microscopes Flashcards

1
Q

taille moyenne de la cellule

A

20 microm

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2
Q

tout d’abord, on avait

A

microscopes optiques + photoniques

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3
Q

puis on va mettre a profit

A

rayonnements + efffets physiques

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4
Q

microscope c’est s optique composé

A

d’au moins 2 lentilles convergentes

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5
Q

puissance est aussi appelle

A

grossissement

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6
Q

puissance - grossissement c’est un

A

produit su grossissement de l’objectif et de l’oculaire

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7
Q

resolution est egale a

A

distance minimale entre 2 points contigus

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8
Q

resolution: formule

A

0.61* lambda / n sin alpha

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9
Q

puissance ou grossissement c’est

A

rapport de l’angle sous lequel l’observateur voit l’objet sur angle sous lequel ons l verrait sans micro

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10
Q

n c’est

A

indice de reffraction

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11
Q

alpha -

A

demi angle du cone de vision

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12
Q

+ puissance importante

A

+ objet doit etre proche

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13
Q

il y a … modes differentes du travail

A

3
transmission
reflexion
reemission

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14
Q

transmission compte … modes diff:

A

2
absorption - lumiere blanche
contraste de phase - theorie ondulatoire

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15
Q

on a besoin de 2 photons de meme longueur pour travailler en

A

contrastede phase

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16
Q

preparation doit avoir les points de reffraction … pour avoir une difference de phase

A

differents

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17
Q

difference de phase depend de 2 choses

A

truc 1: epaisseur

truc 2: difference d’indice de r

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18
Q

frenges d’interference ou fentes de Young sont typiques pour micro en phase de

A

contraste de phase

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19
Q

difference de phase est

A

invisible

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20
Q

difference d’amplitude est

A

visible

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21
Q

diagramme de Jablonski c’est pour micro en phase de

A

fluorescence

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22
Q

UV

A

400 nm

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23
Q

IR >

A

800 nm

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24
Q

role des anneaux de phase: 2

A
  1. arrete rayons transmis

capte diffracté

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25
Q

contraste de phase n’est pas possible pour

A

coupes histo

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26
Q

c de phase esr applicable aux

A

cellules en culture

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27
Q

reflexion capte

A

rayons reflechis par les parois

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28
Q

reflexion ne donne pas l’image de

A

la structure interne, slmt surface

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29
Q

reflexion n’est pas applicabe aux

A

coupes histo - de tissus

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30
Q

intensite +++ dans microscope

A

en reflexion

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31
Q

eclairage … permet de collecter + de rayons reflechis

A

lateral

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32
Q

loupes binoc, stereomicroscopes , au fond noir- 3 types de m en

A

reflexion

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33
Q

reemision jour sur la theorie

A

quantique de la lumiere

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34
Q

photon illuminant peut etre capte par

A

orbitales peripheriques

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35
Q

on utilise les lampes de mercure ou laser en

A

reemission

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36
Q

les enzymes lytiques sont dans les

A

peroxysomes, lysosomes..

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37
Q

liste de procedures:

A
  1. fixation ( aldehydes + parrafine )
  2. deshydratation (alcools >) + xylene
  3. enrobage - paraffine
  4. coupe
  5. rehydratation
  6. observation
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38
Q

fixation est par

A

formol, glutaraldehydes dilués

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39
Q

temperature paraffine fixation:

A

50 degres

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40
Q

apres fixation, l’eau reste le … abondant

A

plus

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41
Q

temperature de p en enrobage

A

50-60 degres

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42
Q

xylene tue les

A

lipides

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43
Q

enrobage est longue, car parrafine est

A

+ visqueuse

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44
Q

microtome donne coupes

A

qq microns - dixaines de microns

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45
Q

porte objets sont enduites d’une solution d’

A

ovalbumine ()

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46
Q

duree de chaque bain de rehydratation se fait en

A

1 min

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47
Q

il y a 2 colorants

A

cytochim/ histochim

signaletiques/ topographiques

48
Q

signaletiques/topo ont affinite

A

faible

49
Q

cytochim/hitochim ont affinite

A

specifique

50
Q

les colorants signaletiques ou topo sont

A

hematoxyline, eosine, bleus

51
Q

hemaxyline:
colorant …
colore ….
region dite …

A

basique
noyau, an, lysosomes, REG
basophile

52
Q

eosine:
colorant …
colore …
region dite …

A

acide
proteines, vesicules de secretion proteiques, appareil contractile des muscles
acidophile / eosinophile

53
Q

trichrome de masson:se fixe

A

sur les glucides de la MEC du TC - marron!

