Parcial 1 Flashcards
¿Qué es euna célula madre?
Una célula indiferenciada, capaz de autorenovarse (Proliferación clonal) y a la vez generar células hijas comprometidas hacia la diferenciación (Especialización. )
¿Qué hace que una célula madre siga siendo célula madre y no se diferencie?
Su nicho.
Describe el sistema de célula madre.
Tenemos la célula madre en su comportamiento basal o un compartimiento de CM, se puede autorenovar o producir hijas que se comprometan. P = 0.5
- Tiene bajo nivel de proliferación.
- Tiene alta clonogenicidad.
Las hijas son las de transición, de amplificación de tránsito.
- Proliferan rápidamente, es decir su ciclo es rápido.
- Tienen baja clonogenicidad.
Luego tienen la diferenciación terminal:
- No tiene autorenovación.
- No tiene proliferación.
- No tiene clonogenicidad.
¿Qué es un sistema de células mare patogenico?
Dicen que los tumores tienen células madre, crecen porque tienen céulas especializadas, generadas por células madres patológicas.
Lo cool es que si atacamos de células madre, podemos volver al tumor benigna.
¿Cuáles son los potenciales de diferenciaciónde las céulas madre?
Totipotenciales.
-Oocito y Mórula.
Pluripotenciales
- Blastocito, o embrionarias.
- No pueden generar la placenta.
Multipotenciales
-Organismo
Unipotenciales.
Nulipotente
¿Qué dice el paper de TILL Y McCuLLOCH
Destruian la medula ósea de ratones, a través de radiación. Las de la médula son muy sensibles a la radiación.
Después se hace un transplante de CM
Vieron que aparecieron nódulos en el baso, que es un órgano hematopoyético, Y ahÍ habían células madre.
Para que se hayan formado las CM, tiene que haberse formado, al menos un nódulo.
LO QUE PROBARON ES QUE SE PUEDEN HACER TRANSPLANTES
¿Qué hicieron Becker en el 63?
No estaban seguros de que cada nódulo había sido provocado a partir de células madre,
VIeron el origen clonal de las células madre.
Entonces lo que hicieron es que transplantaron células madre con errores en el cariotipo, y vieron que pues todas las que surgieron de esa tenían el error en el cariotipo. Así, se descartó, que los nódulos que hicieron en el 61 eran por células que se habpian transplantado ya diferenciadas.
Dime los tipos de células madre y para que sirven.
Totipotentes: Generan embrion completo, placenta y tejidos extraembrionarios.
Pluripotentes: Células pueden generar todas las células del ebrión.
Multipotencialidad: Convertirse en más de un tipo de célula especializada.
¿Qué es la complementación de embriones tetraploides?
Lograron generar un embrión tetraploide.
Se fusionaron dos blastómeras y ya era 4n.
Se desarrollaban hasta cierto grado y se morían.
Las tetraploides solo se programaba a producir tejidos extraembrionarios.
Esto demostró que si se hace tetraploide deja de ser totipotencial y se convierte en pluripotencial.
Entonces, colocaron células adre pluripotenciales en los tetraploides, así, complementándolos, ya se cumplía de forma MÁS O MENOS correcta.
SÍ NACÍAN, PERO SE MORÍAN LOS RATONES.
AHORA, se utilizan las cosas tetraploides para producir individuos transgénicos. Solo se ponen células pluripotentes transgénicas y pues PA.
¿Cuáles son los tejidos extraembrionarios?
Trofectodermo
Saco vitelino
¿Cuál fue el experimento de quimerismo embrionario?
Se crea individuos que tienen la genética de dos o más individuos. Se estudia la pluripotencia.
Si se puede producir el fenómeno del quimerismo, entonces sí eran pluripotenciales las células.
Solo se inyectan células presuntamente pluripotenciales en la mása celulas de dentro del blastocito.
Forman un mosaico. Son capaces de aportar a la línea germinal.
Producen do tipos de gamentos.
¿Qué es una célula unipotente y por qué ya no se utiliza ese nombre?
Es una célula que solo puede diferenciarse a un tipo de célula en específico. Ya casi no se utiliza porque cada vez hay más evidencia de que las células pueden ser al menos multipotenciales.
