Métodos de Estudo Flashcards
defina histologia
estudo dos tecidos do corpo e como estas estruturas se organizam para construir os órgãos e os sistemas
Qual fator define a clareza para observação de uma amostra? Como é mensurado esse fator?
Poder de Resolução - menor distância de observação entre duas partículas, ou seja, a capacidade do instrumento em diferenciar duas estruturas próximas
Diferencie Aumento e Poder de Resolução
O poder de resolução determina o distanciamento entre partículas e o aumento apenas a aproximação da imagem analisada
Qual fator deve ser levado em conta ao observar-se um corte histológico de uma amostra
Plano de corte - as estruturas são tridimensionais, portanto, deve-se levar em consideração as diferentes representações que uma mesma estrutura pode apresentar dependendo do ângulo de secção
Quais e quantas são as partes mecânicas de um microscópio de luz?
7 partes
1. Base
2. Micro/Macrométrico
3. Charriot
4. Platina ou Bandeja
5. Revólver
6. Braço
7. Tubo
Quais e quantas são as partes ópticas do microscópio de luz?
Lente ocular
Lente objetiva
Lente condensadora
Como é calculado o aumento proporcionado por um conjunto de lentes?
São multiplicados os respectivos aumentos
Quais e quantas são as etapas de preparo de amostras? Quais os os materiais utilizados em cada etapa?
8 etapas
Fixação - paraformaldeído glutaraldeído
Desidratação - álcool ou acetona
Infiltração/Inclusão/Embebição - parafina
Microtomia - lâmina de aço
Hidratação - água
Coloração - corantes
Desidratação - álcool ou acetona
Montagem - entelan, permount ou bálsamo do canadá
Porque se faz necessária a etapa de clarificação durante a preparação de amostras? Como funciona essa etapa?
Após o processo de desidratação, é necessário substituir o álcool contido no tecido, para isso, é utilizado um solvente geralmente orgânico, como o xilol e o toluol (anfifílicos), que são miscíveis tanto em etanol como no meio de inclusão (parafina).
Quando os fragmentos de tecido são embebidos no solvente eles se tornam translúcidos e depois, quando mergulhados na parafina derretida, o solvente evapora e dá lugar para a parafina.
Caracterize e diferencie uma coloração histológica de uma coloração histoquímica. Dê exemplos
coloração histológica - visa evidenciar a morfologia da célula
Ex.: HE- Hematoxilina e Eosina
coloração histoquímica- visa evidenciar a composição bioquímica da estrutura
Ex.: Técnica PAS - identifica a presença de glicogênio no tecido
Quais os corantes mais usuais utilizados nas colorações histológicas? Detalhe seus funcionamentos.
HE- Eosina e Hematoxilina
Eosina - corante de caráter ácido - afinidade com estruturas básicas (acidófilas) - cora as estruturas citoplasmáticas (Ex.: mitocôndrias) - corante rosa
Hematoxilina - corante de caráter básico - afinidade com estruturas ácidas (basófilas) - cora as estruturas do núcleo (ácidos nucleicos) - corante roxo
Defina o que é um Artefato Técnico em uma lâmina histológica.
Alterações das imagens observadas ao microscópio causadas por manipulação física ou química durante o preparo da lâmina.
Quais são as 8 principais causas da formação de um Artefato Técnico
- dente na navalha de corte
- talco na luva
- precipitado de corantes
- retração ou intumecimento do tecido
- autólise
- fragmentação do tecido
- dobras
- bolhas
Quais os dois tipos de microscopia eletrônica?
Varredura - utilizada para observação de superfície, por gerar contraste de profundidade dá a impressão de ser tridimensiional (pseudotridimensionais)
Transmissão - utilizada para observação de estruturas histológicas que não são visíveis pelo microscópio de luz (maior poder de resolução)
Ex.: membrana celular
são bidimensionais
Diferencie a microscopia de luz e a microscopia eletrônica.
A microscopia de luz utiliza de lentes e luz para que haja ampliação da imagem dos tecidos. Já a microscopia eletrônica utiliza de feixe de elétrons que interagem de forma diferente com estruturas celulares distintas, possibilitando a diferenciação dessas. Ademais, a microscopia eletrônica permite maior resolução.
Como são preparadas as amostras para microscopia eletrônica?
São necessários cortes muito mais delgados que na microscopia de luz, por isso, os tecidos são incluidos em resinas que permitem essa microtomia.
Além disso, os cortes devem ser feitos com navalhas de vidro ou de diamante e coletados sobre pequenas grades de metal.
Também não ocorre o uso de corantes, apenas a impregnação por metais, como ouro e prata, o que gera uma imagem preta e branca que pode ser colorida artificialmente.
Defina processamento histológico.
conjunto de procedimentos técnicos que objetificam a produção de uma lâmina histológica
Diferencie regiões elétron-densas e elétron-lucentes em microscopia eletrônica.
Na microscopia eletrônica as regiões elétron-densas são aquelas que os elétrons são refletidos e, portanto, não interagem com a tela fluorescente, então se apresentam como uma parte mais escura da amostra. Já nas regiões elétron-luscentes os elétrons atravessam a amostra, interagindo com a tela fluorescente, gerando uma coloração mais clara na amostra.
Cite dois tipos de microscópio que possibilitam a visualização de células ou tecidos vivos.
- microscópio eletrônico de varredura confocal
- microscópio de luz em contraste de fase
