metodos estudos histologia Flashcards
etapas preparação da célula E SUBSTANCIAS USADAS
1- fixação (preserva o tecido, evita ação de enzimas)
2- inclusão = desidratação + clareamento + infiltração parafina (consistência)
3- cortar
4- coloração (basófilos e acidófilos)
tipos de fixação
FISICA (congelamento) E QUIMICA (formaldeído ou glutaraldeído)
fixação dupla: glutaraldeído tamponado + peróxido de ósmio. Serve para dar mais contraste aos lipídeos e proteínas
substancias utilizadas na inclusão
parafina (mic. luz)
**TB PODE USAR RESINA PLASTICA
resinas (eletonico e luz)
***MAS NO ELETRONICO É SÓ REINA EPÓXI
como se faz a incluisão e suas fases
desidratação - etanol (CRESCENTE)
clareamento - xilol
infiltração - parafina quente
DEPOIS QUE A PARAFINA ESFRIA, ELA SOLIDIFICA E SE TORNA RÍGIDA.
ENTÃO PODE SER CORTADA.
APÓS SER CORTADA, OS CORTES SÃO COLOCADOS PARA FLUTUAR EM AGUA QUENTE ANTES DE SEREM COLOCADOS NA LÂMINA, ONDE SERÃO CORADOS
quando se usa fixação por congelamento?
QUAIS COMPONENTES ELA PRESERVA?
COMO É CHAMADO SEU MICRÓTOMO?
estudo de enz, prot, pois não as inativa como na fixação química
estudo de lipideos tb, pq o xilol os dissolve na fixaçao química
CRIOSTATO
cor da hematoxilina e da eosina e qual parte da cél é corada por elas
hemato = nucleo e outras partes acidas
eosina = citoplasma e colágeno
impregnação metálica
muito usada em tecidos nervosos
parte óptica do microscópio
QUAL A FUNÇÃO DE CADA UMA
lente ocular
lente objetiva
condensador
CONDENSADOR = CONCENTRA A LUZ DA LAMPADA E PROJETA UM FEIXE DE LUZ SOBRE O ESPÉCIME. ESSE FEIXA DE LUZ IRÁ ATRAVESSA-LO
OBJETIVA = RECEBE A LUZ QUE ATRAVESSOU O ESPÉCIME E PROJETA UMA IMAGEM AUMENTADA DO OBJETO EM DIREÇÃO À OCULAR
OCULAR = AMPLIA A IMAGEM NOVAMENTE E A PROJETA, SEJA NA RETINA, OU EM UMA TELA
fluorescencia qual o corante e pra que tipo de molécula
laranjado de acridina
DNA, RNA, e outras
imunohistoquimica
A imuno-histoquímica (IHQ) é um método de localização de antígenos (e.g. proteínas) em tecidos, explorando o princípio da ligação específica de anticorpos a antígenos no tecido biológico.[1] O nome da técnica provém das raízes “imuno”, em referência aos anticorpos utilizados no procedimento, e “histo”, significando tecido (compare com imunocitoquímica). A coloração imuno histoquímica é amplamente utilizada no diagnóstico de células anormais, tais como aquelas encontradas em neoplasias.
microscopia eletrônica de transmissão, varredura para que serve e dierenças
O microscópio eletrônico possui dois tipos de transmissão e de varredura, a diferença entre os dois é que o de transmissão serve para estudar as estruturas cortadas em fatias muito finas, em contrapartida, os microscópios de varredura são utilizados para analisar a superfície do corpo de seres vivos, de células
Microscópio Eletrônico de Transmissão (MET): Neste microscópio o feixe de elétrons atravessa a célula e forma a imagem em uma tela fluorescente, dando detalhes de moléculas, organelas e estruturas intracelulares, tendo capacidade de produzir imagens de alta resolução e ampliação (até 300 mil vezes).
Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV): A formação de imagem deste microscópio é feita com os elétrons que varrem a superfície das estruturas biológicas. Deste modo, este microscópio nos fornece uma imagem da superfície, com noções de profundidade e tridimensionalidade e seu limite de resolução é cerca de 0.3nm.
eletromicrografia
Eletromicrografia ou micrografia eletrônica é uma imagem obtida pela fotografia da imagem da tela de um microscópio eletrônico de varredura, ou pela incidência de elétrons em um filme fotográfico no microscópio eletrônico de transmissão.
resina plasticas
resinas plásticas, como o glicol metacrilato
criofratura
[Bio.] Método de microscopia eletrônica no qual as amostras são congeladas em nitrogênio líquido e então fraturadas para separar a camada bilateral de lipídios, expondo a face interior das membranas celulares.
A criofratura é um método de microscopia eletrônica.