POr ejemplo las céulas satélites musculares, se creía que solo podían hacer , pues células del músculo y al final pudene hacer células de miocitos, óseas y adiposas.
¿Qué son las células progenitoras?
Las células que son de tránsito entre las CM y las células especializadas. Potencial para dar un lugar a un número o tipo limitado de células especializadas y tienen una capacidad reducida de autorenovación.
Describe superficialmente el nicho de las células hematopoyéticas.
A ver, tienen dos nichos. Uno osteoblástico y otro vascular.
En el nicho osteoblástico vana a estar en contacto con el osteoblasto y hay otras más cerca de los vasos sanguíneos
La molécula ckit, segragadas por el fibroblasto, hace que las células progenitoras se diferencien al precursor de las diferentes líneas.
Desdiferenciación y regeneración en respuesta a una lesión y la homeostasis tisular.
Aquí explican que las células de amplificación de tránsito, bajo ciertas condiciones pueden volver a ser CM. Rompen el compromiso.
Y aumentan el pool de células madre.
¿Cuál es la teoría de Scotfield?
Esta plantea que las células madre no son autónomas y dependen de una ubicación específica que las regule.
La ubicación se llama Nicho:
-El Nicho restringe la entrafa en el ciclo celular y la diferenciaciación.
-Mantiene un estado de autorenovación.
.Protege las CM de las mutaciones.
¿Cuáles son los componentes del nicho?
Los componentes celulares como las células mesenquimales,
Factores solubles, secretados por las células.
El sistema inmunológico.
Factores metabólicos, como el O2, el calcio, la glucosa.
Matriz extracelular.
Factores físicos
V o F. La senecescia está directamente asociada al envejecimiento
Nou.
En el hígado, ¿Qué ocurre en la senecencia?
Ehhhh, a ver. La cosa es que aumenta la producción de cEBP-a y lo que hace es que aumente la expresión del factor Brm que remodela la cromatina y hacae que disminuya la cantidad de células progenitoras por parte de las células madre.
¿Por qué la masa muscular de los animalitos viejos disminuye?
Porque el metabolismo está más al catabolismo que al anabolismo.
Y es porque el gen Notch disminuye, que constribuye que las CM ya no produzcan células satélites que hacen células musculares
¿Cómo se llamaba el procedimiento de los ratones siameses?
Parabiosis.
¿Cómo es el esxperimento de Gordon de reprogramación?
Reprogramaron el núcleo de una célula somática. Solo quedó el citoplasma y los organelos y le extrajeron su núcleo y le pusieron el núcleo de un oocito, entonces se reprogramó porque se volvió pluripotente. Altamente diferenciada a altamente indiferenciada.
¿Qué es la derivación experimental de CME?
Hicieron varios investigadores y consistió en tomar células del blastocito, de la masa celular interna y separarla de trofectodermo, las cultivaron y formaban colonias enormes y muy apretadas y planas.
¿Qué se debe hacer para segurar que tengo una línea germinal de ES?
Se tiene que hacer un replaqueo y subcultivo durante al menos, 6 meses. Y mantenerlo en criopreservación.
Identificar factores de transcripción como el NANOG o el OCT4.
Se tiene que ver el cariotipo para ver si está bien.
Deben poder ser congeladas y cultivadas y subcultivadas sin que pierdan sus características.
Formación de quimeras.
Ver si hay diferenciación espontánea.
Inducción de formación de las 3 láminas embrionarias in vitro.
¿Por qué si no están en un nicho no se diferencian en el subcultivo?
Porque lo hago flash y no les doy chance a que entren en estado de diferenciación.
¿Qué es un teratoma?
Tumores de células pluripotenciales que ocurren de manera natural en las gónadas.
Así se cultivan las celulas madre.
¿Cuál es la técnica de cuerpos embrioides?
Es una especie de cera, hecha a partir de CM embrionarias, puede ucirrir una diferenciación espontánea a las tres capas embrionarias.
Así se cultivan las celulas madre.
Tiene que haber los marcadores de las tres capas embrionarias para yo poder decir que la muestra inicial tenía células pluripotenciales.
