MODULE 1 – ÉLEMENTS DE BASE

Question 1

Qu’est-ce que l’histologie ?

Answer 1

Science qui étudie la structure microscopique des tissus & des organes de l’animal en santé

Question 2

Expliquer la relation entre la structure & la fonction d’une cellule ou d’un tissu.

Answer 2

Structure & fonction d’une cellule ou d’un tissu = intimement reliées
- fct dicte la structure et structure détermine la fct
- physio = représentation fonctionnelle de la structure alors que anato/histo = représentation structurelle de la fct

Question 3

Qu’est-ce que le concept de différentiation cellulaire ?

Answer 3

• le fait toutes les ¢ somatiques d’un animal possèdent le même génome (car dérivent toutes de la même ¢ de départ), MAIS que chaque type cellulaire n’exprime qu’une fraction particulière du génome
• ce processus (différenciation) confère à chaque ¢ des caractéristiques & des capacités spécifiques qui sont à la base de leur grande diversité morphologique & fonctionnelle
• surtout durant vie embryonnaire, mais aussi durant toute la vie de l’animal

Question 4

Quels sont les quatre tissus de base de l’organisme ?

Answer 4

1) Tissu épithélial
2) Tissu conjonctif
3) Tissu musculaire
4) Tissu nerveux

Question 5

Quelles sont les caractéristiques principales du tissu épithélial (compo, où & fcts)?

Answer 5

• composé de ¢ polarisées & liées intimement les unes autres autres -> permet de séparer milieu intérieur de extérieur de l’organisme
• recouvre surface externe de l’organisme, tapisse cavités internes & forme les glandes
• protection mécanique, absorption, sécrétion de diverses substances

Question 6

Quelles sont les caractéristiques principales du tissu conjonctif/de soutien (compo, classification & fcts)?

Answer 6

• composé de nombre limité de ¢, mais celles-ci sont séparées par une matrice extra cellulaire abondante
• comprend tissus de soutien embryonnaires, tissus de soutien proprement dit & tissus de soutien spécialisés
• Relie structurellement & métaboliquement les 3 autres tissus de base. Assure des rôles d’ancrage, de milieu d’échange de nutriments & de déchets métaboliques, de protection & défense contre organismes étrangers et de lieu de stockage d’énergie

Question 7

Quelles sont les caractéristiques principales du tissu musculaire (compo, fct, classification)?

Answer 7

• composé de ¢ ayant la capacité de se contracter -> permet à animal de générer différents types de mouvement
• capacité découle de présence d’une qté abondante de protéines contractiles (actine & myosine) dans cytoplasme de ¢ musculaire
• 3 types : M. squelettique, M. cardiaque & M. lisse

Question 8

Quelles sont les caractéristiques principales du tissu nerveux (compo & fcts)?

Answer 8

• composé principalement de neurones (¢ nerveuses qui gèrent l’information) & de ¢ gliales (¢ qui supportent & protègent neurones)
• Reçoit, intègre & transmet l’information

Question 9

Décrire le niveau d’organisation entre la ¢ & l’animal entier.

Answer 9

Tissu: formé de ¢ & de matériel extracellulaire (proportion varie énormément d’un type tissulaire à l’autre)
Organe : composé d’au moins 2 tissus de base, mais souvent des 4. Chacun conçu pour effectuer diverses fcts spécialisées.
Système : rassemble habituellement un groupe d’organes liés anatomiquement ayant des fcts similaires ou apparentées. Peut aussi correspondre à un groupement de ¢ ayant une fct commune, mais n’étant pas disposées en continuité physique (ex: endocrinien (synthèse hormones) & immunitaire (défense organisme))
→ ensemble des systèmes contribue au fonctionnement normal de l’animal

Question 10

Expliquer les principales étapes de la préparation des lames histologiques pour la microscopie optique.

