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microscopes Flashcards

1
Q

taille moyenne de la cellule

A

20 microm

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2
Q

tout d’abord, on avait

A

microscopes optiques + photoniques

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3
Q

puis on va mettre a profit

A

rayonnements + efffets physiques

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4
Q

microscope c’est s optique composé

A

d’au moins 2 lentilles convergentes

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5
Q

puissance est aussi appelle

A

grossissement

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6
Q

puissance - grossissement c’est un

A

produit su grossissement de l’objectif et de l’oculaire

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7
Q

resolution est egale a

A

distance minimale entre 2 points contigus

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8
Q

resolution: formule

A

0.61* lambda / n sin alpha

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9
Q

puissance ou grossissement c’est

A

rapport de l’angle sous lequel l’observateur voit l’objet sur angle sous lequel ons l verrait sans micro

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10
Q

n c’est

A

indice de reffraction

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11
Q

alpha -

A

demi angle du cone de vision

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12
Q

+ puissance importante

A

+ objet doit etre proche

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13
Q

il y a … modes differentes du travail

A

3
transmission
reflexion
reemission

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14
Q

transmission compte … modes diff:

A

2
absorption - lumiere blanche
contraste de phase - theorie ondulatoire

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15
Q

on a besoin de 2 photons de meme longueur pour travailler en

A

contrastede phase

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16
Q

preparation doit avoir les points de reffraction … pour avoir une difference de phase