Cada cuerpo ebrioide se forma de una célula madr.e
Explícame cómo hicieron que se diferencia una célula madre a una célula motora
Se hicieron copiándose de lo que pasa en el desarrollo de neurogénesis.
Entonces:
Respondieron a las moléculas de señalización de manera dependiente a la concentración.
-Adquieren progresivamente el destino de neurona terminal.
Y cuando fueron implantadas in vivo fueron funcionales.
LO IMPORTANTE ES QUE SIGUIERON EL PROTOCOLO DE DIFERENCIACIÓN DE CÉLULAS EMBRIONARIAS.
Explica, brevemente la etapa de segmentación del desarrollo embrionario.
La primera célula se divide en dos blastómeras y luego 4 y luego 8, pero van disminuyendo de tamaño porque no hay crecimiento del citoplasma. Sí ocurre duplicación del material genético, tho.
Esto sigue hasta la mórula que está muy compactada. Estas células con totipotenciales. Solo hasta las 8 blastómeros.
¿Qué capas debe atravesar el espermatozoide para entrar al óvulo?
El cúmulo de células y ácido hyalurónico, la zona pelúcida y el espacio perivitelino
¿Qué es el acrosoma y para qué sirve?
Para atravesar la parte de la zona pelúcida y las demás capas el espermatozoide tiene este acrosoma que es una vesícula en su cabeza que secreta sustancias proteolíticas. La liberación de las enzimas se llama reacción del acrosoma
¿Qué se tiene que dar para que se produzca la reacción acrosómica.
El colesterol tiene que se eliminado, Debe haber un ingreso masivo de Ca2+, Aumento de pH, Aumento de proteína quinada A Y C y la fosforilación de Tirosina.
¿En qué consiste la reacción acrosómica?
La membrana interna y externad del esparmatozoide se fusiona, y hay poros por donde salen las enzimas proteolíticas.
¿Qué es nuevo de la fecundación?
Qué hay sustancias como por ejemplo la fertilina que juega un papel muy importante en la fecundación pero no es vital y hay genes como el ADAM 3, ZUMO1 y CD9 que también son muy importantes.
Describe un poco más por qué se llama compactación.
Se llama así porque cuando ya se está emepzando a diferenciar al blastocito, las células externas están muy juntitas y se forman unas uniones sellantes que prácticamente hace que ese tejido sea impermeable, Esas uniones son hechos por complejos de proteínas. Es porque mientras se implanta tienen que pasar por un ambiente medio pegriloso, entonces es entendible, que para unirse al endometrio, pues se una.
V o F. El proceso de blastulación y desarrollo embrionario general ocurren en el mismo tiempo en todos los mamíferos.
Nou
¿Cuáles es la relación entre los transcriptos maternos y el desarrollo?
Cuando está empezando el proceso de desarrollo no tiene mucha capacidad de trasncripción por su perfil epigenético, entonces solo puede depender de los transcriptos de la mamá. Cuando ya pasa la etapa de los 8 blastocitos mpieza a haber transcriptos del genoma del embrión y deja de haber los maternos cuando el blastocito está maduro.
¿Qué genes aportan a mantener la pluripotencialidad de las células en el embrión bilaminar?
En el blastómero tienes la célula totipotencial blastómera y si se expresa el OCT4, se queda como CM pluripotenical sino, se expresa el Cdx2 y se convierte en el trofectodermo.
Si a esa CM pluripotencial se expresa el Nanog se va a célula del epiblasto pluripotencial y si no, se expresa el GATA - 6 y se vuelve célula del Hipoblasto (placenta)
Como es el principio de la Gastrulación.
Del epiblasto se genera el Ectodermo y el endodermo, en el ectodermo se forma un surco que se llama línea primitiva y a través de ese surco se diferencian las células del mesodermo.
Las tres capas embrionarias, qué geeran
Ectodermo: Piel, tejidos nerviosos, Uñas, pelo.
Mesodermo: Tejidos musculares, cartílago y huesos.
Endodermo: Digestivo, circulatorio, respiratorio.
¿Por qué se dice que los mismos factores producen efectos distintos en el proceso de gastrulación?
Porque diferentes concentraciones con los mismos factores producen diferentes resultados.
¿De qué tejido se generan el Ectodermo, mesodermo y Endodermo?