Answer 10

Fixation :
- aussi rapidement que possible après prélèvement
- formaldéhyde = agent habituellement utilisé -> se lie aux prots & inhibe leur activité enzymatique
- donc arrête métabolisme cellulaire, prévient dégradation du tissu par enzyme cellulaire ou bactérienne & entraine durcissement du tissu par réticulation induite

Inclusion & enrobage :
- T. doit être imprégné & enrobé de matériel de support rigide = paraffine
- comme paraffine ≠ soluble dans milieu aqueux, de petits morceaux de T. placés à l’intérieur d’une cassette sont déshydratés dans bains d’éthanol, puis plongés dans solution de xylène puis immergés dans solution paraffine chaude
- solidification induit par refroidissement de paraffine à température pièce
Coupe, montage & coloration :
- Blocs paraffine durcie contenant T. sont placés dans microtome & coupés en 3-9 µm
- chaque coupe → place sur lamelle de verre enduite de substance adhésive, puis est colorée & recouverte d’une lamelle

Question 11

Quel est l’objectif et les concepts de base de la coloration des lames histologiques

Answer 11

• Nécessaire, car coupes -> transparentes et sans couleur & densités optiques des composantes des T. tellement similaires qu’il est impossible de les différencier en microscopie photonique
• Majorité des colorants = hydrosolubles -> coupes doivent être déparaffinées & réhydratées avant d’être colorées
• Plusieurs colorants → utilisés en raison de leurs affinités distinctes envers divers éléments cellulaires/tissulaires
• En général, colorants = substances acides (attirées par composantes tissulaires basiques) ou basiques (attirées par composantes tissulaires acides)

Question 12

Quelle est la coloration standard utilisée en histologie et ses particularités ?

Answer 12

Hématoxyline-éosine = combinaison de 2 colorants la + utilisée en histologie
- coloration de routine pour grande majorité des photos/lames
- hématoxyline = colorant basique (donc acidophile) qui colore bleu/violet le noyau & ribosomes, alors que éosine = colorant acide qui colore rose/rouge pâle majorité des composantes du cytoplasme & prots de matrice extracellulaire

Question 13

Qu’est-ce que le pouvoir de résolution d’un système en microscopie?

Answer 13

Le pouvoir de résolution d’un système correspond à sa capacité à produire des images séparées de 2 éléments situés très près l’un de l’autre

Question 14

Quels sont les déterminants du pouvoir de résolution ?

Answer 14

Dépend, entre autres, du système optique (les objectifs) & de la longueur d’onde de la source lumineuse

Question 15

Classer les pouvoirs de résolution de l’oeil humain, de la microscopie optique & de la microscopie électronique

Answer 15

Résolution oeil humain >microscopie optique > microscopie électronique à transmission > microscopie électronique à balayage

Question 16

Quels sont les éléments clés d’un microscope optique et leur fonction respective ?

Answer 16

1) source lumineuse → éclaire spécimen
2) condensateur → concentre lumière sur échantillon
3) diaphragmes → règle qté de rayons lumineux arrivant sur section histologique
4) plateau → lame y est déposée
5) objectifs →rassemblent rayons lumineux ayant traversé échantillon & génère image intermédiaire agrandie
6) oculaire → agrandissent image intermédiaire & la présente aux yeux de l’observateur

Question 17

Qu’est-ce que l’immunohistochimie ?

Answer 17

C’est une technique spécialisée permettant de détecter présence d’une protéine spécifique à l’intérieur d’un tissu à l’aide d’un anticorps dirigé contre la protéine d’intérêt & associé à un système de révélation

Question 18

Quels sont les grands principes de la technique d’immunohistochimie directe ?

Answer 18

L’anticorps dirigé contre la protéine est marqué directement avec conjugué fluorescent ou la peroxydase.

Question 19

Quels sont les grands principes de la technique d’immunohistochimie indirecte ?

Answer 19

Un anticorps primaire généré contre protéine d’intérêt est incubé avec la coupe, puis cette dernière est incubée avec un second anticorps produit chez une espèce différente contre les anticorps de l’espèce chez laquelle l’anticorps primaire a été généré. C’est ce second anticorps qui est marqué avec un conjugué fluorescent ou une enzyme.

Question 20

Quelle est la technique la plus intéressante entre l’immunohistochimie directe & indirecte et pourquoi?

Answer 20

Indirecte, car l’utilisation d’un anticorps secondaire amplifie le signal obtenu → rend technique + sensible
De plus, contrairement à immunohistochimie directe où chaque anticorps primaire doit être conjugué à un marqueur, la conjugaison d’un anticorps secondaire généré chez une espèces peut être utilisée contre des centaines/milliers d’anticorps primaires produits chez une autre espèce, contre autant de protéines spécifiques.