microscopie Flashcards
quelle est la différence entre un microscope simple et composé?
le microscope simple n’a qu’une seule lentille
Le microscope composé utilise un objectif ainsi qu’un oculaire
quels sont les trois types de microscopes composés utilisés en laboratoire
microscope droit
Microscope inversé
stéréomicrosope
quel est l’avantage/désavantage du microscope droit
c’est le plus cheap
permet pas d’observer des organismes vivants/dans un contenant
quel est l’Avantage/désavantages du microscope inversé
permet d’oberserver des cellules en croissance
coût plus élevé que microscope droit
quel est l’avantage/désavantages du stéréomicroscope
permet d’obtenir une image en trois dimensions/ pas besoin de changer d’objectif
grossissement assez faible
quelle est la différence entre l’illumination à lumière transmise et réfléchie? donner des techniques qui utilisent ces types d’illumination
la source de lumière est du coté opposé de l,échantillon dans transmis, puis du même coté dans réfléchie.
transmi: champ clair
réfléchie: fluorescence
à quoi sert le condenseur et le diaphragme?
le concenseur permet de concentrer la lumière sur l’échantillon et illumine celle-ci
Le diaphragme permet de réduire ou d’augmenter la luminosité
quel est l'effet de l'ouverture du diaphragme sur les facteurs suivants: luminosité résolution Profondeur de champs contraste
luminosité plus forte
plus haute résolution
plus faible profondeur de champ
plus faible contraste
qu’est ce que la résolution d’un objectif?
la capacité de celui-ci à séparer deux objets qui sont très près l’un de l’autre
qu’est ce qui arrive lorsqu’on utilise un utilise un objectif dont l’ouverture numérique est plus grande?
on devrait obtenir une meilleur résolution
pourquoi doit on utiliser des milieux d’immersions avec des objectifs à haut grossissement.
Ces objectifs ont besoin d’une résolution plus importante et des ouvertures numériques énormes ont besoin d’un milieu d’immersion
qu’Est ce que la microscopie en champ clair
la microscopie habituelle
Qu’est ce que la microscopie à contraste de phase
une technique permettant d’observer des spécimènes qui offrent généralement peu de contrastes et sont difficile à visualiser
Quel type de microscopie requiert des objectifs avec la notion PH
La microscopie à contraste de phase
qu’Est ce que la miscoscopie à contraste interférentiel
une technique similaire au contraste de phase mais qui permet aussi de produire un effet quasi-3D
qu’est ce que le photoblanchiment
La perte de la fluorescence d’un fluorophore lorsque celui-ci est excité trop longtemps
quelle est la différence entre les fluorophores non-conjugués et les fluorophores conjugués?
les fluorophores non conjugués ont une affinité pour des structures ou deviennent fluorescent lorsqu’ils se lient à une molécule
Les fluorophores conjugués ne sont pas spécifiques à une structure particulière dans la cellule mais sont liés à une molécule qui l’est.
quelle est la différence entre des fluorophores conjugés et l’immunofluorescence
Dans les deux cas, les fluorophores sont conjuguée à quelqueschoses.
Les fluo conjugués sont bindé à des molécules spécifiques
L’immuno sont bindé à des anticorps.
quelle est la différence entre l’immunofluorescence directe et indirecte
l’anticorps conjugué au fluorophore peut binder directement sur l’antigène ou binder à un anticorps primaire
qu’est ce que le FISH?
Une technique de microscopie à fluorescence qui cible des acides nucléiques.
à quoi servent ces molécules? -Phalloidine Wheat germ agglutinin Annexine V DEVD
Phalloidine: toxine se liant à l’actine
WGA: lectine qui se lie à certain sucres des membranes
Annexine: Protéine qui se lie à la phosphatidylsérine, un phospholipide associé à l’apoptose.
DEVD: peptide se liant à la caspase 3. une protéine déclanchant l’apoptose
Ce sont toutes des molécules auxquelles on peut conjuguer un fluorophore pour révéler une structure particulière.
quels sont les trois types de microscopie à fluorescence
épifluorescence
confocal à balayage laser
confocal à disque rotatif
comment la microscopie à fluorescence confocal permet-elle de construire des images en 3D
elle prend les photos en ‘‘étage’’ dans l’axe des Z puis assemble les photos pour créer une image en 3D.
quelle technique de microscopie à fluorescence donne des images avec le moins de ‘‘bruit de fond’’ et avec le plus de bruit de fond?
moins: balayage laser
plus: épifluorescence
qu’est ce que la miscoscopie multi-photons. quel est son avantage?
Une technique de microscopie fluorescente où l’excitation des fluorophores se fait seulement au plan focal, le plan qu’on regarde, plutot que dans la coupe entière.
Cette technique réduit le photoblanchiment
quelle est la principale différence dans la microscopie optique et electronique?
Électronique utilise un faisceau d’électron plutot que de photons.
quelles sont les deux types de microscopie électronique?
Transmission TEM
Balayage SEM