Del Epiblasto.
Explica el proceso de gastrulación con los factores.
OKay, cuando se hace in Vitro primero tienes las células madre embrionarias. A través del FGF y el MBP, se puede formar un endodermo primitivo.
Luego con más FGF se puede llegar al Ectodermo, pero si noooo.
Se coloca el Wnt, el BMP y Ativina para que se produzca el endodermo y el Mesodermo.
Nomenclatura.
Dime como se le llama al eje desde la cabeza hasta el rabo.
Craneal - rostral- Anterior.
Causal o Posterior.
Nomnclatura.
Dime como se le llama al eje desde la Espalda hasta el Vientre.
Dorsal - Ventral.
Nomnclatura.
Dime qué es el plano medio.
Divide al individuo en dos partes iguales por el centro.
Nomnclatura.
Dime como se le llama a lo que está más cerca del plano medio
Medial.
Y lo otro, Lateral.
Nomnclatura.
Dime como se le llama a lo que está cerca del cuerpo
Proximal.
Y lo otro, Distal
Explicame cómo es el proceso de Gastrulación.
Okay. primero recapitulamos que está el embrión nilaminar con el hipoblasto y el ectodermo.
Se forma la blastula y y el hipoblasto se convierte en endodermo, se produce el división primaria y de ahí salen las células del mesodermo.
AHORA. El ectodermo se desarrolla y el mesodermo, pero el raro es que está esta cosa que se llama sección sagital en el que el endodermo le sale esta coa que se llama saco de yema que es como una bolsa toda fea
¿Qué es el blastoporo?
Es una estructura con la que cuentan varias especies y es una región, junto con la SMO ocurre una gran actividad genética para que se formen las 3 capas de ectodermo, meso y endo. A través de morfógenos.
¿Qué significa que la autogenia repite la filogenia?
Que el desarrollo embriológico se recapitula la historia evolutiva.
¿Qué es la especificación de las 3 láminas?
Para que se sigan desarollando el Ecto, meso y endodermo, se tienen que especificar. Y es a través de los morfógenos que son genes que controlan el desarrollo a través de un gradiente.
Explica la transformación del epiblasto ectodermo.
Es importante la actividad del gen Wnt, sobre todo para la cabeza, porque aquí necesita especificarse a Neuroectodermo.
El Neuroectodermo se especifica como un tubo, que se llama tubo neural, entonces hay una especie de invagicación del ectodermo y pues se forma el tubo.
THOOOOO, Si hay mucho Wnt, el epiblasto se transforma a mesodermo y mesodermo. :/ Y se llama posteriorización.
Efecto del Wnt sobre el Ectodermo.
Entonces, se inactivar el Wnt para que el Epiblasto, se transforme en Ectodermo y se debe activar para que el ectodermo se transforme en Neuroectodermo.
V o F. El ectodermo no dura mucho.
Indeed, se diferencia rapido a tejido nervioso o a la piel.
¿Cómo afecta la Proteína morfogénica del hueso (BMP) al ectodermo?
Si está baja, en la parte más proximal, El epiblasto genera ectodermo neural y si está alta se va a ectodermo epidérmico, esto en la parte distal.
¿Cómo afecta el Nodal al ectodermo?
No c. Solo dijo que transforma el Epiblasto a ectodermo. Floow me for more updates.
Describe, ahora, la especificación del mesodermo.
Es importante el FGF que causa la migración y el modelado del mesodermo en la gastrulación.
¿Cómo activa el FGF la cascada para la dormación del mesodermo?
El FGF y el Wnt activan esta proteína que se llama Brachyury, El Bachyury puede activar el Tbox6 que sirve para el modelado y de forma indirecta al Snail que inhibe el ECadherin (Que inhibía el Wnt, entonces es cool, porue ahora esstá más activo y hay más Brachyury) y e induce ya la morfogénesis
Describe, ahora. (Qué joda), la especificación del Endodermo.
El endodermo definitivo se forma durante la gastrualción y sustituye al endodermo viceral extraembrionario.
¿Cuál es la diferencia entre Especificación y Determinación?
