Microscope Flashcards
Indice de réfraction
- caractérise quoi ?
- formule
Caractérise un milieu translucide, aptitude d’un milieu à ralentir les photons
n=c/v
Dioptre
Interface entre deux milieux translucides d’indices de réfraction différents
Lentille
- Système optique centré, formé de 2 dioptres dont l’un au moins est sphérique
- Permet d’infléchir les rayonnements pour agrandir l’image
Séparation ou Résolution
Distance minimum qui doit exister entre 2 points contigus pour être correctement discernés au travers d’un système optique
Formule résolution
R= 0,61lambda/ n.sina
Pouvoir de résolution
Inverse de la résolution maximale. Caractérise un système optique grossissant et déterminé la taille minimum d’un objet discernable/ la capacité d’agrandissement d’une image
Formule: 1/Rmax
+ résolution est petite plus grand sera le pouvoir de résolution
Microscope
Système optique grossissant composé d’au moins 2 lentilles convergentes appelés objectif et oculaire
Caractérisé par son grossissement (objectif x oculaire) et sa résolution
3 modes de fonctionnement du MO
Transmission
Réflexion
Reemission
Microscope a Transmission
- Que fait la lumière ?
- Comment doit être l’objet ?
- Les deux effets et leurs caractéristiques
- la lumière traverse l’objet à visualiser
- l’objet doit être translucide
- effets: absorption et contraste de phase
Microscope a Transmission par Absorbtion
Seuls les rayons non absorbés par l’objet sont vus par l’observateur.
Lumière blanche polychr =>image colorée
Lumière monochromatique => nuance d’intensité
Microscope a transmission à contraste de phase
- principe
- relief ou coupe ?
- obs cellules vivantes possible ou non ?
- Contraste de phase: transforme une différence de phase des photons réfractés en différence d’amplitude
- que pour relief
- pas de coupe
- obs cellule vivante possible car pas fixation obligatoire
Microscope a Réflexion
- principe
- quel type d’image : relief ou structure interne ?
- utilisé dans quel type de microscopie ?
- ne capte que les rayons réfléchis par les parois de la préparation
- éclairage latéral de l’objet
- donne image de la surface des objets en relief
- loupes binoculaires, stéréo microscopes, microscopes chirurgicaux, microscopes à fond noir
Microscope a Reemission
- principe
- excitation et reemission dans quel domaine ?
- désavantages
- besoin d’une illumination faible ou importante ?
- microscopie en fluorescence
- photons illuminent les molécules fluorescentes de l’objet sont captés par des molécules instables et réémisent à une longueur d’onde différente
- excitation dans l’UV et réémission dans le visible
- Perte de signal car photon réémis dans toute les direction
- seule faible fraction réémise en direction de l’objectif est perçu
- besoin d’une illumination importante (toxique) des Uv à faible longueur d’onde
Conditions d’observations des cellules d’un tissu
- doit être translucide
- tranche tres minces: 5 à 10 micromètre
Pourquoi fixe-t-on les tissus ?
Pour les immobiliser dans un état proche du vivant pour éviter l’écrasement des tissus et la libération d’enzymes lytiques