54
Q

May Grumvald Giemsa contient

A

methylene bleu + eosine

55
Q

GM utile est de

A
  • 1000
56
Q

on congele echantillon … par …

A

directement + CO2

57
Q

on realise des coupes

A

plus epais

58
Q

les coupes extemporanees sont pas

A

fixes -> enzymes actives

59
Q

on peut analyser grace au congelation …. des enzymes, mais aussi les

A

activite + localisation

lipides visualisables

60
Q

sur frottis: les enzymes

A

ne fonctionnenet pas, car ipso facto inactives

61
Q

boite de petri: max grossissement

A

X5

62
Q

puissance max est de

A

X40

63
Q

toutes les techniques sont applicables au microscope

A

inverse, mais +++ fluo, trans->absorption, contrastes de phase

64
Q

GM de stereo:

A

80

65
Q

GM aux UV

A

1.000

66
Q

resolution — avec

A

fluorescence

67
Q

deconvolution:

A

bille calibree

68
Q

confocal: usage

A

fluo + transmission - visible

69
Q

meme si on utilise confocal, la

A

petite partie de l’intensite des points voisins va etre detectee

70
Q

confocal:

A

2 types

2D -> 3D

71
Q

on peut voir des coupes de 100 microm grace au

A

m confocal

72
Q

Ruska 1929

A

ME

73
Q

resolution pratique ME

A

2-3 nm

100 fois mieux que MO

74
Q

MET: bref

A
2 fixations (OSO4) + glutaraldehyde
enrobage araldite, cyanolite, metacrylate
75
Q

coupes MET sont

A

ultrafines -> 50 nm

76
Q

on utilise ultramicrotome pour

A

MET

77
Q

on fait l’enrobage avant

A

l’inclusion

78
Q

resines epoxy: +++ pour

A

MET

79
Q

MEB ou SEM: travaillent

A

en reflexion
donne image de surface
ombrage metallique - vaporise Pb ou Au - angle oblique - MEB

80
Q

electrones IIaires -

A

MEB

81
Q

localisation cell vivantes:

A

GFP, FRAP, sondes metabo

82
Q

on place GFP sur

A

3’

83
Q

marquage spe de proteine, possib de recommencer l’analyse caracterise les

A

FRAP

84
Q

photodegradation est

A

irreversible

85
Q

FURA2 +:

A

vagues Ca2+

86
Q

Carboxyfluorescine:

A

pH

87
Q

rhodamine123

A

mito vivantes et actives

88
Q

rhodamine 123 ne met pas en evidence des

A

lysosomes

89
Q

PAS: cellules

A

mortes

90
Q

PAS: ouvre les cycles grace au

A

acide periodique IO4H

91
Q

IO4H trouve les

A

groupements alpha glycol vicinaux COH_COH

92
Q

puis on applique le r de Schniff qui colore en rouge si on a des

A

polysacch

93
Q

alpha amylase elimine

A

glycogene

94
Q

si on colore, c’est

A

pas glycogene

95
Q

si reste incolore

A

il s’agit de glycogene

96
Q

peroxydases sont mis en evidence par

couleur est

A

H2O2 + DAB

brun doré

97
Q

MET: x

A
  1. 000
98
Q

MEB: x

A

100.000

99
Q

anticorps qui reconnait un epitope est un

A

ac monoclonal

100
Q

anticorps sur 2 ag diff -

A

commun, partagé

101
Q

CAM peut etre

A

Ca2+ dependante ou pas

102
Q

SAM determine les

A

polysaccharides

103
Q

compte globule mesure

A

la resistance

104
Q

L’intensité du courant est proportionnelle à la

A

diminution de surface de l’orifice

105
Q

cytometre de flux: 4 etapes

A
  1. suspesion + fluorochromes sur ac
  2. suspension passe dans un capillaire
  3. flux eclaire par laser
  4. sortie du c-re, gouttes + charges e
    (champ magnetique)
106
Q

FAcS c’est

A

Fluorescence activator cell center

107
Q

lyse menagee:

A

RE -> microsomes, vesicules

108
Q

lyse mecanique:

A

uktrasons, cavitation, lyse osmotique

109
Q

au dela de 10.000 g, on parle de

A

ultracentrifugation

110
Q

on utilise de saccharose dans la

A

centrifugation differentielle

111
Q

cohesines ne persistent pas que

A

centromere

112
Q

bras long

A

q

113
Q

bras court

A

p petit

114
Q

constrictions 2aires sont sous

A

les telomeres

115
Q

5 paires avec satellites

A

13 14 15 21 22

116
Q

impedancemetrie caracterise

A

compte - globule