Especificación: Esta célula es reversiblemente capaz de diferenciarse de forma autónoma cuando se coloca en un entorno neutro, como un placa de Petri, etc
Determinación: Es capaz de diferenciarse de forma autónoma incluso cuando se coloca en otra región del embrión y es de forma irreversible.
Pon el orden de desarrollo de células desde la célula madre
Especificación, determinación, modelado y morfogénesis.
¿Qué es el modelado?
El pattering, en el que se da una cordinación precisa de los programas genéticos para crear tejidos y órganos complejos, pero sin desarrollarse por completo.
¿Qué es la propiedad de polaridad al momento de determinación del embrión?
Que es capaz de diferenciar entre las regiones craneales y caudales. Es decir anteroposterior
V o F. El trofectodermo y los tejidos extraembrionarios solo sirven para intercambio materno-fetal.
Falso, los tejido extraembrionarios también tienen una expresión de genes que van a servir como morfógenos para que el epiblasto pueda llevar a cabo procesos de desarrollo.
¿Qué son los organizadores?
Son grupos de células en una determinada zona del embrión que tienen la capacidad de instruir células adyacentes hacia estádos específicos.
Es decir que los van a poner en epecificación y determinación.
¿Cómo se llama la zona de organizadores en mamíferos y aves para las tres capas embrionarias?
NODO. Y está situado al borde anterior de la línea primitiva que comprende derivados mesodérmicos y endodérmicos
¿Qué sucedería si falla el nodo?
Habría asimetría en los tejidos anteroposteriores.
En anfibios, ¿Cómo funcionanan los organizadores en anfibios?
Es un CONJUNTO CONTINGENTE de elementos. Es decir, que están dispersos, pero en conjunto actúan en una zona específica.
V o F. Diferentes especies tienen organizadores dispersos en tiempo y espacio.
Ajam.
Describe cómo obtendrías una línea primitiva desde células madre embrionarias
Pues antes de tener una línea primitiva tienes que tener una colonia con capas germinaes, para eso añades BMP, y luego les pones el Wnt para obtener la línea primitiva.
Tho, si ya quieres tener el organizador de los humanos también se necesita Activina.
¿Definición de células germinales primordiales?
Células madre de la línea germinal que dan lugar a los gametos en los vertebrados.
¿Cuál es el producto final de las células germinales primordiales?
Las gónadas.
Dexrcibe la vía de especificación de las células germinales primordiales:
Pilas que esto es reversible, cause especification.
Entonces, del trofectodermo, por vía de segregación, se transforma otros linajes (Que leugo va a ser la placenta) y también a ectodermo extraembrionario (Que va a desaparecer después, pero ahora se necesita), este, por efecto de la BMP y se trasnforma en Alantoides y CGP. Que son las Células germinales primordiales
Otro factor importante, es el Blimp1. Esta les ayudan a migrar.
La pregunta es: ¿Dónde está McQueen?
Y también: Si están por fuera, ¿Cómo llegar a las gónadas que están adentro?
¿Luego de que ocurre la diferenciación de las células germinales cuál es la siguiente desición que tienen que tomar?
Trick Questino, ninguna. Solo las pluripotenciales somáticas siguen haciendo eso, qué pereza they are too cool for that.
THO. Sí tienen que adquirir programación epigenética de específica de CG, deben entrar en Meiosis y deben mantener su integridad genética.
¿Qué pasa en la reprogramación epigenética específica de las células germinales primordiales?
Primero, tiene que suprimir todos los genes somáticos, pero se reactiva el cromosoma X, porque se necesitan los dos.
Luego, se borra la huella del printing, que es la programación epigenética paterno y materno. Y se vuelven totipotentes.
Desmetilación.
Se da también un control muy estrecho de los transposones porque pueden ser muy pegrilosos
¿Cuándo ocurre el restablecimiento del imprinting parental en las CMG?
En los machos: Poco antes del nacimiento, en las niñas antes de la pubertad.
¿Dón donde está mcQueen?
Las células germinales, primero están en el ectodermo extraembrionario y luego viajan a la treta genital que es parte del mesodermo, A través del intestino primitivo.
¿De qué depende de que las gónadas sean testículos u ovarios?
El gen SRI que está en el cromosoma Y las convierte en testículos y si no está, se convierten en ovarios.