Tricrômico de Masson o que é e quais os constituintes
Corante ou coloração tricromo ou tricrômica de Masson é uma combinação de corantes usados em um protocolo de coloração de três cores em histologia.
hematoxilina
fsuscina acida
ponceau de xilidina
verde liz
aparece colageno em verde, mm em rosa, etc
fucsina resorcina de weigert o que é e serve para qual tecido
cora as fibras elasticas de marrom
impregnação argentica - golgi qual o material usado
sais de prata
coloração de wright quais os corantes usados e para que serve
eosina + azul de metileno
mto util em cel do sangue
É usado principalmente para a coloração de esfregaço de sangue periférico, amostras de urina e medula óssea, biópsia por aspiração por agulha, que são examinadas sob um microscópio ótico. Em citogenética, é usado para colorir cromossomos para facilitar o diagnóstico de síndromes e doenças
As amostras de urina coradas com a coloração Wright identificarão eosinófilos os quais podem indicar nefrite túbulo-intersticial ou infecção do trato urinário [4]
Glóbulos brancos corados com coloração de Wright
QUANDO DE USA O MÉTODO FÍSICO DE CONGELAMENTO
GERALMENTE EM HOSPITAIS, QUANDO QUERO ESTUDAR PROT, ENZIMAS, LIPIDEOS
QUANDO SE USA A FIXAÇÃO DUPLA
PARA MICROSCOPIA ELETRONICA
A DESIDRATAÇÃO COM ETANOL É EM SOLUÇÃO CRESCENTE OU DECRESCENTE?
CRESCENTE
DETALHE O PROCESSO DE COLORAÇÃO COM TODAS AS SUAS ETAPAS
1 - REMOVER PARAFINA COM XILOL E TOLUOL 2-REHIDRATAR COM ALCOOL DECRESCENTE 3-CORAR COM HEMATOX 4-DESIDRATAR 5-CORAR COM EOSINA 6-REIDRATAR
ACABAR DE PREENCHER
QUAIS AS ORGANELAS BASOFILAS?
AC. NUCLEICOS
GLICOSAMINOGLICANOS
GLICOPROT ÁCIDAS
QUAIS AS ORGANELAS ACIDOFILAS
MIT
GRANULOS SECREÇÃO
PROT. CITOPLASM.
COLAGENO (FIBRAS)
TRICONIDE DE MALLORY E MASSAN CORA O QUE?
COLÁGENO DO M. LISO DE VERDE
PICOSIRIUS CORA O QUE?
COLAGENO EM VERMELHO
METAIS PRATA E OURO CORA O QUE?
TEC. NERVOSO
CONTRACORANTE EM QUAL MÉTODO USAR E PORQUE
PARA VER OS CONTORNOS DA CÉLULA COMO O NÚCLEO E OS LIMITES DA CÉLULA
É USADO NA IMUNOHISTOQÚIMICA PORQUE ESSA TÉCNICA USA PRECIPTADOS OU CORANTES FLUORESCENTES, QUE NÃO EVIDENCIAM TANTO OS CONTORNOS DA CÉLULA E OS NÚCLEOS.
DE QUAL COMPONENTE DO MIC. LUZ DEPENDE A RESOLUÇÃO?
OBJETIVA
PORQUE A OCULAR SOMENTE AUMENTA A IMAGEM PROJETADA NELA PELA OBJETIVA
MICROSCOPIA DE CONTRASTE DE FASE QUANDO USAR
PARA QUE SERVE
QUAL SEU MECANISMO DE GERAR IMAGENS
UTILIDADE
PARA VER CELULAS E CORTES NAO CORADAS (TRANSPARENTES), EX CEL VIVAS
EM CÉLULAS TRANSPARENTES, QUASE TODAS AS PARTES DO ESPÉCIME TEM A MESMA DENSIDADE ÓPTICA, POR ISSO SÃO DIFÍCEIS DE SE OBSERVAR
ASSIM, POR ESSE MÉTODO, AS IMAGENS SÃO GERADAS ATRAVÉS DA MUDANÇA DE VELOCIDADE DA LUZ (índice de refração) AO ATRAVESSAR ESTRUTURAS COM DIFERENTES INDICES DE REFRAÇÃO
ISSO FAZ COM QUE ALGUMAS ESTRUTURAS APAREÇAM MAIS CLARAS, E OUTRAS + ESCURAS
ÓTIMO PARA CÉLULAS VIVAS!!!
MICROSCOPIA DE CONTRASTE DIFERENCIAL - NORMANSKI QUANDO USAR
PARA QUE SERVE
IDÉM MIC DE CONTRASTE DE FASE, SERVE PARA VER CÉLULAS NÃO CORADAS (TRANSPARENTES)
PORÉM AO INVÉS DE FOCAR NO CONTRASTE CLARO/ESCURO, FORMA UMA IMAGEM PSEUDO 3D.
PERMITE AVALIAR A SUPERFICIE DAS CÉL
MICROSCOPIA CONFOCAL OU VARREDURA CONNFOCAL
QUANDO USAR
PARA QUE SERVE
MÉTODO DE AÇÃO
USADO PARA ESTUDAR UM PLANO ESPECÍFICO DO OBJETO (SECÇÃO ÓPTICA)
PORQUE EM OUTROS MICROSCÓPIOS, OCORRE A SUPERPOSIÇÃO DE VÁRIOS PLANOS DO OBJETO
ASSIM, LOCALIZA COMPONENTES COM MUITA PRECISÃO
SE MARCA O COMPONENTE QUE QUER LOCALIZAR COM FLUORESCENCIA, E O FEIXE UTILIZADO É DE LASER
DEPOIS, PODE-SE REUNIR OS VÁRIOS PLANOS OBTIDOS EM UMA IMAGEM 3D ATRAVÉS DE COMPUTAÇÃO
3D
USA FEIXE DE LASER
FOCALIZA UM PLANO DA CEL COM MOLECULA FLUORESCENTE
