Module 1 éléments de base Flashcards
Qu’est-ce que l’histologie?
Structure microscopique des tissus en santé, la base de la médecine vétérinaire et une discipline visuelle (savoir reconnaître la structure). REPRÉSENTATION STRUCTURELLE DE LA FONCTION !!!
Qu’est-ce que la différenciation cellulaire?
Procédé par lequel une cellule somatique eucaryote dérive d’une même cellule de départ (zygote; ovule fertilisé) et se spécialise en un type cellulaire précis (existe > 200 types de cellules). Ce processus se déroule surtout durant la vie embryonnaire mais il est aussi présent durant toute la vie de l’animal.
Quels sont les 3 types de biopsies et expliquer un peu chaque type?
- à l’aiguille fine: retirer les cellules directement d’une masse/bosse par aspiration avec une aiguille + seringue.
- par poinçon: prélèvement d’un petit cylindre de tissu cutané de 3-4mm de largeur avec outil de forme circulaire de type «emporte-pièce».
- en excision: petite tranche/morceau ou entièreté de la masse/tumeur est retiré avec scalpel (bistouri).
Quels sont les 4 tissus de base de l’organisme?
- tissu épithélial
- cellules polarisées (différences entre côtés apical et basal)
- intimement liées
- tapissent les surfaces/cavités et forment les glandes
- rôles: barrière, protection, absorption, sécrétion - tissu conjonctif (de soutien)
- relie les 3 autres tissus ensemble
- peu de cellules mais matrice extracellulaire +++
- rôles: ancrage, échanges (nutriments et déchets), protection, défense, stockage d’énergie - tissu musculaire
- capacité de contraction via actine et myosine
- 3 types: squelettique, lisse, cardiaque
- rôles: locomotion, posture et stabilité, transit GI, circulation sanguine, ventilation pulmonaire, etc. - tissu nerveux
- composé de neurones et cellules gliales
- rôles: réception, intégration et transmission de l’information –> NEURONES
- support et protection du neurone –> CELLULES GLIALES
Décrire les niveaux d’organisation entre la cellule et l’animal entier
- TISSU = cellules + matrice extracellulaire
- ORGANE = au moins 2 tissus
- SYSTÈME = groupe d’organes qui ont des liens anatomiques et/ou fonctionnels entre eux
- ANIMAL = ensemble de tous les systèmes
Expliquer les principales étapes de la préparation de lames histologiques pour microscopie optique
- fixation: doit être rapide ++ pour préserver le tissu, utilisation du formaldéhyde car se lie aux protéines et inhibe leur activité enzymatique = arrêt du métabolisme cellulaire, entraîne un durcissement du tissu (crosslinking entre les protéines)
- déshydratation/dégagement: par série graduelle de bains d’alcool (éthanol) de 50% à 100%, puis utilisation du xylène pour que tissu devienne transparent
**étape importante car paraffine n’est pas hydrosoluble - inclusion/enrobage: tissu immergé dans solution de paraffine chaude puis refroidissement à T°pièce = solidification de la paraffine (pour faciliter la coupe)
- coupe: découpage des blocs de paraffine de 3-9 micromètres avec un microtome (appareil pour produire lames très fines)
- montage: sur lame de verre enduite de substance adhésive, déparaffiner puis réhydrater le spécimen (car les colorants sont hydrosolubles, pour bien pénétrer)
- coloration: lame de verre est colorée et recouverte d’une lamelle (colorants hydrosolubles)
Quel est l’objectif de la coloration des lames histologiques?
Mettre en évidence les différentes structures des tissus puisque les coupes sont transparentes et les densités optiques des composantes sont très similaires
Quelles est la coloration standard en histologie + ses partcularités?
HÉMATOXYLINE-ÉOSINE (HE)
- hématoxyline = colorant basique (acidophile) qui colore en bleu/mauve les structures acides (noyaux, nucléoles, ribosomes, RER)
- éosine = colorant acide (basophile) qui colore en rose/rouge les structures basiques (protéines, fibres extracellulaires, majorité des composantes du cytoplasme)
Définir ce qu’est le pouvoir de résolution en microscopie, identifier ses déterminants et comparer le pouvoir de résolution de l’oeil humain, la microscopie optique et la microscopie électronique
Pouvoir de résolution = capacité d’un système à produire des images séparées de deux éléments situés très près l’un de l’autre.
Déterminants:
- système optique (objectifs)
- longueur d’onde de la source lumineuse
microscopie optique: 1000x supérieur à l’oeil humain
microscopie électronique: 100 000x supérieur à l’oeil humain
Quels sont les éléments clés d’un microscope optique + leur rôle respectif?
- source lumineuse –> éclairer le spécimen
- condenseur –> concentrer la lumière sur l’échantillon
- diaphragmes –> régler la quantité de rayons lumineux qui traversent l’échantillon pour générer une image
- plateau –> pour déposer la lame
- objectifs –> rassembler les rayons lumineux pour générer une image agrandie
- oculaires —> agrandir l’image aux yeux de l’observateur
Différencier microscopie optique et microscopie électronique à transmission et à balayage
microscopie optique = faisceau de photons
microscopie électronique à transmission = faisceau d’électrons qui traversent l’échantillon, génère des images bidimensionnelles
*régions blanches: e- ont traversé complètement
*régions grises: e- ont partiellement traversé
*régions noires: e- n’ont pas traversé du tout
microscopie électronique à balayage = faisceau d’électrons qui ne traversent pas l’échantillon mais balayent en surface, génère des images tridimensionnelles
Expliquer les grands principes de la technique d’immunohistochimie directe et indirecte
immunohistochimie directe: utilise un anticorps primaire marqué directement pour détecter l’antigène cible
immunohistochimie indirecte: utilise un anticorps primaire non marqué suivi d’un anticorps secondaire marqué pour la détection
Quelle est l’utilité des coupes congelées et du cryomicrotome pour l’examen des tissus?
Pour éviter l’altération de certaines composantes intracellulaires causée par le formaldéhyde et la l’enrobage de paraffine mais donne une moins bonne qualité d’image
Principe –> morceau de tissu non-fixé est placé dans un enrobage visqueux puis congelé rapidement dans azote liquide, puis sections de 5 micromètres d’épaisseur produite avec cryomicrotome (microtome dans une chambre réfrigérée à -20°C/-30°C)