¿Qué es el estbalecimiento de células madre embrionarias?
Cultivarlas in vitro
¿Qué es la caracterización de células madres pluripotentes?
Ver si mismo es pluripotentes.
¿Cuál es la historia del establecimiento de las células madre embrionarias?
Primero solo podían hacer cultivos de teratocarcinomas, pero esto no estaba tan coo porque eran patogénicas, entonces solo se podían estudiar cierto rango de cosas.
Entonces, lo que hicieron es que cogieron un embrión de ratón de una edad específica (E2.5) y lo lograron evitando que se implante el embrión para que sea más grande y que no se pegue.
Este proceso se llama diapausa
Para que no se implante se les inyectó depoprovera que es un tipo de progesterona para cambiar el ambiente hormonal.
Entonces luego, no le aislaron la masa interna sino que le pusieron con trofectodermo y todo y se dieron cuenta de que el trofectodermo podía ser perjudicial, pero luego desaparecían.
¿Qué es un medio condicionado?
Es un medio con concentraciones de sustancias que secretan las células cuando están en cultivo, puede ser util porque tienen factores
¿Qué es la mitomicina?
Una sustancia que inhibe la proliferación clonal
Describe la inmuno disección:
Se basa en anticuerpos y sistema de complementos. y les pusieron anticuerpos antiraton y complemento de cuy y eso, no sabían como, ni yo tampoco, solo mataba al trofectodermo
¿Cuáles son las diferencias entre las CME de distintas especies?
En humanos es achatada las colonias.
En ratones tienen irregular y son elevadas.
El raton expresa SSEA-1, y el humano no
¿Qué genes tienen en común en la expresión de CME en humanos y ratones?
Oct3/4, SOX2, REX1, y TERT
¿Qué hicieron los investigadores para caracterizar bien las células madre pluripotentes? CARPENTER
Se dieron cuenta de que habían líneas celulares muy mal caracterizadas y ellos lo hiceron a 26 de ellas.
Se dieron cuenta de que tenían marcadores comunes.
Por ejemplo l SSEA4+ (Específico para humano)
Tra-1-60
Tra1-81
Tenían un cariotipo normal al subcultivo celular a largo plazo
Y que pueden generar las células de las 3 capas embrionarias.
Los telómeros se regeneran. Por la actividad de la telomerasa. Y porque se dividen poco
¿Cómo lograron caracteriazr las células madre en ratones? CZECHANSKI
Utilizaron una téncina que permitía la derivación de las ESC de cualquier cepa.
Permitía tener ESC de ratón en 3 semanas y una caracterización completa en 12 con una eficiencia de 90%
La técnica utilizada
Es la siembra de blastocitos en cultivo, y las separan mediante sepración mecánica y enzimática.
y la caracterización fue la inmunofluorescencia para los genes Oct4, NANOG, SSEA-1
Análisis del cariotipo.
Formación de Quimeras.
¿Qué es un micoplasma?
Es un tipo de hongo que no tiene pared celular entonces las hace resistentes a los antibióticos.
¿Qué efectos puede tenr el micoplasma en las células eucarióticas cultivadas?
Niveles de proteína alterados y síntesis de ARN Y ADN.
Cambiar la morfología,
Alteración de metabolismo.
ETC. UN MONTÓN DE COSAS QUE NO TE DEJAN TENER BUENOS CULTIVOS.
V o F. Si reprogramas a una célula somática para que exprese caracteristicas pluripotentes, la telomerasa seguiría igual.
Nom, también cambia y se empieza a renovar
¿Qué pasa en l ainterfase de las ECM?
La fase G1 (Se duplican organelos, citoplasma) se acrota y la S (Duplicación del ADN, se alarga)
Porque tiene que tener mucho más cuidado con la duplicación del ADN.
De acuerdo a su metabolismo, ¿Cuáles son los tipos de células madre embrionarias?
Naive (Preimplantación):
Fosforilación oxidativa
Glicólisis
Oxidación de ácidos grasos
Primed (Postimplantación):
Glycólisis
Differentiated cell, esta no es ESC:
Fosforilación oxidativa
Glicólisis
Oxidación de ácidos grasos
