoléculas en base a su movilidad dentro de un soporte o matriz sólida dentro de un campo eléctrico
¿cómo puedes ser identificados los ácidos nucleicos en la electroforesis?
por diferencias en sus corrimientos electroforéricos
tinciones para visualizar los ácidos nucleicos en electroforesis
Fast Blast y BrEt (bromuro de etidio)
tinción para geles de agarosa, contiene un compuesto catiónico colorido, sus moléculas son atraídas y se unen a los grupos fosfato cargados negativamente del ADN y a un pH ligeramente básico
fast blast
tinción que se intercala entre las bases, permite visualizar hasta 1 ng de dsDNA al emitir fluorescencia rojo-naranja (560 nm) bajo luz UV (260-360 nm)
BrEt
¿qué sucede en el gel de agarosa?
el ADN se coloca en gel solidificado, que forma una matriz con poros.
movimiento a través del gel cuando se aplica corriente eléctrica
la corriente viaja a través del gel y el buffer salino
ADN viaja al ánodo positivo
presentan menor movilidad electroforética
moléculas de mayor peso del adn
carga del cátodo
negativa
cuánto mayor sea la concentración de agarosa…
menor tamaño de los poros y más tardarán las moléculas de ADN en atravesarlos
se emplea para la separación óptima d fragmentos de entre 500 y 10,000 bp
agarosa al 1%
¿cómo se calcula el peso molecular aproximado de los fragmentos de restricción?
se compara la migración de las bandas en una muestra de ADN digerida con las bandas en el carril del marcador del peso molecular