A

differents

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17
Q

difference de phase depend de 2 choses

A

truc 1: epaisseur

truc 2: difference d’indice de r

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18
Q

frenges d’interference ou fentes de Young sont typiques pour micro en phase de

A

contraste de phase

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19
Q

difference de phase est

A

invisible

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20
Q

difference d’amplitude est

A

visible

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21
Q

diagramme de Jablonski c’est pour micro en phase de

A

fluorescence

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22
Q

UV

A

400 nm

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23
Q

IR >

A

800 nm

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24
Q

role des anneaux de phase: 2

A
  1. arrete rayons transmis

capte diffracté

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25
contraste de phase n'est pas possible pour
coupes histo
26
c de phase esr applicable aux
cellules en culture
27
reflexion capte
rayons reflechis par les parois
28
reflexion ne donne pas l'image de
la structure interne, slmt surface
29
reflexion n'est pas applicabe aux
coupes histo - de tissus
30
intensite +++ dans microscope
en reflexion
31
eclairage ... permet de collecter + de rayons reflechis
lateral
32
loupes binoc, stereomicroscopes , au fond noir- 3 types de m en
reflexion
33
reemision jour sur la theorie
quantique de la lumiere
34
photon illuminant peut etre capte par
orbitales peripheriques
35
on utilise les lampes de mercure ou laser en
reemission
36
les enzymes lytiques sont dans les
peroxysomes, lysosomes..
37
liste de procedures:
1. fixation ( aldehydes + parrafine ) 2. deshydratation (alcools >) + xylene 3. enrobage - paraffine 4. coupe 5. rehydratation 6. observation
38
fixation est par
formol, glutaraldehydes dilués
39
temperature paraffine fixation:
50 degres
40
apres fixation, l'eau reste le ... abondant
plus
41
temperature de p en enrobage
50-60 degres
42
xylene tue les
lipides
43
enrobage est longue, car parrafine est
+ visqueuse
44
microtome donne coupes
qq microns - dixaines de microns
45
porte objets sont enduites d'une solution d'
ovalbumine ()
46
duree de chaque bain de rehydratation se fait en
1 min
47
il y a 2 colorants
cytochim/ histochim signaletiques/ topographiques
48
signaletiques/topo ont affinite
faible
49
cytochim/hitochim ont affinite
specifique
50
les colorants signaletiques ou topo sont
hematoxyline, eosine, bleus
51
hemaxyline: colorant ... colore .... region dite ...
basique noyau, an, lysosomes, REG basophile
52
eosine: colorant ... colore ... region dite ...
acide proteines, vesicules de secretion proteiques, appareil contractile des muscles acidophile / eosinophile
53
trichrome de masson:se fixe
sur les glucides de la MEC du TC - marron!
54
May Grumvald Giemsa contient
methylene bleu + eosine
55
GM utile est de
* 1000
56
on congele echantillon ... par ...
directement + CO2
57
on realise des coupes
plus epais
58
les coupes extemporanees sont pas
fixes -> enzymes actives
59
on peut analyser grace au congelation .... des enzymes, mais aussi les
activite + localisation | lipides visualisables
60
sur frottis: les enzymes
ne fonctionnenet pas, car ipso facto inactives
61
boite de petri: max grossissement
X5
62
puissance max est de
X40
63
toutes les techniques sont applicables au microscope
inverse, mais +++ fluo, trans->absorption, contrastes de phase
64
GM de stereo:
80
65
GM aux UV
1.000
66
resolution --- avec
fluorescence
67
deconvolution:
bille calibree
68
confocal: usage
fluo + transmission - visible
69
meme si on utilise confocal, la
petite partie de l'intensite des points voisins va etre detectee
70
confocal:
2 types | 2D -> 3D
71
on peut voir des coupes de 100 microm grace au
m confocal
72
Ruska 1929
ME
73
resolution pratique ME
2-3 nm | 100 fois mieux que MO
74
MET: bref
``` 2 fixations (OSO4) + glutaraldehyde enrobage araldite, cyanolite, metacrylate ```
75
coupes MET sont
ultrafines -> 50 nm
76
on utilise ultramicrotome pour
MET
77
on fait l'enrobage avant
l'inclusion
78
resines epoxy: +++ pour
MET
79
MEB ou SEM: travaillent
en reflexion donne image de surface ombrage metallique - vaporise Pb ou Au - angle oblique - MEB
80
electrones IIaires -
MEB
81
localisation cell vivantes:
GFP, FRAP, sondes metabo
82
on place GFP sur
3'
83
marquage spe de proteine, possib de recommencer l'analyse caracterise les
FRAP
84
photodegradation est
irreversible
85
FURA2 +:
vagues Ca2+
86
Carboxyfluorescine:
pH
87
rhodamine123
mito vivantes et actives
88
rhodamine 123 ne met pas en evidence des
lysosomes
89
PAS: cellules
mortes
90
PAS: ouvre les cycles grace au
acide periodique IO4H
91
IO4H trouve les
groupements alpha glycol vicinaux COH_COH
92
puis on applique le r de Schniff qui colore en rouge si on a des
polysacch
93
alpha amylase elimine
glycogene
94
si on colore, c'est
pas glycogene
95
si reste incolore
il s'agit de glycogene
96
peroxydases sont mis en evidence par | couleur est
H2O2 + DAB | brun doré
97
MET: x
500. 000
98
MEB: x
100.000
99
anticorps qui reconnait un epitope est un
ac monoclonal
100
anticorps sur 2 ag diff -
commun, partagé
101
CAM peut etre
Ca2+ dependante ou pas
102
SAM determine les
polysaccharides
103
compte globule mesure
la resistance
104
L’intensité du courant est proportionnelle à la
diminution de surface de l’orifice
105
cytometre de flux: 4 etapes
1. suspesion + fluorochromes sur ac 2. suspension passe dans un capillaire 3. flux eclaire par laser 4. sortie du c-re, gouttes + charges e (champ magnetique)
106
FAcS c'est
Fluorescence activator cell center
107
lyse menagee:
RE -> microsomes, vesicules
108
lyse mecanique:
uktrasons, cavitation, lyse osmotique
109
au dela de 10.000 g, on parle de
ultracentrifugation
110
on utilise de saccharose dans la
centrifugation differentielle
111
cohesines ne persistent pas que
centromere
112
bras long
q
113
bras court
p petit
114
constrictions 2aires sont sous
les telomeres
115
5 paires avec satellites
13 14 15 21 22
116
impedancemetrie caracterise
compte - globule

ue3 (2 decks)

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