Microbiologia Flashcards
Come funziona la colorazione di Gram?
Dopo aver messo il materiale in fisiologica e fissato (fiamma o metanolo), si colora prima con violetto di genziana (o cristalvioletto), che penetra in tutti i batteri. Poi si aggiunge liquido di lugol, a base di iodio iodurato di potassio (mordenzante), che crea un mega complesso che non riesce più a uscire dai gram positivi. Si risciacqua con Alcol (10 secondi), che restringe la parete dei gram positivi (ricca di peptidoglicano), mentre scioglie la piccola parete dei gram negativi. Infine si colora con Fucsina basica (o safranina), la controcolorazione.
Come funziona la Ziehl Neelsen?
Carbol fucsina (fucsina fenicata, che ha già mordenzante, l’acido fenico), poi si SCALDA SU FIAMMA, poi alcol acido che toglie la colorazione a tutti tranne agli alcol-acido resistenti (micobacterium). Poi blu di metilene come controcolorazione. 100x con olio di cedro.
Come funziona l’auramina rodamina?
Si mette auramina rodamina per 15 minuti, poi alcol acido, poi permanganato di potassio per 2 minuti max
Come funziona il blu di lattofenolo?
Colorazione con lattofenolo cotton blu e idrossido di potassio 10%, per colorare la chitina di funghi e muffe
Wirtz Conkling?
Verde di malachite e safranina
Inchiostro di china?
Per criptococcus neoformans
Quali sono i principali terreni di coltura?
- Sangue (cos) come terreno non selettivo ma un po’ differenziale: per vedere alfa e beta emolisi
- Cioccolato (pvx) per gli esigenti (neisserie, emofilus)
- MSA (mannitol salt) per stafilococchi (alofili) e per aureus (giallo perché fermenta il mannitolo)
- CNA: colixina acido nalidixico per gram +
- Mac Conkey: sali biliari e cristal violetto per gram -
- Sabouraud (destrosio, pH 5.5) per lieviti e muffe
- Hekton Enteric (per feci), rossi i fermentanti di salicina e saccstodio, verdi i non fermentanti
- SS agar (precipitato nero per salmonella e proteus (sodio tiosolfato è fonte di zolfo per produzione di H2S).
- Schaedler: anaerobi
Aspetto di alcune colonie
- Pseudomonas: verde (piocianina, pioverdina)
- Coli: piccolo e biancastro
- Aureus: giallo
- Klebsiella Pnemoniae: mucoso, grosso
Coli fermenta il lattosio?
Sì
UFC
Unità formanti colonie, ossia numero di batteri vivi su ml. Si fa una diluizione 1ml materiale in 9ml fisiologica, poi si prosegue con diluizioni (fino a 1:1000) e si seminano 0,1ml su piastre diverse.
Infezioni urinarie, spesso a causa di?
Coli, proteus, providencia, klebsiella (fermentanti); pseudomonas aeruginosa (non fermentante), candida, enterococchi (gram positivi).
Che campioni si usano per l’esame delle urine?
Mitto intermedio (per scartare gli stafilo e strepto esterni), sacchetto neonatale, catetere (clamp), puntura. Almeno 2ml, raccogliere prima di terapie. Conservabile in frigo per 12-24h.
Dove si seminano le urine?
Muller Hinton per la conta CFU/ml; Mac Conckey per gram negativi ed enterobatteri vari; SDA, cromogeni per urine es CLED. Positività 10’5 per uomini, 10’3 per donne.
Fasi di istologia?
Prelievo ed eventuale fissazione, descrizione macroscopica e taglio in biocassetta, disidratazione con scala crescente alcolica e chiarificazione in xilene per togliere residui di alcol; inclusione in paraffina e taglio al microtomo; colorazioni, montaggio del coprivetrino (balsamo montante)
Fasi di citologia
Prelievo di cellule (centrifuga, pellet), esfoliazione, FNA; fissazione es con spray o metanolo; citoincluso, ThinPrep. Colorazioni con Papanick; May Grunwald Giemsa, IHC.
Principali cause di meningiti
Influenzae, neisseria m, coli, streoti agalactie, listeria monocitogenes, hemofilus influenze, strepto pneumoniae, criptococcus neoformans (immunocompromessi)
Quando si fa l’analisi del liquor?
Per sospetta meningite, affianca l’emocoltura. Su cioccolato, thayer martin, SDA, mac conckey, lowenstein jensen.
Fluidificante
Ditiotreitolo
Emocolture
Flacone 1:10 anticoagulanti e resine; incubazione in BactAlert, poi esame vetrino e colturale (sangue, cioccolato, Schedler, SDA, MacC
Vie aeree superiori
Tampone orofaringeo, per faringotonsilliti (streptococcus piogenes), meningiti (pneumonie), difteriti etc. Trasporto in terreno di Steuart in cui può conservarsi max 24h a T amb. Su sangue, MSA, McC, CNA, e solo a richiesta: chochy e SDA
Vie aeree inferiori
Per strepto pneumonie, hemofilus, aureus, pseudomonas. su Espettorato, sputo, BAL, broncoaspirato. Per tubercolosis servono 3 campioni a 30 mins l’uno. Fluidificazione con N actetil cisteina o Ditiotreitolo. Test di Bartlett o Watteau per idoneità: epiteliali meno di 10, PMN più di 25.
Esame Feci
Su McC, SS, dopo arricchimento (brodo tetrationato o selenite). su richiesta: campy agar, SDA, CIN.
