Molekuler Biyoloji Flashcards
DNA önemli ozellikleri?
*Negatif yüklü
*Suda cozunur alkolde cozunmez
*İnaktif DNA nükleusda sıkı paketlidir
İnaktif DNA neden sıkica paketlenmistir?
Sıkı paketlenip inaktif kalmasi icin ve DNA ekspresyonunu kontrol etmek icindir
DNA izolasyon asamalari nedir?
1.Lizis
2.Denaturayson veya proteoliz ile DNA-PROTEİN kompleksinin ayrilmasi
*3.(PRESİPİTASYON) DNA nin basit enzimatik yontemlerle makromolekullerden(proteinler RNA) ayrilmasi
DNA izolasyonunda mekanik olan fiziksel yontemler nelerdir?
*Osmotik şok
*Ultrasonikasyon
*Dondurma-çözme (donrurara enzim aktivitesini durdurursun çözerek DNA yi serbest birakirsin)
*Havan
*Sıvı azot
*French press
DNA izolasyonunda
*Osmotik şok
*Ultrasonikasyon
*Sıvı azot
Nasil işe yarar açiklayiniz?
*osmotik şok hucre ve dis ortam arasindaki osmotik farki artirarak hucre zarinin gecirgenligini artirip hucre organellerinin disari cikmasini saglar DNA eldesi kolaylaşir.
*Ultrasonikasyon ses dalgalarinin titresimi ile hucre zarini parcalar
*Sivi azot hucre zarinin aniden donmasini saglayarak hucre zarini parçalar.
Denaturasyon Renaturasyon islemi nedir?
Denaturasyon sarmal yapinin cozunmesinini saglar yuksek ph ya da sicaklik ile. Renaturasyon ise tam tersidir kosullar eski haline getiildiginde gerceklesir. Ancak kosullar eski haline aniden getirilirse şok etkisiyle DNA yapisinda bozunmalar meydana gelir.
DNA izolasyonu yontemleri nelerdir?
- Fiziksel yontemler
- Kimyasal yontemler
- Enzimlerin ve çözuculerin kullanimi
Lizozim nedir?
Bakteri hucresindeki peptidoglikanin tabakasindaki glikozidik baglari hidroliz eder.
EDTA nedir?
Lizozimin icteki peptidoglikan tabakaya gecisini kolaylastirir ve magneztj baglayarak DNAaz enziminin aktivitesini inhibe eder.
Amonyum sulfat ve sodyum sulfat ne icin kullanilir?
Proteinlerin cokeltilmesi icin kullanilir
Tris nedir?
Ph tamponudur. Ph degisimine karsi direnclidir. DNA nin çözünür halde kalmasini saglar ama onu korur
SDS nedir?
Hucre zarini parcalamak icin kullanilir DNA ya zarar vermez
Presipitasyon nedir?
DNA nin enzimatik veya kimyasal yontemlerle proteinler ve RNA lardan arindirilma islemidir
İsopropanol ve etanol izolasyonda ne ise yarar?
DNA yi cokeltmek icin kullanilirlar
Trizol nedir?
En iyi RNA izole edici maddedir