microscopes Flashcards
taille moyenne de la cellule
20 microm
tout d’abord, on avait
microscopes optiques + photoniques
puis on va mettre a profit
rayonnements + efffets physiques
microscope c’est s optique composé
d’au moins 2 lentilles convergentes
puissance est aussi appelle
grossissement
puissance - grossissement c’est un
produit su grossissement de l’objectif et de l’oculaire
resolution est egale a
distance minimale entre 2 points contigus
resolution: formule
0.61* lambda / n sin alpha
puissance ou grossissement c’est
rapport de l’angle sous lequel l’observateur voit l’objet sur angle sous lequel ons l verrait sans micro
n c’est
indice de reffraction
alpha -
demi angle du cone de vision
+ puissance importante
+ objet doit etre proche
il y a … modes differentes du travail
3
transmission
reflexion
reemission
transmission compte … modes diff:
2
absorption - lumiere blanche
contraste de phase - theorie ondulatoire
on a besoin de 2 photons de meme longueur pour travailler en
contrastede phase
preparation doit avoir les points de reffraction … pour avoir une difference de phase
differents
difference de phase depend de 2 choses
truc 1: epaisseur
truc 2: difference d’indice de r
frenges d’interference ou fentes de Young sont typiques pour micro en phase de
contraste de phase
difference de phase est
invisible
difference d’amplitude est
visible
diagramme de Jablonski c’est pour micro en phase de
fluorescence
UV
400 nm
IR >
800 nm
role des anneaux de phase: 2
- arrete rayons transmis
capte diffracté
contraste de phase n’est pas possible pour
coupes histo
c de phase esr applicable aux
cellules en culture
reflexion capte
rayons reflechis par les parois
reflexion ne donne pas l’image de
la structure interne, slmt surface
reflexion n’est pas applicabe aux
coupes histo - de tissus
intensite +++ dans microscope
en reflexion
eclairage … permet de collecter + de rayons reflechis
lateral
loupes binoc, stereomicroscopes , au fond noir- 3 types de m en
reflexion
reemision jour sur la theorie
quantique de la lumiere
photon illuminant peut etre capte par
orbitales peripheriques
on utilise les lampes de mercure ou laser en
reemission
les enzymes lytiques sont dans les
peroxysomes, lysosomes..
liste de procedures:
- fixation ( aldehydes + parrafine )
- deshydratation (alcools >) + xylene
- enrobage - paraffine
- coupe
- rehydratation
- observation
fixation est par
formol, glutaraldehydes dilués
temperature paraffine fixation:
50 degres
apres fixation, l’eau reste le … abondant
plus
temperature de p en enrobage
50-60 degres
xylene tue les
lipides
enrobage est longue, car parrafine est
+ visqueuse
microtome donne coupes
qq microns - dixaines de microns
porte objets sont enduites d’une solution d’
ovalbumine ()
duree de chaque bain de rehydratation se fait en
1 min