Mokelukargenetik - Gentechnik

Question 1

Was geschieht bei der PCR-Methode

Answer 1

1) Denaturierung: DNA in Einzelstränge (95°C), Auflösung der H-Brücken
2) Renaturierung (50°C), Primerhybridisierung komplementär in 5’-3’ und 3’-5’
3) Elongation: DNA-Polymerase mit Nukleotidtriphosphaten (dNTPs) -> neue Stränge

Question 2

Agarose-Gelelektrophorese

Answer 2

1) DNA-Probe wird auf Agarose-Gel aufgetragen -> negativ geladen, also schwimmt zum Pluspol unter Spannung
2) kleine Fragmente schwimmen leichter zum Pluspol als große
3) Längenstandard: Vergleichsprobe mit bekannter Fragmentgröße

Question 3

Was sind Restriktionsenzyme

Answer 3

Enzyme, die die DNA schneiden.

Question 4

Wie schneiden sie die DNA?

Answer 4

Bestimmte Restriktionsenzyme schneiden eine bestimmte DNA-Sequenz (z.B. ECoR1 schneidet die ATAT-Sequenz)

Question 5

Was sind “sticky ends”?

Answer 5

H-Brückenbindungen an den Enden der Sequenz.