P2. Preparación De Un Frotis Y Tinciones Basicas Flashcards
Define colorante
Sustancia colorida usada en tinciones para resaltar diferentes microorganismos
Cuál es la utilidad de la tincion?
Procedimiento para teñir y Hacer visibles microorganismos o estructuras que serian invisibles
Características de los colorantes
1) todos tienen grupos cromóforos
2) pueden unirse a la célula por enlaces iónicos, covalentes o hidrofobos
Los colorantes ionizables se dividen en:
básicos y ácidos
Menciona tres colorantes básicos
Azul de metileno, cristal violeta y safranina
Menciona dos colorantes ácidos
Eosina y rosa de bengala
Define fijación
Proceso que fija estructuras internas y externas de las células de los microorganismos
Tipos de fijación:
Física y química
Cuál es la fijación física
Se fija con calor, no conserva estructuras internas
Que es la fijación química
Se fija el frotis con solventes como: etanol, ácido acético
Tipos de tincion
Simple y diferencial
Para que se usa la tincion diferencial
Para clasificar microorganismos según su tincion
Para que se usa la tincion simple
Ver tamaño, forma y agrupación de bacterias
Usa un solo colorante
Pasos de la preparación de un frotis
- Colocar con el asa al centro del portaobjetos
- Si es sólida la colonia agregar una gota de solución salina si es líquido no
- Mezclar con el asa y extenderlo
- Secar frotis cerca al mechero
- Agregar cristal violeta durante 30 seg
- Enjuagar con agua corriente
- Eliminar exceso de agua y secar al aire
Clasificación por su forma de las bacterias
Cocos
Bacilos
Vibrio
Espirilos
Espiroquetas
Cocobacilos
Agrupación de los cocos
Cocos (uno)
Diplococos (2)
Estreptococos (cadena)
Tetrada (4)
Sarcinas (8 en cubo)
Estafilococos (en ramito o agrupación en racimo)
Agrupación de bacilos
Bacilo
Diplobacilo (2)
Estreptobacilos (cadena)
Cocobacilos
La tincion de gram permite ver bacterias…
Positivas y negativas
Que hace que la tincion de gram sea diferencial ?
Agregar alcohol acetona
Pasos de tincion de Gram
- Aplicar cristal violeta 1min (colorante primario)
- Aplicar solución yodada —> mordiente=fija colorante primario
- Agregar alcohol acetona (algunas se decoloran)
- Aplicación de safranina (colorante secundario)
Qué colores se pintan las bacterias en tincion de gram
Gram positivos: violeta
Gram negativos: rojo
Características de la tincion de Zeihl Neelsen
Es para bacterias ácido-alcohol resistentes como tuberculosis
Los ácidos glicolicos hacen impermeables a las bacterias (no se tiñen)
Se calienta para que penetre el colorante
Se usa en bacterias Resistentes para la mayoría de colorantes
